1、课后限时集训(十六)(建议用时：40分钟)一、选择题1(2020通化县综合高级中学高二期中)下列关于泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定实验的叙述，正确的是()A将新鲜蔬菜与煮沸冷却的盐水(盐和清水的质量比为41)混匀装瓶B发酵过程中始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水C在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料D随着发酵进行，亚硝酸盐含量逐渐增加，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定BA、泡菜制作中应先加蔬菜，再加盐水，且盐与水比例为14；A错误；B、由于乳酸菌是严格厌氧的，因此发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水；B正确；C、在盐酸酸化
2、条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；C错误；D、随着发酵进行，亚硝酸盐含量先逐渐增加，后又逐渐降低，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定；D错误。2(2020山东高三一模)下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是()A利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵B家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵C果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反D毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶参与腐乳发酵B乳酸菌是一种严格的厌氧菌，有氧气存在时，其发酵过程会受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶的过程中，应一直处于密闭状态，否则会导致
3、发酵失败，A错误；家庭制作果酒、果醋与腐乳过程中所用的菌种均来源于自然环境，有多种微生物参与发酵过程，因此均不是纯种发酵，B正确；果醋制作过程中产生醋酸，发酵液 pH 逐渐降低，果酒制作过程中产生CO2，CO2溶于水呈酸性，pH也是下降，情况相同；果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳与酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，随着二氧化碳浓度的增加，溶液的pH逐渐降低，因此果酒、果醋制作过程中溶液的pH都是逐渐降低，C错误；毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶参与腐乳发酵，D错误。3下列与食品生产、储存和使用等有关的说法，正确的是()A杂菌不耐酸是泡菜不易腐败的原因之一B食品包装上的胀袋勿食是指微生物进行
4、乳酸发酵产气C新冠病毒会在熟食中大量繁殖，因此要进行核酸检测D食用含有抗性基因的水果玉米可以增强人体抗性能力A泡菜发酵过程中pH会逐渐降低，抑制杂菌生长，A正确；微生物进行乳酸发酵时不会产气，B错误；新冠病毒寄生在活细胞中，C错误；水果玉米的抗性基因只对该玉米有效，且其表达产物进入人体后会被消化，D错误。故选A。4(2020北京高三一模)“闻着臭，吃着香”的油炸臭豆腐是我国一种风味小吃。制作时需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽孢杆菌、毛霉等微生物的卤汁中发酵。下列相关表述正确的是()A卤汁中的细菌和真菌不存在竞争关系B乳酸菌发酵产生了乳酸和CO2C发酵产物使臭豆腐具有特殊的味道D臭豆腐发酵后密封处理
5、利于毛霉的繁殖C卤汁中的细菌和真菌会竞争营养物质和生存空间，A错误；乳酸菌发酵的产物只有乳酸，没有二氧化碳，B错误；发酵产物中的小分子肽和氨基酸等产物使腐乳具有特殊的味道，C正确；毛霉是需氧型微生物，发酵后密封不利于毛霉的繁殖，D错误。故选C。5(2020江苏高三一模)在微生物培养的过程中，需要通过选择培养或鉴别培养的方法来筛选出目标菌种。下列与之相关的叙述中不正确的是()A纤维素分解菌能够分解刚果红染料，从而使菌落周围出现透明圈B尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而使酚红指示剂变红C在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株D在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”A纤
6、维素分解菌能够分解纤维素，在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，A错误；尿素分解菌能够将尿素分解为氨，使培养基呈碱性，从而使酚红指示剂变红，B正确；在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株，C正确；在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”，D正确。6(2020上海高三一模)在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基，在培养皿中培养36小时后计算细菌的克隆数(表)。下列培养皿的结果中，能说明大肠杆菌生长需要碳源的是()在不同条件下大肠杆菌的生长量培养皿培养基培养皿
7、上的细菌克隆数琼脂、糖类35琼脂、糖类和维生素250琼脂和维生素0A.培养皿和B培养皿和C培养皿和 D培养皿C培养皿和这两个组别的自变量并不唯一，培养皿中添加了糖类，没有维生素，但培养皿没有糖类但是有维生素，两组实验数据上的差别不能判断是由谁导致的，A错误；培养皿和相互对比，自变量为维生素的有无，可以证明维生素有利于大肠杆菌的生长，B错误；培养皿和相互对比，自变量为糖类的有无，通过观察实验结果可知，没有糖类大肠杆菌无法生存，所以可证明大肠杆菌的生长需要碳源，C正确；单一的培养皿上没有长出菌落，不能判断到底是何原因导致的，无法证明实验结论，D错误。故选C。7圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可有效将餐
8、厨垃圾中的有机质迅速分解成水和CO2。为制备分解餐厨垃圾的微生物菌剂，实现废物的资源化利用，研究人员采用稀释涂布平板法进行了两菌种的最佳接种量比例的探究实验，结果如下图所示。下列叙述正确的是()A由图可知，制备所需菌剂的最佳两菌种的接种量比例为21B可采用平板划线法替代稀释涂布平板法统计图中的有效菌落数C涂布平板的所有操作都应在酒精灯火焰旁进行，而系列稀释操作不需要D制备好的菌剂可接种到固体斜面培养基上并放入4 的冰箱中临时保藏D根据图示可知，两菌种的最佳接种量比为11时，有效菌落数最大，故处理该类厨余垃圾废液，两菌种的最佳接种量比为11时，效果最佳，A错误；平板划线法不能用于计数，B错误；涂
9、布平板的所有操作和系列稀释操作都应在酒精灯火焰旁进行，以防止杂菌污染，C错误；制备好的菌剂可接种到固体斜面培养基上并放入4 的冰箱中临时保藏，D正确。故选D。8(不定项)苹果营养丰富，苹果酒和苹果醋具有延缓衰老的功效，深受人们的喜欢。下列叙述正确的是()A家庭制作苹果酒和苹果醋，发酵之前应对苹果进行消毒处理B苹果酒生产初期通入空气的目的是使酵母菌数量增加C苹果酒和苹果醋发酵过程需要的温度和菌种均不相同D产品口味与菌种纯度、发酵时间、原料含糖量等都有关系BCD家庭制作苹果酒是利用附着于苹果皮上的酵母菌进行的，所以不需要消毒，只需冲洗即可，A错误；酵母菌是兼性厌氧型微生物，所以在发酵早期通入空气可
10、以使酵母菌进行有氧呼吸产生大量能量，使其数量增加，B正确；根据分析，果酒和果醋发酵的菌种不同，果酒发酵的最适温度在20 左右，而果醋发酵的最适温度在35 ，C正确；产品口味与菌种纯度、发酵时间、原料含糖量等都有关系，D正确。故选BCD。9(不定项)(2020山东高三一模)有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物，广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，不少种类对人、畜的毒性很强。某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物，下列做法正确的是()A在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在添加有机磷农药的培养基上培养以获取相应的微生物B在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先
11、培养一段时间，以检测培养基平板灭菌是否合格C若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计D制备固体培养基时加入的常用凝固剂是琼脂；若培养基需要调节pH，则应在灭菌之后调节ABC筛选菌株：(1)实验室中微生物筛选的原理是人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。(2)选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤。统计菌落数目的方法有(1)活菌计数
12、法：常用稀释涂布平板法；(2)显微镜直接计数法：在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。根据以上筛选微生物的原则可知，为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，在选择培养基上添加有机磷农药进行选择培养，A正确；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，以检测培养基平板灭菌是否合格，B正确；根据以上分析可知，若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目，C正确；制备固体培养基的基本步骤是计算称量溶化分装加棉塞包扎倒平板，因此培养基在灭菌前需要调节pH，D错误。故选ABC。10(不定项)(2020山
13、东高三三模)下图为5个不同浓度的土霉素溶液对大肠杆菌生长影响的实验结果。下列相关叙述正确的是()长有大肠杆菌的培养皿A对培养皿进行灭菌可以采用干热灭菌的方法B所用培养基是固体培养基，通常加入琼脂作为凝固剂C倒平板之后，在接种前要对培养基进行高压蒸汽灭菌D结果显示，对大肠杆菌抑制作用最明显的土霉素浓度是ABD培养皿是玻璃器皿，可以采用干热灭菌的方法灭菌，A正确；配制固体培养基，通常加入琼脂作为凝固剂，B正确；培养基的制作是在灭菌后才倒平板的，C错误；从图中看出，在的周围抑菌圈最大，所以对大肠杆菌抑制作用最明显，D正确。故选ABD。二、非选择题11微生物培养，是指借助人工配制的培养基和人为创造的培
14、养条件，使某些微生物快速生长繁殖的过程。它可以对已纯化的单一菌种进行培养和利用，也可以对混合菌种或自然样品(如土壤)中的微生物进行培养，然后根据培养基上所生长微生物的种类和数量，可在一定程度上估算微生物的多样性与数量。请回答下列问题：(1)将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有_。氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有_。若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入_(填显色剂名称)筛选出能产淀粉酶的微生物
15、。该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是_。(2)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌时，压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是_。为了调查某河流的水质状况，某研究小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_。然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接种入0.1 mL稀释液。经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为_。(3)用平板划线法分离水样中的细菌，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一
16、条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_(答出两条)。若将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，分析其原因是_。解析(1)微生物生长繁殖所必需的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等；氮源进入细胞后，可参与合成含氮化合物，其中的生物大分子有蛋白质和核酸；淀粉与碘液可以发生显色反应，使培养基呈蓝色，产生淀粉酶的微生物能分解周围的淀粉，蓝色消失后会出现以菌落为中心的透明圈。(2)采用高压蒸汽灭菌时，若压力达到设定要求，而温度未达到相应要求，最可能的原因是没有排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷空
17、气；在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，若空白平板上无菌落形成，则说明培养基灭菌合格；平均每个平板上的菌落数为38，稀释了100倍，取样0.1 mL，则每毫升水中的活菌数为381000.138 000个，则每升水中的活菌数为38 0001 0003.8107(个)。(3)接种时常用接种环，平板划线法要求灼烧的接种环冷却后再划线，否则会灼伤菌株甚至死亡；划线时要从上一次划线的末端开始划线，这样接种环上才有菌株。静置培养时，只有表层营养液中的溶解氧较高，大部分细菌不能得到充足的氧气，同时营养物质也不能得到充分地利用，故细菌生长速度较慢；而振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，同
18、时可使菌体与培养液充分接触，提高培养液中营养物质的利用率，故细菌生长速度较快。答案(1)碳源、水和无机盐蛋白质和核酸碘液淀粉遇碘液呈蓝色，产淀粉酶的微生物能分解淀粉，在菌落周围会形成透明圈(2)未将锅内冷空气排尽检测培养基灭菌是否合格3.8107(3)接种环灼烧后没有冷却就开始划线、划线未从第一区域末端开始振荡培养能提高培养液的含氧量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率12植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖。回答下列问题：(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳
19、源、水、_四类，为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：培养基酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂刚果红溶液水甲乙注：“”表示有，“”表示无。(2)据表判断，培养基甲_(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_。(3)据表判断，培养基乙_(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_。(4)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成_色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的_。(5)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划
20、线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落的可能的操作失误有_。解析(1)实验室培养微生物需要配置培养基，培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。(2)分析表格可知，培养基甲的配方中无琼脂，为液体培养基，不能用于分离和鉴别纤维素分解菌，纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基。(3)培养基乙没有纤维素粉，不能形成CR纤维素红色复合物，因此也不能用于分离和鉴别纤维素分解菌。(4)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成红色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈。(5)接种时常用接种
21、环，平板划线法操作时要求将灼热的接种环冷却后再划线，否则会灼伤菌株甚至导致菌株死亡，划线时要从上一次划线的末端开始，这样接种环上才有菌株，因此若第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，而第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，可能的原因有接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始。答案(1)氮源和无机盐(2)不能纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基，纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基(培养基中没有琼脂)(3)不能培养基中没有纤维素粉(4)红透明圈(5)接种环接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始13(2020山东高三三模)民间谚语“玉米带大豆，十年九不漏”的意思是玉米与大豆
22、间作种植，十年中有九年不至于欠收。研究表明，出现这一现象的原因是大豆根部有根瘤菌，根瘤菌与豆科植物的共生体系具有很强的固氮作用，能固定空气中的气态氮为植物所用。某科研小组计划在玉米大豆间作套种地块分离土壤中的根瘤菌，以研究生物固氮的相关问题。(1)科研小组的同学通过查阅资料得知多菌灵和五氯硝基苯都有抑制真菌的作用，且查到部分实验数据如下表：含抑菌剂的培养基对土壤真菌数量的影响(个/克干土)供试土壤培养基基础培养基含多菌灵的培养基含五氯硝基苯的培养基0.1克*0.2克*0.3克*0.1克*0.2克*0.3克*水稻土(无锡)201.500.110.110.254.215.003.68黄棕壤(南京)
23、10.520.140.160.239.3215.688.64红壤(江西)25.380000.050.500注：*表示300毫升基础培养基加入的抑菌剂量分离根瘤菌的过程中，用含_(填“五氯硝基苯”或“多菌灵”)的培养基抑制真菌的效果会更明显；在含五氯硝基苯的300 mL基础培养基中，加入五氯硝基苯的量与抑制真菌效果的关系是_(填“呈正相关”“呈负相关”或“无法判断”)。(2)实验室一般采用_法对培养基进行灭菌。分离纯化根瘤菌时，需要对土壤浸出液进行梯度稀释的原因是_。(3)2019年7月16日，科学家通过基因工程方法，将一种具有固氮作用的蓝细菌A的20多个固氮基因，转移到另一种不能固氮的蓝细菌B
24、中，在人工去除氧气的环境下，让后者获得了固氮能力。科研小组的同学指出：“基因工程的诞生需要生物学理论基础，相关技术的发明使基因工程的实施成为可能。通过基因工程将固氮基因转入单子叶植物，并经过转录和翻译产生固氮酶并不难，难的是固氮酶还要有活性。”催生基因工程的三个最重要的生物学基础理论是_。科学家通过基因工程的方法使大田中的普通玉米合成了上述固氮酶，但该转基因玉米不能像蓝细菌B那样进行生物固氮，根据上述材料分析其原因最可能是_。解析(1)从表格中看出，加入多菌灵比加入五氯硝基苯真菌的数量少，说明多菌灵的抑制真菌的效果更明显；比较加入五氯硝基苯的三种培养基，真菌数量随着五氯硝基苯的浓度增加无明显关
25、系，所以二者关系无法判断。(2)对培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌法；由于土壤浸出液中根瘤菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落，所以需要对浸出液进行梯度稀释。(3)基因工程的三个最重要的生物学基础理论是DNA是遗传物质的证明、DNA双螺旋结构和中心法则的确立、遗传密码的破译。根据题干信息“不能固氮的蓝细菌B在人工去除氧气的环境下，获得了固氮能力”，说明固氮需要在无氧的条件下进行，所以玉米不能固氮的原因：固氮酶对氧气敏感，需要在无氧条件下才有活性，大田中的玉米不具有无氧环境，固氮酶的作用被抑制。答案(1)多菌灵无法判断(2)高压蒸汽灭菌土壤浸出液中根瘤菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落(3)DNA是遗传物质的证明、DNA双螺旋结构和中心法则的确立、遗传密码的破译固氮酶对氧气敏感，需要在无氧条件下才有活性，大田中的玉米不具有无氧环境，固氮酶的作用被抑制