1、课时跟踪检测（四十一） DNA的粗提取与鉴定一、选择题1鉴定DNA的试剂是()A斐林试剂B苏丹染液C双缩脲试剂D二苯胺试剂解析：选D鉴定DNA用的试剂是二苯胺，苏丹染液用于鉴定脂肪，斐林试剂用于鉴定可溶性还原糖，双缩脲试剂用于鉴定蛋白质。2在提取DNA的过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是()A不易破碎B减少提取过程中DNA的损失C增加DNA的含量D容易刷洗解析：选BDNA易被玻璃器皿吸附，使用塑料试管和烧杯，可以减少DNA的损失。3(2018海安期中)在生物实验中，可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，检测生物组织中的有关有机化合物的存在。下列实验内容正确的是()A检测成分：还原糖。检测
2、试剂：斐林试剂。部分实验步骤：甲、乙液等量混匀后，注入待测组织样液中，颜色变化：砖红色B检测成分：脂肪。检测试剂：苏丹染液。部分实验步骤：将花生子叶切片染色后，制成临时装片，在显微镜下观察，颜色变化：橘黄色C检测成分：蛋白质。检测试剂：双缩脲试剂。部分实验步骤：A、B液混匀后，注入待测组织样液中，并进行隔水加热，颜色变化：紫色D检测成分：DNA。检测试剂：二苯胺试剂。部分实验步骤：将提取的含杂质较少的DNA丝状物再溶解，加入二苯胺混匀后，进行沸水浴5 min，颜色变化：蓝色解析：选D还原性糖的鉴定还需要水浴加热；将花生子叶切片用苏丹染液染色，用酒精洗去浮色后制成临时装片，在显微镜下观察呈现橘黄
3、色；双缩脲试剂鉴定蛋白质时，先加双缩脲试剂A(0.1 g/mL NaOH浓度)，再加入双缩脲试剂B(0.05 g/mL CuSO4)，摇匀后成紫色，不需要水浴加热；将提取的含杂质较少的DNA丝状物再溶解于2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺混匀后，进行沸水浴加热5 min，呈现蓝色。4下列有关DNA的粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是()A取材：鸡血细胞。原因：有细胞核，其他动物的血细胞都没有细胞核B粗提取：不同浓度的NaCl溶液。原因：DNA在其中的溶解度不同C提纯：95%的冷酒精。原因：DNA溶于酒精，蛋白质等杂质不溶于酒精D鉴定：二苯胺试剂。原因：DNA溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色解析
4、：选B除了哺乳动物成熟的红细胞，其他动物的血细胞都有细胞核。DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，从而粗提取DNA。DNA不溶于酒精，蛋白质等杂质溶于酒精，进而提纯DNA。DNA溶液加入二苯胺试剂后需沸水浴加热才会呈蓝色。5(2018常州一模)在DNA粗提取与鉴定实验中，将获得的含有DNA的黏稠物分别按下表处理3次，则DNA主要集中在标号()操作黏稠物滤液2 molL1的NaCl溶液搅拌过滤0.14 molL1的NaCl溶液搅拌过滤95%的冷酒精搅拌过滤A.BCD解析：选BDNA在2 molL1的NaCl溶液中溶解度大，过滤后DNA存在于滤液中；DNA在0.14 molL1的NaCl溶
5、液中溶解度低，搅拌过滤后存在于黏稠物中；DNA不溶于95%的冷酒精，搅拌过滤后存在于黏稠物中。6(2018南通一模)如图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，下列相关叙述正确的是()A图1中溶液a是0.14 molL1的NaCl溶液B图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白质等杂质不溶C图2所示实验操作中有一处明显错误，可能导致试管2中蓝色变化不明显D图2试管1的作用是证明2 molL1 NaCl溶液遇二苯胺出现蓝色解析：选C图1中是将丝状物溶解，溶液a是2 molL1的NaCl溶液；加入冷却的酒精的目的是除杂，原理是DNA不溶于冷酒精，而杂质蛋白能溶于酒精；图2操作中的错误
6、是试管2中未将DNA溶于2 molL1的NaCl溶液中，可能导致试管2蓝色变化不明显；图2试管1的作用是证明2 molL1NaCl溶液遇二苯胺不会出现蓝色。7(2018南京一模)下列有关用鸡血进行DNA粗提取和鉴定实验的操作，错误的是()A鸡血细胞中加入蒸馏水后，用玻璃棒搅拌B用蛋白酶纯化溶解于2 molL1 NaCl溶液中的DNAC在溶有DNA的滤液中加入体积分数为95%的冷酒精可析出DNAD将卷在玻璃棒上的丝状物加入4 mL二苯胺试剂中，沸水浴加热，冷却后观察解析：选D卷在玻璃棒上的丝状物(DNA)首先溶于2 molL1NaCl溶液中，然后再加4 mL二苯胺试剂，沸水浴加热，冷却后观察颜色
7、变化。8下列关于DNA粗提取和鉴定实验的叙述，正确的是()A加入预冷的体积分数为95%的酒精后用玻璃棒要轻缓搅拌B调节NaCl溶液物质的量浓度至0.14 molL1，过滤后取滤液进行后续步骤的操作C在剪碎的植物中加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨D向溶有DNA的NaCl溶液中加入适量二苯胺试剂后溶液即呈蓝色解析：选ADNA在0.14 molL1的NaCl溶液中溶解度最低，过滤后取纱布上的黏稠物进行后续步骤的操作；用植物材料提取DNA时要加入食盐和洗涤剂，前者是溶解DNA，后者是破坏细胞膜；向溶有DNA的NaCl溶液中加入适量二苯胺试剂，然后要沸水浴加热，最后才可观察到溶液呈蓝色。9(2018
8、苏州期初)如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图，下列有关叙述正确的是()ADNA在常温下遇到二苯胺会被染成蓝色B图中加入蒸馏水的目的是稀释盐溶液使DNA析出CDNA在2 mol/L的盐溶液中溶解度比较小D加入酒精后需用玻璃棒快速来回搅拌解析：选BDNA溶液加入二苯胺试剂，在沸水浴加热的条件下会变蓝；在DNA浓盐溶液中加入蒸馏水的目的是稀释盐溶液，降低DNA的溶解度，使DNA析出；DNA在2 mol/L的盐溶液中溶解度比较大；加入酒精后需用玻璃棒搅拌，动作要轻缓，以免加剧DNA分子断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。10若从植物细胞中提取DNA，发现实验效果不好，如看不到丝状
9、沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等，其不可能的原因是()A植物细胞中DNA含量低B研磨不充分C过滤不充分D95%冷酒精的量过少解析：选A研磨不充分、过滤不充分均会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少；若用于沉淀DNA的酒精量过少，也会导致DNA的沉淀量变少。11“DNA粗提取”实验中，应尽可能避免DNA断裂和降解。下列相关操作正确的是()A以菜花为材料进行研磨时，可以适当加热以促进DNA溶解B向DNA溶液中迅速加入蒸馏水，使DNA快速析出C将丝状物溶解到2 molL1NaCl溶液中后，加水析出D向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌解析：选D以菜花为材料进行研磨时要加
10、洗涤剂和食盐，不能加热，否则DNA水解酶活性会上升，会加速分解DNA；向DNA溶液中加蒸馏水要缓慢，使DNA充分析出；将丝状物溶解到2 molL1 NaCl溶液中的目的是为了进行鉴定，应该加入二苯胺试剂，不是加水；向DNA溶液中加入冷酒精并沿同一方向缓慢搅拌析出DNA，防止DNA断裂。12(2017苏北四市三模，多选)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，下列叙述错误的是()A用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 molL1，去除析出物B调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C将丝状物溶解在2 molL1 NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D由于DNA对高温耐
11、受性较差，故需向DNA滤液中加入冷酒精解析：选ACD用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 molL1，过滤去除溶液中的杂质，取出析出物。调节NaCl溶液浓度可以去除与DNA溶解度不同的杂质；加入木瓜蛋白酶可以去除蛋白质类杂质。将丝状物溶解在2 molL1 NaCl溶液中，加入二苯胺试剂沸水浴5 min，冷却后呈蓝色。由于DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，故需向DNA滤液中加入冷酒精提纯DNA。13(多选)下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是()A新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于DNA的粗提取B植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水涨破CDNA不溶于95%的冷酒精而溶于2 m
12、olL1的NaCl溶液D溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，需沸水浴加热后冷却，再观察颜色解析：选CD新鲜菜花可用于DNA的粗提取，但猪血中几乎不含DNA；植物材料需先用洗涤剂破坏细胞膜。14(2017苏锡常镇三模，多选)研究人员比较了不同贮藏条件对棉叶DNA纯度及提取率(提取率越高，获得的DNA越多)的影响，实验结果见下图。下列有关叙述正确是()A提纯DNA时可加入酒精去除不溶的蛋白质、酚类等物质B新鲜棉叶提取的DNA纯度最高，提取DNA的量也最多C木瓜蛋白酶和不同浓度的NaCl溶液均可用于提纯DNAD用二苯胺试剂鉴定，颜色最深的是冷冻3 d处理后提取的DNA解析：选CD提纯DNA时可
13、加入酒精去除可溶的蛋白质、酚类等物质；新鲜棉叶提取的DNA纯度最高，冷冻3 d时提取DNA的量最多，二苯胺试剂鉴定颜色最深；木瓜蛋白酶可以去除蛋白质，不同浓度的NaCl溶液可去除与DNA溶解度不同的杂质。二、非选择题15(2017南通三模)为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA，科研人员比较了A方法(通过CTAB裂解细胞，并与蛋白质形成复合物)、B方法(通过SDS裂解细胞释放核DNA，使蛋白质变性)、C方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总DNA的效果，主要实验步骤和相关检测结果如下，其中氯仿异戊醇不溶于水且密度均大于水，DNA不溶于氯仿异戊醇，蛋白质等溶于氯仿异戊醇。分析回答：主要
14、提取过程：结果检测：组织方法组别OD260/OD230OD260/OD280得率(gmg1)嫩叶A方法A11.9701.8210.105B方法B11.9731.7190.096C方法C11.6471.5680.082块根A方法A21.8881.8880.029B方法B21.8111.6820.030C方法C21.3761.3200.020注：纯净的DNA样品OD260/OD230值约为2.0，过低表明小分子物质残留较多。纯净的DNA样品OD260/OD280值约为1.8，若比值大于1.8表示存在RNA残留；若小于1.8表示存在蛋白质残留。得率是指每毫克组织所提取的DNA量。(1)步骤将DNA粗
15、提液在65 水浴保温60 min的目的是_。步骤“？”表示_。步骤中加RNA酶的作用是_。(2)影响DNA纯度的物质主要有_。提取的DNA中RNA残留较多的方法是_。以嫩叶为材料提取DNA的得率较高，原因是_。(3)电泳可以直观对比DNA的完整性，分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同，从而产生不同的条带。如图是上述实验中提取到的总DNA凝胶电泳结果，其中M是已知大小的不同DNA的混合物。实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带，而C方法有明显的“拖尾”现象。只出现一条带的原因是_。出现“拖尾”现象的原因是_。解析：(1)将DNA粗提取液在65 水浴保温，65 能够使蛋白质变性
16、，而DNA耐高温。DNA不溶于氯仿异戊醇，故离心后DNA存在于上清液中。RNA酶可降解RNA，提高DNA纯度。(2)由实验过程及结果可知，DNA中的杂质主要是蛋白质、RNA、小分子物质等。根据“OD260/OD280比值大于1.8表示存在RNA残留”得出，A方法提取的DNA中RNA残留较多。以嫩叶为材料提取DNA的得率较高，原因是嫩叶细胞分裂旺盛，DNA含量高。(3)生物总DNA有多种DNA分子，只形成一条带说明DNA分子分子量大，不易分离。DNA分子发生断裂或降解，生成较多不同大小的相对较小的DNA分子，电泳时略有分离但又不充分，出现“拖尾”现象。答案：(1)使蛋白质变性上清液水解RNA，去除RNA杂质(2)蛋白质、RNA、小分子物质A方法细胞分裂旺盛(3)甜菜细胞基因组DNA分子都比较大，不容易分离DNA发生断裂或降解，形成许多大小不等的DNA片段
