1、课后集训基础达标 1.凝胶色谱法中所用的凝胶的化学本质大多是（）A.糖类化合物 B.脂质C.蛋白质 D.核酸解析：凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些微小的球体，大多是由多糖类化合物构成的。答案：A2.分离血红蛋白溶液时，离心后试管中的溶液分四层，血红蛋白在第_层（）A.一 B.二 C.三 D.四解析：离心后的第一层是有机溶剂，第二层是脂类物质，第三层是血红蛋白，第四层是红细胞破碎物。答案：C3.凝胶色谱法分离蛋白质的依据是（）A.对其他分子的亲和力B.溶解度C.所带电荷多少D.相对分子质量的大小解析：凝胶色谱法分离蛋白质的依据是相对分子质量的大小。相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部通道
2、，路程长，移动慢。答案：D4.血红蛋白由条肽链组成（）A.2 B.4 C.3 D.5解析：血红蛋白由四条肽链组成，即两条肽链和两条肽链。答案：B5.将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是（）A.无色透明的甲苯层B.脂溶性物质的沉淀层C.血红蛋白的水溶液D.其他杂质的暗红色沉淀物解析：试管中的第一层是有机溶剂，第二层是脂类物质，第三层是血红蛋白溶液，第四层是红细胞破碎物沉淀。答案：C6.的蛋白质能进入凝胶内部通道 （）A.相对分子质量大的 B.吸附性高的C.相对分子质量小的 D.溶解度低的解析：当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小
3、的蛋白质容易进入凝胶内部的通道。答案：C7.透析时取血红蛋白溶液装入透析袋内，放入缓冲溶液中（）A.2 mL B.1.5 mLC.0.5 mL D.1 mL解析：考查样品处理的操作。透析时，取1 mL的血红蛋白溶液装入透析袋中。答案：D8.洗涤红细胞时，分离所用方法为（）A.低速长时间离心B.低速短时间离心C.高速长时间离心D.高速短时间离心解析：洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化，分离时采取低速短时间离心。答案：B9.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是（）A.增大蛋白质的相对分子质量B.改变蛋白质的形状C.掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D.减少蛋白质的相对分子质
4、量解析：SDS（十二烷基硫酸钠）聚丙烯酰胺凝胶电泳法加入SDS的目的是使蛋白质完全变性，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别。答案：C10.制作凝胶色谱柱时，橡皮塞顶部凹穴内插入的移液管的部位及长度是（）A.移液管头部5 cmB.移液管尾部 5 cmC.移液管头部 3 cmD.移液管尾部 3 cm解析：凝胶色谱柱制作时，将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴，将0.5 mL的移液管头部切下5 cm长的一段，插入橡皮塞孔内。答案：A综合运用 11.科学家研究发现，人的血液pH通常在7.357.45之间变化，其变化范围很小，这是由于血液中含有许多对缓冲物
5、质，如H2CO3/NaHCO3、NaH2PO4/Na2HPO4等，其中H2CO3/NaHCO3在血液中浓度最高，缓冲能力最强，对维持血液正常最重要。(1)当人体内碱性物质（如Na2CO3）增加时，H2CO3/NaHCO3缓冲对中的_就与之作用，生成_，过多的该物质可由肾脏排出，从而维持pH基本不变。(2)若人体内酸性物质（如无氧呼吸产物乳酸）增加时，则该缓冲对中的_就会与乳酸作用，从而维持pH基本不变。解析：生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，血液的pH之所以保持在7.357.45之间，是因为血液中存在缓冲物质，从而调节血液的pH。答案：（1）H2CO3NaHCO3（2）N
6、aHCO312.对血红蛋白的研究结果表明，血红蛋白实际上是由珠蛋白、原卟啉和二价铁离子（Fe2+）所组成的结合蛋白质。有4条肽链各结合一个辅基即血红素，O2结合于Fe 2+上，血红蛋白与氧疏松结合形成氧合血红蛋白（HbO2），这种氧合作用于氧分压高时容易进行，于氧分压低时易于解离。红细胞结合和携带O2的过程并不影响二价铁离子，也就是说不使之氧化为三价铁离子（Fe 3+无携带O2的能力）。CO与Hb的亲和力大于O2，结合成HbCO后不能重新分离，致使Hb丧失运输O2和CO2的机能，此称一氧化碳中毒即煤气中毒。(1)用凝胶色谱法分离出血红蛋白时，待_接近色谱柱底端时，才用试管收集。血红蛋白因含_而
7、呈现红色。(2)要使血红蛋白从红细胞中释放出来，可选用_的方法。(3)红细胞具有运输氧的功能，是因为具有_的特性。(4)亚硝酸盐为强氧化剂，进入人体后，可使血红蛋白失去运输氧的功能，导致组织缺氧，其可能的原因是。解析：考查的知识点包括：凝胶色谱法分离蛋白质的操作步骤和方法、血红蛋白的分离与作用、亚硝酸盐对人体的危害。答案：（1）红色区带血红素（2）将红细胞置于蒸馏水中，加体积分数为40%的甲苯，并搅拌使之破裂（3）红细胞中的血红蛋白与氧在氧分压高时容易结合，在氧分压低时又容易分离（4）亚硝酸盐可使血中低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白13.(2006山东潍坊统考) 凝胶色谱技术是20世纪60年代初
8、发展起来的一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便、不需要有机溶剂、对高分子物质有很高的分离效果，目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。参照右上图，完成问题：(1)a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是_，原因是。(2)自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由_替代。(3)装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是_。(4)若选用SephadexG100，则“G”表示，100表示_。(5)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体_（相同/不同），洗脱
9、时，对洗脱液的流速要求是_。解析：考查凝胶色谱法分离蛋白质的原理、色谱柱的制作材料、装填色谱柱的注意事项、洗脱液的使用等知识。答案：（1）aa相对分子质量大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快（2）尼龙网和尼龙纱（3）气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果（4）凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水10 g（5）相同保持稳定14.(2006山东济南统考) 红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，
10、请完成下列有关问题：(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：_、_、_和_。(2)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是_。以上所述的过程即是样品处理，它包括、_、_收集血红蛋白溶液。(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是_。透析的原理是_。(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是_。血红蛋白有什么特点？。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？。解析：这是一道综合题，考查的知识点包括：血红蛋白提取和分离的程序、加入柠檬酸钠的目的、样品的处理、凝胶色谱法纯化的目的、血红蛋白的特点等知识。答案：（1）样品处理粗分离纯化纯度鉴定（2）防止血液凝固红细胞的洗涤血红蛋白的释放（3）去除相对分子质量较小的杂质透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内（4）通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去血红蛋白呈现红色，在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操
