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2014-2015学年高二生物课件:第二部分实验六《Α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测》课件9(浙科版选修1).ppt

1、第二部分:酶的应用知识回顾:1、在果汁生产中利用_,可以提高果汁的产量和质量,其原理是_。你还能画出出汁量和温度关系的曲线吗?2、洗衣粉中添加_,可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_四类。1、酶制剂的概念和种类(一)酶制剂含有酶的制品定义:多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶种类:A、液体酶制剂治疗某些胃病的胃蛋白酶液B、固体酶制剂2、酶的生产提取法定义:采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来优点:简单易行,在动植物或微生物资源丰富的地区具有应用价值实例:在屠宰厂,可以从家畜胰脏中提取出胰酶;在水果加工厂,可以从菠萝皮中提取出菠萝蛋白酶缺点:要有充足的原材料,广泛应用受

2、到限制发酵法常用方法定义:通过微生物发酵获得所需要的酶。如果是胞外酶,可以从发酵液中直接提取;如果是细胞内酶,则可将细胞弄碎再经过提取纯化而得到。易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。优点:提取方式:在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂,说明酶制剂使用有很多优点,你能思考后举出一些吗?催化效率高、低能耗、低污染等。酶制剂的使用有缺点吗?3、酶制剂的优点1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活;2、溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;3、反应后会混在产物中,可能影响产品质量。(难分离)4、酶制剂的缺点1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术(如固

3、定在不溶于水的载体上)。2、固定化酶技术的优点:(1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离;(2)固定在载体上的没可以被反复利用。(二)固定化酶固定化酶:就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。固定化的方法:吸附法、交联法、包埋法、共价偶连法等3.固定化酶方法类型类型优点优点不足不足直接使直接使用酶用酶催化效率高,低耗催化效率高,低耗能、低污染等能、低污染等对环境条件非常敏感,容易失对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,本;反应后

4、酶会混在产物中,可能影响产品质量可能影响产品质量固定化固定化酶酶酶既能与反应物接酶既能与反应物接触,又触,又能与产物分能与产物分离离,同时,固定在,同时,固定在载体上的酶还可以载体上的酶还可以被被反复利用反复利用一种酶只能催化一种化学反应,一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应形成都通过一系列的酶促反应才能得到的才能得到的 直接使用酶和固定化酶的优缺点实验原理:本实验是用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上,一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,用淀粉指示剂溶液测试,流出物呈红色表明水解产物糊精生成淀粉-淀粉酶淀

5、粉酶糊精淀粉酶淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶糖化淀粉酶麦芽糖这里使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶,其作用的最适温度为5075;最适PH为5.57.5遇碘显蓝色遇碘显红色遇碘不显色(三)实验设备及用品:5ml塑料注射器50ml烧杯滴管自行车用气门心及夹子注射器架试管及微量离心管3支材料:1.a-淀粉酶的固定化:在烧杯中将5mga-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中.由于酶不纯,可能有些不溶物.再加入5g石英砂,不时搅拌,30min后装入1支下端接有气门心并用夹子封住的注射器中(石英砂体积约4ml).用10倍体积的蒸馏水洗涤此注射器以除去未吸附的游离淀粉酶,流速为1ml/min.2.可溶性淀粉溶液:取50ml可溶性淀粉

6、溶于100ml热水中,搅拌均匀.3.5mmol/L KI-I2溶液:称取0.127g碘和0.83g碘化钾。加蒸馏水100ml完全溶解后装入滴瓶中反应柱固定化酶气门心夹子5ml注射器步骤:1.将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱.在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入12滴KI-I2溶液,观察颜色.用水稀释1倍后再观察颜色.反应柱固定化酶气门心夹子5ml注射器淀粉2.实验后,用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置在4冰箱中,几天后再重复上述实验,看是否有相同的结果.课后练习 1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?2.耐高温

7、的淀粉酶有哪些可能的用途?可在试管中加入1ml可溶性淀粉,再加几滴淀粉酶柱流出液,保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色,则流出液中没有淀粉酶了。可以在高温下使淀粉水解快,而且酶不会因高温上而失活,所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。1、研究认为,用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂,可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药,与用微生物降解相比,其作用不需要适宜的()A、温度B、PHC、水分D、营养D2、目前,日用化工厂大量生产的酶制剂,其中的酶大都来自A、化学合成B、动物体内C、植物体内D、微生物体内D3.酶的固定方法不包括()。A.将酶吸附在固体表面上B将酶相互连接起来C将酶包埋在细微网格里D将酶制成固体酶制剂,如加酶洗衣粉中的酶D5.关于固定化酶的叙述不正确的是()。A既能与反应物接触,又能与反应物分离B固定在载体上的酶可被反复利用C可催化一系列反应D酶的活性和稳定性受到限制C

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