1、课时跟踪检测(四十)微生物的培养与利用一、选择题1能够测定样品活菌数的方法是()A稀释涂布平板法B直接计数法C质量法 D比浊法2下列关于分离纤维素分解菌的实验操作有误的是()A经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B选择培养这一步可省略，但得到的纤维素分解菌会较少C可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量D对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到不含纤维素的培养基上3通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉
2、菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出()大肠杆菌霉菌放线菌固氮细菌ABC D只有4(2015东城区检测)欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是()A将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C可将未接种的培养基在相同条件下作为对照进行培养D用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌5(2015扬州测试)下面是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是()A在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌B划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上C接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的
3、D第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数6平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是()A都可对微生物进行计数B平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面C稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基上进行培养D都会在培养基表面形成单个的菌落7(2015苏州质检)分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()选项尿素琼脂糖葡萄糖硝酸盐ABCD注：“”表示加入，“”表示不加。8(2015广州质检)利用农作物秸秆为原料可生产乙醇，生产过程中可采用微生物将秸秆水解或用酶水解，其主要技术流程如下图所示，下列相关说法错误的是()秸秆秸
4、秆碎屑反应罐水解压滤出渣酒精发酵真空分馏A可用刚果红染色法筛选过程所需的纤维素分解菌B过程加入的是葡萄糖苷酶C酒精发酵接种的酵母菌需在无氧条件下发酵D酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌二、非选择题9.分析回答下列有关微生物的问题：(1)右图是细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。图中在_(填图中编号)区域出现了单个菌落，一个菌落是由_个细菌繁殖形成的。据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是_(用编号表示)。(2)下表是某微生物培养基成分，据表回答下列问题：编号成分含量编号成分含量粉状硫10 g(NH4)2SO40.4 gK2HPO44 gMgSO49.25 gFeSO40.5 gC
5、aCl20.5 gH2O100 mL上述培养基所培养微生物的同化作用类型是_，判断依据是_。若要培养从土壤中分离出来的自生固氮菌，该培养基成分应如何调整？_，依据是_。若上述培养基用于观察菌落形态，应增加的成分是_。(3)在碳源、氮源、无机盐和水充足的条件下，某些微生物仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加_。下列选项中属于该类物质的有(不定项选择)()A某些维生素B某些氨基酸C酶 D激素10(2015陕西五校一模)下面的甲图表示酵母菌、硝化细菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况，乙图表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系，请据图回答：(1)乙图中a、b、c三条曲线依次表示甲图_号试管中微
6、生物在不同氧气浓度中的增殖速度。(2)研究发现，青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。如果培养基中混杂了这三类微生物，请设计实验，利用改变培养基成分等培养条件，将酵母菌和硝化细菌分离出来。主要步骤：a分别配制不含_的培养基(A)和加入_的培养基(B)，分别灭菌。b分别接种混合液放在适宜条件下培养。c观察结果。结果：在A培养基上生存的是_，在B培养基上生存的是_。(3)微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是_。11(2015临沂模拟)高温淀粉酶在大规模工业生产中是极为重要的酶制剂。研究者从热泉中筛选出了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，筛选过程如下图所示。(1)进行过程所用的接种
7、方法是_。微生物筛选培养过程，为了防止杂菌污染，需要对培养基和培养器皿进行_处理，整个过程中需要进行_操作。(2)培养基一般要含有细菌生存所需的水、无机盐、碳源和_。(3)部分嗜热菌在号培养基上生长时可释放_分解培养基中的淀粉，在不同菌落周围形成大小不同的透明圈，应挑出_的菌落，接种到号培养基上。(4)分离细胞时通常用固体培养基，原因是_。(5)培养微生物实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢掉，以防止培养物的扩散。12(2014四川高考)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲
8、、乙所示。(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_。(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和_，这些植物激素一般需要事先单独配制成_保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_。(4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_，该实验设计是否合理？为什么？_。答 案1选A直接计数法是利用特定的计数
9、板，在显微镜下计算一定容积量样品中微生物的数量，不能区分死菌与活菌；质量法是用于微生物生长测定的一种方法，有湿重法和干重法，也可以通过测蛋白质和DNA含量反映细胞的物质质量；比浊法是在一定范围内，悬液中细胞浓度与浑浊度成正比，即与光密度成正比，菌越多，光密度越大；活菌在适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落，此法又称活菌计数法，可采用稀释涂布平板法接种。2选A经选择培养后，需经稀释后才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。3选A缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成，而霉菌属于真核生物，故能生长；在培养基中
10、加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，对放线菌的生长无影响。4选D为了获得单个菌落，应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释；为了使实验效果更好，同一浓度的土壤稀释液至少要涂布3个平板进行重复实验；加入刚果红的培养基可用来筛选纤维素分解菌，筛选分解尿素的细菌一般需在培养基中加入酚红指示剂。5选C在每次划线前后都要对接种环进行灭菌；进行划线操作时，左手将培养皿的皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖；注意接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的；第1区和第5区的划线不能相连。6选D平板划线法不能对微生物进行计数，只能用于分离纯化微生物，计数微生
11、物常采用稀释涂布平板法；平板划线法不需要进行梯度稀释；稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个的菌落。7选C分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有碳源，且以尿素作为唯一的氮源，不能添加硝酸盐。8选B筛选纤维素分解菌可采用刚果红染色法；纤维素酶为复合酶，至少包含三种组分，C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶；酒精发酵需在无氧条件下进行；酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌。9解析：(1)根据菌落生成情况可知划线顺序是。(2)由于培养基中没有碳源，可推测微生物的同化作用类型是自养型。固氮菌是异养型生物，需要加入有机碳源。观察菌落形态要在固
12、体培养基上观察，故需要加入琼脂。(3)培养微生物需要碳源、氮源、水、无机盐和生长因子，生长因子是微生物生长不可缺少的微量有机物，如维生素、氨基酸、碱基等。答案：(1)1(2)自养型培养基中没有机碳源去除培养基的成分，加入有机碳源自生固氮菌能利用空气中的氮气作为氮源，但由于自生固氮菌是异养型微生物，培养基中还需要加入有机碳源琼脂(3)生长因子AB10解析：从甲图试管中微生物的分布和数量分析，乳酸菌分布在缺氧的下层，酵母菌在缺氧的底部和氧含量高的上层均匀分布，而硝化细菌主要分布在上层，因此可以判断出a、b、c曲线表示3、2、1号试管中的微生物增殖速度。青霉素破坏细菌的细胞壁，而酵母菌属于真菌，青霉
13、素不能起到杀灭的作用，硝化细菌属于自养生物，不需要添加葡萄糖作为能源物质和碳源。答案：(1)3、2、1(2)有机碳源青霉素硝化细菌酵母菌(3)防止杂菌污染(无菌技术)11解析：微生物培养前需对器皿和培养基等进行灭菌处理，整个接种过程中需要进行无菌操作；培养基的成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源；本题是要选择能产生耐高温淀粉酶的嗜热菌，所以能产生淀粉酶的细菌会分解培养基中的淀粉，依此可挑选出的相应的菌落。答案：(1)稀释涂布平板法灭菌无菌(2)氮源(3)淀粉酶透明圈大(4)固体培养基容易形成固定的菌落，便于进行筛选(5)灭菌12解析：(1)微生物生长繁殖需要的主要营养物质包括碳源、氮源、水和无机
14、盐四类。根据题意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，该实验的目的是探索其降解机制，因此，需要分离出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，故选择培养时为了排除其他碳源的干扰，培养基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)与微生物培养基相比，植物细胞培养的培养基需要添加生长素和细胞分裂素，用于调节植物细胞再分化；这些植物激素一般需要事先单独配制成母液保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是无菌接种环。划线的平板培养后，发现第一划线区域的划线上不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，而其他划线上有菌落。造成此现象的原因可能有两个：一是接种环灼烧后未冷却，菌种接触到高温的接种环而死亡；二是划第二划线区域第一条线时未从第一区域末端开始。(4)根据图乙所示实验中的上清液加入蛋白酶溶液推测，实验目的是探究目的菌株是否能分泌降解苯磺隆的蛋白质，实验设计不合理之处是缺少不加蛋白酶溶液、其他条件同图乙的空白对照。答案：(1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖(2)细胞分裂素母液(3)接种环接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理，缺少空白对照