1、动物细胞培养和核移植技术1关于动物细胞培养的叙述，错误的是()A用于培养的细胞大都取自胚胎、幼龄动物的器官或组织B将所取的组织需用胰蛋白酶等处理使其分散成单个细胞C在培养瓶中要定期用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离，制成细胞悬浮液D动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞都会衰老死亡答案D解析动物细胞培养传至1050代左右时，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象，但少数细胞的遗传物质会发生改变，获得不死性，就能在适宜培养条件下无限制地传代下去。2名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后，给皮肤烧伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本，再让其在特殊的膜片上增殖。
2、57天后，将膜片敷在患者的伤口上，膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口，并促进新生皮肤层生长，达到加速伤口愈合的目的。下列有关叙述中，错误的是()A“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程B人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降C种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人D膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口，加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的糖蛋白有关答案B解析根据题意可知，“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程中的动物细胞培养；人的皮肤烧伤后会因人体第一道防线的破坏而导致免疫力下降；种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人，以避免发生免疫排斥反应；细胞膜上的糖蛋白具有识别、免疫、保护等作用，与
3、细胞免疫排斥反应有关，因此膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口，加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的糖蛋白有关。3下列关于哺乳动物体细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的是()A体细胞核移植过程中通常用卵细胞作为受体细胞B目前科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体C利用动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的家畜D用于核移植的供体细胞一般都选用传代50代以内的细胞答案C解析体细胞核移植过程中常用处于M中期的卵母细胞作为受体细胞；动物体细胞的全能性受到限制，不能经过培养获得完整的动物个体；用于核移植的供体细胞一般是10代以内的细胞；克隆动物细胞核内的遗传物质来自供体细胞，其性别与提供细
4、胞核的动物一致，因此可有选择地克隆某一性别的家畜。4下图是某克隆羊的培育过程模式图，则与获得该克隆羊接近的生殖方式和其发育成熟时所分泌的主要性激素分别是()A无性生殖、雄性激素B无性生殖、雌性激素C有性生殖、雄性激素 D有性生殖、雌性激素答案A解析克隆羊的产生属于无性生殖；由于此过程是雄性羊供核，故得到的克隆羊为雄性，所分泌的主要性激素是雄性激素。5在将动物组织块分散成单个细胞时，可以使用胰蛋白酶。由此判断以下推测不合理的是()A动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系B处理时一定要注意处理时间、加酶量C胰蛋白酶一定不会对动物细胞造成损伤D动物细胞培养液的pH应与胰蛋白酶作用的适宜pH基本一致答案C
5、解析胰蛋白酶可使蛋白质分解，又可破坏动物细胞之间的联系，可推测动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系；细胞膜中含有蛋白质成分，所以一定要注意处理的时间和酶的用量，以防止对动物细胞造成损伤；酶促反应需要适宜的pH，所以培养液的pH应与胰蛋白酶作用的适宜pH基本一致。6实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是()A甲过程需要在无菌条件下进行B乙过程可用胰蛋白酶处理皮肤组织C丙过程是原代培养，会出现接触抑制现象D丁过程是传代培养，细胞不能保持二倍体核型答案D解析甲过程取小鼠的皮肤组织应在无菌条件下进行；乙过程可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理皮肤组织，获得单细胞悬液；丙过程是原代培养，原代培养
6、会出现接触抑制现象；丁过程是传代培养，传代培养细胞通常10代以内能保持二倍体核型，10代以后核型可能发生变化。7从母羊甲的体细胞中取出细胞核，移植入母羊乙的去核卵母细胞中，融合后的细胞经有丝分裂形成早期胚胎，再植入另一只母羊丙的子宫内。下列有关说法正确的是()A生出小羊的性状与甲羊完全相同B一般来说生出小羊的核基因型与甲羊完全相同C生出小羊的遗传物质由甲、乙两双亲共同决定，所以该过程为有性生殖D生出小羊的性状由甲、乙、丙三个亲本的基因型与环境共同决定答案B解析小羊由重组细胞发育而来，重组细胞的细胞核来自甲羊，细胞质来自乙羊；遗传物质DNA主要在细胞核内，少量存在于细胞质的线粒体内，故小羊性状大
7、部分与甲羊相同，少量与乙羊相同；此过程为无性生殖。8.如图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据图回答：(1)容器A中放置的是动物器官或组织，它一般取自_。(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是_，然后用_酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是_。(3)培养先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和_等，细胞增殖产生的新细胞会表现出_生长现象。当细胞分裂生长相互接触时，就会停止分裂增殖，这称为_现象。需用胰蛋白酶处理后分瓶继续培养，称为_。(4)细胞在C瓶培养，出现极少数细胞无限繁殖，其原因是_。答案(1)胚胎或幼龄动物(2)剪碎胰蛋白(或胶原蛋白)使细
8、胞与培养液充分接触(3)动物血清贴壁接触抑制传代培养(4)细胞的遗传物质发生了改变，带有癌变特点解析(1)胚胎或幼龄动物的细胞具有旺盛的分裂能力，培养后可获得较多细胞。(2)为了增加细胞与培养液的接触面积，应使细胞分散开来，可先用物理方法剪碎，再用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。(3)血浆中含有丰富的营养成分，为良好的天然营养物质；在培养过程中细胞会出现接触抑制现象，需用胰蛋白酶处理，使之分散开，以便与培养液充分接触；若再分瓶培养则为传代培养。(4)培养过程中细胞的遗传物质可能发生变异而具有癌细胞的特点，即具有无限增殖能力。9核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如下图)。正常细胞内
9、含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述，正确的是()A免疫的B细胞及其互相融合细胞因全合成途径被A阻断而在HAT培养基上不能增殖B骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖C杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径，所以能在HAT培养基上大量增殖DHAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体答案B解析免疫的B细胞及其互相融合细胞均属于高度分化的细胞，不能增殖，A项错误；骨髓瘤细胞及其互相融合细胞缺乏转化酶，又因
10、HAT培养基中的物质A阻断了全合成途径，所以在HAT培养基上不能增殖，B项正确；杂交瘤细胞因为可以进行补救合成途径，能够在HAT培养基上大量增殖，C项错误；HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞能大量增殖，也能产生专一的抗体，但不一定产生目标抗体，D项错误。10如图为小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)培养的过程图，下列叙述错误的是()A可用胶原蛋白酶分散组织块中的细胞BMEF细胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化C加入培养液中的MEF细胞最好是来自传代培养的细胞D细胞培养过程中可能出现细胞贴壁和接触抑制的现象答案C解析将动物组织细胞分散成单个细胞，可以用胶原蛋白酶或胰蛋白酶处理；由图可知，在胚胎干细胞培
11、养液中加入MEF细胞，胚胎干细胞不分化，但未加入MEF细胞的一组易分化，据此推知MEF细胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化；加入培养液中的MEF细胞最好是来自原代培养的细胞；在动物细胞培养过程中可能出现细胞贴壁和接触抑制的现象。11动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。不能从该图获得的结论是()A正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B有无血清对正常细胞培养的影响较大C培养基中补充血清有助于正常细胞的培养D培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大答案A解析分析图中曲线可知，对癌细胞来说，相同的培养时间内，培养基中有无血清，其细
12、胞数目相差不大，说明培养基中有无血清对癌细胞的培养影响不大；对正常细胞来说，在相同的培养时间内，有血清的培养基中培养的细胞数目远远多于没有血清的培养基中培养的细胞数目，说明有无血清对正常细胞的培养影响较大；在相同条件和相同的培养时间内，癌细胞和正常细胞的数目差距较大，正常细胞达到一定的数目后不再增加，而癌细胞却能不断增加。12某研究小组为测定某药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法不正确的是()A在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理B为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素C细胞培养应在含CO
13、2的恒温培养箱中进行，其作用是维持培养液的pHD将数量相等的甲、乙细胞分别置于相同且适宜的条件下培养，一段时间后，会观察到甲细胞的数量比乙细胞的多答案A解析动物细胞培养的适宜pH为7.27.4，而在这样的环境中胃蛋白酶会变性失活，因此在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，不可用胃蛋白酶处理，而用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，A项错误；向培养液中加入适量的抗生素，可以防止细胞培养过程中细菌的污染，B项正确；动物细胞培养所需气体主要是O2(细胞代谢必需的)和CO2(维持培养液的pH)，C项正确；肝肿瘤细胞代谢和繁殖速度较快，故数量相等的甲、乙细胞分别置于相同且适宜的条件下培养，一段时间后，会观察到甲细胞
14、的数量比乙细胞的多，D项正确。13下图是克隆羊的培育流程图，根据所学知识回答下列问题。(1)培育克隆羊时用到的卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到_。(2)从供体羊中取上皮细胞，用_处理，然后进行分散培养。培养过程一般在_中进行，整个过程必须保证细胞处于_的环境中，所需营养物质要与体内基本相同。(3)通过_法吸出卵母细胞中的细胞核，微型吸管除了将细胞核吸出外，往往还会将_一并吸出。(4)去核的卵母细胞与供体细胞通过电激后融合，_进入受体卵母细胞，构建成重组细胞，融合后的重组细胞，需要用物理或化学的方法进行激活，使其完成_过程。答案(1)减数第二次分裂中期(2)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)CO2
15、培养箱无菌、无毒(3)显微操作第一极体(4)供体核细胞分裂和发育解析(1)核移植时，卵母细胞需在体外培养到减数第二次分裂中期。(2)动物细胞培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织使其分散成单个细胞；动物细胞培养过程必须保证细胞处于无菌、无毒的环境中，且一般在CO2培养箱中进行培养。(3)核移植过程中，通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核，由于减数第二次分裂中期卵母细胞核的位置靠近第一极体，所以用微型吸管可一并吸出细胞核与第一极体。(4)去核的卵母细胞与供体细胞通过电激后融合，供体核进入受体卵母细胞，构建成重组细胞，融合后的重组细胞，需要用物理或化学的方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育过程。
16、14某研究小组进行药物实验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是_。(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物实验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_处理。(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培
17、养液中加入适量的_。(5)已知癌细胞的X基因表达过量与肝肿瘤的发生密切相关。要实验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水。经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_或_合成水平的差异，确定药物Y的药效。答案(1)多(2)血清中含有适合动物细胞生长增殖的多种物质(3)产生接触抑制多胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)(4)抗生素(5)药物YmRNA蛋白质解析(1)肿瘤细胞具有无限增殖能力，细胞周期短，相同培养时间内，甲细胞的数量多于乙细胞。(2)动物血清中含有能促进细胞生长和增殖的多种物质，是天
18、然的培养基。(3)动物细胞培养时为了获得细胞悬液，需用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理组织块，使组织块中的细胞分散成单个细胞。(4)动物细胞培养时需要创造无菌的环境，因此为了防止病菌污染，可在培养基中添加适量的抗生素。(5)设计对照实验需要遵循单一变量原则，因此A组需要加入药物Y，可通过检测基因是否完成转录和翻译来确定Y的药效。152017年11月27日，世界上首例体细胞克隆猴“中中”诞生；12月5日，第二例克隆猴“华华”诞生。我国科学家攻克了与人类相近的灵长类动物猕猴的体细胞克隆的难题。获得克隆猴的流程如图所示，据图回答问题：(1)“中中”和“华华”的性状与_(填“核供体”“卵母细胞供体”或“代
19、孕”)动物的性状基本无关。(2)图示过程运用了_(填“胚胎细胞核移植”或“体细胞核移植”)技术，该技术难度_，原因是_。(3)欲获得单个雌猕猴体细胞，可用_酶处理动物组织块。过程表示去除卵母细胞的细胞核，该过程一般要将卵母细胞培养至_期再进行，目前常用的去核方法是_。将卵母细胞作为受体细胞的原因是_(答出两点即可)。(4)与克隆羊多利培养成功一样，“中中”和“华华”克隆猕猴的成功证明了_。答案(1)代孕(2)体细胞核移植更高胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易；动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难(3)胰蛋白酶(或胶原蛋白)减数第二次分裂中显微操作去核法此类细胞体积大，易于操作；可为
20、重组细胞早期发育提供较充足的营养；卵母细胞的细胞质中存在激发动物体细胞的细胞核全能性表达的物质(4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性解析(1)代孕动物只是为通过核移植技术得到的胚胎的发育提供营养物质和发育场所，因此克隆猴的性状与代孕动物的性状基本无关。(2)由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此哺乳动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植。(3)欲获得单个雌猕猴体细胞，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织块。过程表示去除卵母细胞的细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至减数第二次分裂中期再进行，目前常用的去核方法是显微操作去核法。核移植时选择卵母细胞作为受体细胞的原因有：此类细胞体积大，易于操作；可为重组细胞早期发育提供较充足的营养；卵母细胞的细胞质中存在激发动物体细胞的细胞核全能性表达的物质。(4)克隆羊多利与克隆猴“中中”“华华”的诞生证明了动物已分化体细胞的细胞核具有全能性。