1、绝密启用前仙桃、天门、潜江2019-2020 学年度第二学期期末考试高二生物试题注意事项：1.本试卷共8页，三个大题，满分100分，考试时间 90分钟。2.本试卷上不要答题，请按答题纸上的要求直接把答案填写在答题纸上。答在试卷上的答案无效。一、单项选择题：本题共14小题，每小题2分，共28分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的。1.下图是基因工程主要技术环节中的一个基本步骤，这一步骤需用到的工具是A.限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.DNA聚合酶和限制性核酸内切酶C.DNA连接酶和解旋酶D.DNA聚合酶和RNA聚合酶2.利用PCR技术可获得目的基因，下列相关叙述正确的是A.
2、PCR反应体系中需要添加耐高温的解旋酶B.PCR反应体系中需要添加4种含氮的碱基作为原料C.PCR反应体系中添加的DNA聚合酶的最适温度是92D.PCR反应体系方法扩增目的基因一定要设计出2种引物3.下图为某科研小组采用“基因靶向”技术，先将小鼠的棕褐毛色基因导人黑色纯种小鼠的胚胎干细胞(ES细胞)中，再将改造后的胚胎干细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程。据图分析不正确的是A.该过程使用的工具酶是DNA连接酶、限制性核酸内切酶B.完成第步操作，得到由两个DNA片段连接成的产物，必定是载体与棕褐毛色基因形成的重组DNA分子C.第步操作完成后，还需筛选出目的基因已成功导入的胚胎干细胞，并将该胚胎干
3、细胞注射到囊胚中D.改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，其根本原因是细胞核中含有一整套的遗传物质4.2019年诺贝尔生理学或医学奖授予了在“细胞感知和适应氧气供应”研究中做出贡献的科学家。此项研究以能够表达人类促红细胞生成索的小鼠模型为材料，并借助动物细胞培养技术进行研究。下列相关叙述错误的是A.培养过程中，应定期更换培养液，以便清除细胞代谢产物B.培养过程中，要在培养基中加入-定量的血清，以防止培养过程中的污染C.培养过程中，添加CO2的目的是维持培养液的pHD.用该技术培养的动物细胞可以用于筛选抗癌药物5.下图表示单克隆抗体制备过程的各阶段。请据图分析，下列说法不正确的是A.单克
4、隆抗体制备过程的顺序是：B.融合后的杂交瘤细胞具有在体外大量繁殖、产生特异性抗体的特性C.从图中可以看出，此过程运用的技术手段有动物细胞融合和动物组织培养D.“生物导弹”的成分为单克隆抗体加药物6.中国科学院动物研究所首席科学家、动物克隆与受精生物学学科带头人陈大元，曾主持科研攻关项目一“ 攀登”，进行大熊猫的异种克隆。他们将大熊猫的体细胞核放入兔子的去核卵母细胞之中，并使其成功发育成囊胚，标志着异种核质相容的问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”，接下来至关重要的是选择一种合适的“代孕母体”。下图是该研究的理论流程图。下列说法正确的是A.步骤甲、乙分别是指大熊猫体细胞核移植、胚胎收集
5、B.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞C.重组细胞发育成早期胚胎所需营养主要来源于营养液D.步骤甲和步骤乙中的供体和受体需要同期发情处理7.蓝莓中富含的花青素能有效地改善视力，下图为科学家利用植物组织培养大量培养蓝莓的具体流程图解。下 列相关叙述正确的是A.以蓝莓的花药作为外植体培养的幼苗可直接用于生产栽培B.培养基中加入蔗糖的主要目的是提供能量和维持渗透压C.上述过程中使用的培养基的主要成分是生长素和赤霉素D.形成愈伤组织过程中细胞的分化程度升高、全能性降低，长出丛芽生根过程为再分化8.牛的雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，
6、以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是A.H-Y单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌B.若做DNA分析鉴定性别应选用桑椹胚时期滋养层细胞C.用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体D.鉴定后的雄性胚胎可直接做胚胎移植9.哺乳动物如牛羊等是人类生活中重要的肉制品和皮毛制品的原料来源，但哺乳动物妊娠时间长，每胎产子数量少，繁殖速度比较慢。为了加快优良种畜的繁殖速度，目前采用的方法中最好的是A.胚胎移植 B.动物细胞融合 C.动物细胞培养 D.核移植10.在制作果酒的过程中，检测发现发酵液的pH一直下降，原因是A.乳酸菌无氧呼吸产生的乳酸呈酸性B.酵母菌无氧呼吸产生的酒精呈酸性C.酵母菌无氧呼吸产生
7、的乳酸呈酸性D.酵母菌有氧和无氧呼吸均产生CO2，CO2溶于发酵液中使pH下降11.下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，下列叙述错误的是A.能产生脲酶的细菌可以分解利用尿素B.图中逐级稀释的程度会直接影响细菌培养基上的菌落数量C.培养基中可添加KH2PO4、Na2HPO4以提供无机盐和作为缓冲剂D.培养基应以尿素为唯一氮源，培养基的作用是纯化培养产脲酶细菌12.由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”，下列对此描述不正确的是A.“瞄准装置”由识别癌细胞的单克隆抗体构成B.“弹头”由放射性同位素、化学药物或细胞毒素等物质构成C.“弹头”中的药物有选择性
8、杀伤癌细胞的功能D.“生物导弹”是利用细胞工程技术制造出来的13.测定土壤中细菌的数量一般选104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍的稀释液，其原因是A.细菌个体小，真菌个体大 B.细菌易稀释，真菌不易稀释C.细菌在土壤中的含量比真菌高 D.随机的，没有原因14. 统计细菌数目的方法有涂布平板法 直接计数法 滤膜法A. B. C. D.二、不定项选择题：本题共6小题，每小题3分，共18分。每小题给出的四个选项中，有的只有一个选项正确，有的有多个选项正确，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。15.下图表示应用基因工程技术生产
9、干扰素的三条途径，下列相关叙述错误的是A.途径甲中，过程应将干扰素基因和乳腺蛋白基因的启动子重组B.途径乙中，过程一般采用农杆菌转化法C.途径丙中，过程可用Ca2+处理大肠杆菌，以制备感受态细胞D.在三条途径中，过程依据的生物学原理相同16.下图是“白菜-甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是A.培育出的“白菜-甘蓝”植株能产籽B.愈伤组织的代谢是自养需氧型C.上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化过程D.“白菜-甘蓝”杂种植株具有两个亲本的所有性状17.梅花鹿属于单胎动物，季节性发情，育种工作者希望通过胚胎工程技术对优良品种进行扩大繁殖。下列有关叙述错误的是A.胚胎移植可以充分发挥雌性优良个
10、体的繁殖潜力B.培养早期胚胎的培养液中含有维生素、激素等多种能源物质C.当受体数量有限时，可采用胚胎分割技术获得更多的后代D.梅花鹿的胚胎形成后一直处于游离状态，为胚胎收集提供可能18.野生黑芥(2n=16)具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜(2n=18)易患黑腐病而减产，研究者用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体使其染色体片段化，再诱导完整的花椰菜原生质体与紫外线处理的黑芥原生质体融合，流程如下图。下列相关叙述正确的是A.过程需用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体B.过程均需在无菌无毒的环境中操作C.从过程到过程需要更换新的培养基D.体细胞中含有34条染色体的即为所需的杂种植株19.养殖池中存在的有
11、毒物质主要是氨和亚硝酸，这两种物质可被硝化细菌吸收利用。下列关于“养殖池底泥中硝化细菌的分离与计数”实验的叙述中，错误的是A.需要配制添加一定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌B.应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行C.可以采用平板划线法进行接种，还需与未接种的空白培养基同时培养D.应将接种后的培养皿放在光照培养箱中培养，原因是硝化细菌为自养微生物20.下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。请据图分析，下列说法不正确的是A.号试管的稀释倍数为103倍B.号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能恰为号试管的10倍C.号试管的
12、结果表明每克土壤中的菌株数为1.7109个D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目多三、非选择题：本题共5小题，共54分。21.(12分)WWP2基因在肿瘤细胞中高度表达，WWP2蛋白参与肿瘤细胞的生长、存活和转移等。为获得较多WWP2蛋白，利用基因工程技术设计引物，其中正向引物5端含有EcoR酶切位点，反向引物5端含有Xho酶切位点。将WWP2基因与相应载体构建重组质粒导入人胚肾细胞。请回答下列问题：(1)利用上述引物，以肺癌细胞的cDNA为模板，通过 扩增 的编码序列，获得需要的目的基因片段。(2)把获得的目的基因片段和相应的载体都用 进行酶切，分别在5端与3端形成 ，避免自身环化
13、。然后利用 将目的基因片段和相应载体连接，得到重组质粒。(3)先将重组质粒导入经 处理过的大肠杆菌细胞，培养后从中分离得到较多的重组质粒。(4)培养人胚肾细胞时，先用 使人胚肾细胞分散成单个细胞，用含有 的合成培养液培养，并将培养瓶置于体积分数为5%的 与95%的空气混合的气体环境培养箱中培养。(5)将重组质粒导入人胚肾细胞中，48小时后提取蛋白质并检测到WWP2蛋白，说明 。(6)致癌因子会损伤肺泡细胞中的 ，使原癌基因和抑癌基因发生突变。研究WWP2蛋白的表达，为肺癌治疗新靶点奠定了基础。22.(11分)现代生物工程技术推动了农牧业、医药学、免疫学和生态学的发展。依据现代生物技术的相关知识
14、和原理，回答下列问题：(1)我国科学家成功地把人的干扰素基因“嫁接”到了烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的能力。将含有干扰素基因的基因表达载体导入烟草细胞中，常用的方法是 。将干扰素基因导入烟草细胞后，要检测烟草细胞的 ，这是干扰素基因能否在烟草细胞中稳定遗传的关键。(2)动物体细胞核移植过程中，利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞去核处理一般选择在 (时期)进行。在制备单克隆抗体过程中，经特定的选择性培养基筛选后的杂交瘤细胞，还需进行 ，经多次筛选，获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体与传统方法获得的抗体相比，具有的特点是 ，广泛应用于疾病诊断。(3)体外
15、受精、早期胚胎培养是胚胎工程的重要环节，要获得足够的受精卵，可对供体母牛注射 ，使其超数排卵，随后与 进行体外受精。(4)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚的内细胞团或胎儿的原始性腺中分离得到的一类细胞。将胚胎干细胞置于饲养层上进行培养，其目的是 。23.(11分)夏日炎炎，空调是人们日常生活不可或缺的家电之一。舒爽的凉风里可能藏着引发“空调病”的危险分子嗜肺军团菌，该病菌被免疫细胞吞噬后不被分解而让自己不断扩增壮大，最终导致重症肺炎。请回答下列问题：(1)嗜肺军团菌培养基中的营养成分包括 和特殊营养物质五大类，配制好的培养基通常采用 法进行灭菌。(2)为了避免培养基在培养过程中被污染，一般需将
16、含有培养基的培养皿 。为了排除培养基被污染，需设置接种等量 的培养基作为空白对照。(3)筛选获得的嗜肺军团菌株经鉴定后，将菌株进行液体扩大培养用于药物研究，培养时需要振荡，其主要目的是 。为了测定培养液中的菌体数量， 一般采用 法将一定量的菌液接种到固体培养基上，该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，一般选择菌落数在 的平板进行计数，该方法使用时需对菌种进行梯度稀释，原因是 。24.(12分)1965年Mintz首次得到了存活至成年的正常嵌合小鼠，1970年以来相继获得了小鼠、大鼠、兔的嵌合体，其中比较典型的是“山羊-绵羊”嵌合体(流程如下图所示)，请据图回答问题：(1)正常情况
17、下，二倍体动物是单精受精，阻止多精人卵的机制是 。(2)若通过体外受精制备山羊(绵羊)早期胚胎，则采集的精子常采用 法进行获能处理，卵子应培育到 (时期)才能进行受精。(3)ES细胞除可取自早期胚胎外还可取自 ；据图可知将山羊的ES细胞注射进绵羊囊胚的 处；选择ES细胞是利用其在功能上具有 。(4)“山羊-绵羊”嵌合体胚胎移人受体子宫内能继续发育，其生理学基础是 ，多余胚胎可以 保存。25.(8分)植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。请回答下列问题：(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术的特点是 (请列举两点)。(2)通过组织培养
18、技术可把植物组织细胞培养成胚状体，再通过人工种皮(人工薄膜)包装得到人工种子，如下图所示，这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。人工种皮具备透气性的作用是 。 人工胚乳能够为胚状体生长提供所需 的物质，因此应含有植物激素、 和 等物质。(3)用脱毒苗进行繁殖，可以减少作物感染病毒。为了获得脱毒苗，可以选取植物的 进行组织培养。(4)植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是 (请用流程图表示)。仙桃、天门、潜江2019-2020 学年度第二学期期末考试高二生物试题参考答案及解析一、单项选择题：本题共14小题，每小题2分，共28 分。1
19、.A解析图示表示基因表达载体的构建过程，该过程首先需要用限制性核酸内切酶(限制酶)切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒，其次还需要用DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒。故选A。2.D解析PCR反应体系中不需要加入解旋酶，因为PCR过程中是靠高温使DNA热变性，进而解开双链DNA的，A错误；PCR反应体系中需要添加四种脱氧核苷酸作为原料，B错误；PCR过程一般经历下述三十多次循环：90下使模板DNA变性、解链50下复性(引物与DNA模板链结合)72下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。因此，PCR反应体系中添加的DNA聚合酶的最适温度是72，C错误； PCR 反应体系方法扩增目的基因
20、一定要设计出2种引物，D正确。3.B 解析该过程采用了基因工程技术，而基因工程所需的工具酶有两种，即DNA连接酶和限制酶，A正确；第步操作是基因表达载体的构建，获得载体与棕褐毛色基因形成的重组DNA分子几率很小，还需要筛选，B错误；第步操作，目的基因不一定能成功转移到胚胎干细胞中，因此经过筛选目的基因已成功转移的胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中，C正确；由于胚胎干细胞的细胞核中含有一整套的遗传物质，因此改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，D正确。4.B解析动物细胞培养过程中需要定期更换培养液以便清除代谢产物，A正确；培养过程中，要在培养基中加一定量的抗生素防止培养过程
21、中的污染，B错误；培养过程中，需要一定的气体环境，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH，C正确；用该技术培养的动物细胞可以用于筛选抗癌药物，D正确。5.C解析单克隆抗体制备过程包括获取具有免疫能力的效应B细胞和骨髓瘤细胞、诱导细胞融合和筛选出杂交瘤细胞、克隆化培养和抗体检测并筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞、体外或体内培养杂交瘤细胞、获取大量单克隆抗体。因此按单克隆制备过程的顺序用箭头把代表各图解的字母连接为A正确；在单克隆抗体产生过程中，之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为融合成的杂交瘤细胞具备融合前两种细胞的优点，既能无限繁殖，又能产生特定的抗体，B正确；此过程运用的技术手段有动物细
22、胞培养和细胞融合技术，C错误；“生物导弹”的成分为单克隆抗体加药物，D正确。6.B 解析步骤甲、乙分别是指细胞核移植、胚胎移植，A错误；诱导超数排卵所注射的激素是促性腺激素，只能作用于性腺细胞，B正确；重组细胞发育成早期胚胎所需营养主要来源于受精卵，C错误；步骤甲不需要同期发情处理，D错误。7.B 解析蓝莓的花药作为外植体培养的幼苗属于单倍体，不能直接用于生产栽培，A错误； 培养基中加入蔗糖的主要目的是提供能量和维持渗透压，B正确；上述过程中使用的培养基的主要成分是生长素和细胞分裂素，C错误；形成愈伤组织的过程是脱分化，细胞的分化程度会降低，全能性升高，长出丛芽、生根过程为再分化，D错误。8.
23、C解析单克隆抗体是由杂交瘤细胞分泌产生的，A错误；做性别鉴定时应选择囊胚期的滋养层细胞，B错误；用H-Y抗原免疫母牛，使其体内发生体液免疫，产生相应的浆细胞，获得相应抗体，C正确；由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药，则鉴定后的雌性胚胎可直接进行胚胎移植，雄性胚胎没有意义，D错误。9.A 解析胚胎移植可充分发挥优秀个体的繁殖潜力，缩短繁殖周期，增加一生繁殖的后代数量，A正确；动物细胞融合是将两个或多个动物细胞结合形成一个杂种细胞，B错误；动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产物，C错误；核移植技术能加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育，但胚胎成活率低，而且还存在动物的健康问题，因此应用并不广泛，
24、D错误。10.D 解析参与果酒制作的微生物是酵母菌，在果酒制作过程中，首先要通气让酵母菌进行有氧呼吸(产物是CO2和水)而大量繁殖；再密封让酵母菌进行无氧呼吸(产物是酒精和CO2)。可见，酵母菌进行有氧和无氧呼吸时均产生CO2，CO2溶于发酵液中使pH下降。故选D。11.D 解析酶具有专一性，能产生脲酶的细菌可以分解利用尿素，A正确；稀释度越低，细菌培养基上菌落数越多；稀释度越高，细菌培养基上菌落数越少，所以逐级稀释的程度会直接影响细菌培养基上的菌落数量，B正确；细菌的生长繁殖需要无机盐作为营养物质，培养基中添加KH2P04、Na2HPO4可提供无机盐同时也可以作为缓冲剂，C正确；培养基为选择
25、培养基，以尿素作为唯一氮源，培养基为鉴别培养基，通过加入酚红指示剂，判断菌落周围指示剂是否变红，不是用于纯化培养产脲酶细菌，D错误。12.C解析单克隆抗体可与抗原(癌细胞)发生特异性结合，起到导向作用，A正确；“弹头”由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成，杀伤癌细胞，B正确；“弹头”中的药物不具有选择作用，C错误；单克隆抗体运用了动物细胞工程中的动物细胞融合技术，D正确。13.C解析在土壤中的微生物，大约70%90%是细菌，比真菌多，所以为了确保获得的菌落数在30300之间，测土壤中细菌的数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和10
26、4倍的稀释液。故选C。14.A解答稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞，正确；显微镜直接计数法是利用血球计数板进行微生物的计数，缺点是无法区分死菌和活菌，正确；滤膜法可计数水样中的大肠杆菌，正确。故选A.二、不定项选择题：本题共6小题，每小题3分，共18分。15.D解析为了让干扰素基因只在乳腺细胞中表达，构建基因表达载体时，要将改造后的人干扰素基因与山羊乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起，A正确；将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，B正确；将重组质粒导入大肠杆菌时，需用Ca2+处理
27、大肠杆菌使之成为感受态细胞，C正确；在三条途径中，过程依据的生物学原理不相同，途径甲多为显微注射法，途径乙多为农杆菌转化法，途径丙多为Ca2+转化法，D错误。16.AC解析白菜和甘蓝都是二倍体，它们的体细胞杂交后培育的“白菜-甘蓝”杂种植株中2个染色体组来自白菜，2个染色体组来自甘蓝，因此“白菜-甘蓝”属于异源四倍体，是可育的，能产籽，A正确；愈伤组织是一种高度液泡化的呈无定型状态的薄壁细胞，没有叶绿体，不能进行光合作用产生有机物，因此愈伤组织的代谢类型是异养需氧型，B错误；上述过程包括去壁、原生质体融合、植物组织培养等，其结果是形成“白菜-甘蓝”幼苗，因此整个过程中包含着有丝分裂和细胞分化过
28、程，C正确；“白菜-甘蓝”杂种植株具有两个亲本的部分性状，D错误。故选AC。17.BCD解析胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，A正确；培养液中的维生素和激素不是能源物质，B错误；梅花鹿属于单胎动物，因此当受体数量有限时，不能采用胚胎分割技术以获得更多的后代，C错误；梅花鹿的胚胎形成后，早期处于游离状态，而不是一直处于游离状态，D错误。故选BCD.18.ABC解析细胞壁的成分是纤维素和果胶，所以用纤维素酶和果胶酶溶解细胞壁获得原生质体，A正确；过程均需在无菌无毒的环境中操作，以防止微生物污染，B正确；从过程到过程需要更换培养基，因为两个过程所用到的激素比例是不同的，C正确；黑芥原生质体
29、经紫外线照射后，染色体片段化，数量不能确定。所以最终所选的杂种植株染色体数不一定是34条，D错误。故选ABC。19.ACD解析要分离硝化细菌，应该用以氨盐为唯一氮源的培养基，培养基中不能加入牛肉膏蛋白胨，A错误；获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌污染，因此，应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在火焰旁进行，B正确；对微生物进行计数时应该采用的接种方法是稀释涂布平板法，C错误；硝化细菌能进行化能合成作用，无法利用光能，故不用在光照培养箱中培养，D错误。故选ACD。20.AD解析号试管中样品液的稀释倍数为104倍，A错误；号试管的稀释倍数比号试管低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平
30、均数可能恰为5号的10倍，B正确；号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+175+167)30.1106=1.7109(个)，C正确；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目少，D错误。故选AD。三、非选择题：本题共5小题，共54分。21.(12分) (1)PCR技术(1分) WWP2基因(1分)(2)EcoR 酶和Xho酶(1分) 不同的黏性末端(1分) DNA连接酶(1分)(3)Ca2+(1分)(4)胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理(1分) 动物血清 (或血浆)(1分) CO2(1分)(5)(重组质粒中
31、的)目的基因(或WWP2基因)在人胚肾细胞中能够正常表达(2分)(6)DNA分子(1分)解析 (1)获取目的基因可以采用PCR技术扩增，PCR扩增过程中需要引物与模板结合，因此以肺癌细胞的cDNA为模板与题干中的引物结合，然后扩增WWP2基因，获得需要的目的基因片段。(2)根据题意，目的基因的两端分别有EcoR酶切位点和Xho酶切位点，故同时用EcoR酶和Xho酶对目的基因片段和相应的载体进行酶切，分别在5端与3端形成不同的黏性末端，可以避免自身环化。然后利用DNA连接酶将目的基因片段和相应载体连接，得到重组质粒。(3)大肠杆菌细胞需要用一定浓度的Ca2+溶液处理，使之处于感受态易于吸收重组质
32、粒，重组质粒导入大肠杆菌后经过培养增殖，以便获得较多的重组质粒。(4)进行人胚肾细胞培养时，先用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶进行处理，使之分散成单个细胞，动物细胞培养过程中一般需要在合成培养基中添加动物血清或血浆，培养过程中需要在5%的CO2和95%的空气混合的气体环境中培养，CO2的作用是维持培养液的pH。(5)将重组质粒导入人胚肾细胞中，48小时后提取蛋白质并检测到WWP2蛋白，说明目的基因在人胚肾细胞中得到表达，合成了相应的蛋白质。(6)细胞癌变的原因是由于致癌因子的作用，使得细胞内的DNA分子损伤，导致原癌基因和抑癌基因发生突变。22. (11 分) (1)农杆菌转化法(1分) 染色体DNA
33、上是否插入了干扰素基因(2分)(2)减数第二次分裂的中期(1分) 克隆化培养和抗体检测(2分)特异性强、灵敏度高，并可大量制备(2分)(3)促性腺激素(1分) 获能的精子(1分) (4)维持细胞不分化状态(1分)解析 (1)将含有干扰素基因的基因表达载体导入烟草细胞中，常用的方法是农杆菌转化法。将干扰素基因导入烟草细胞后，要检测烟草细胞的染色体DNA上是否插入了干扰素基因，这是干扰素基因能否在烟草细胞中稳定遗传的关键。(2)动物体细胞核移植过程中，利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞去核处理一般选择在减数第二次分裂的中期进行。在制备单克隆抗体过程中，经特定的选择性培养基筛选后的杂
34、交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体与传统方法获得的抗体相比，具有特异性强、灵敏度高，并可大量制备的特点，广泛应用于疾病诊断。(3)胚胎工程的体外受精过程中要获得足够的受精卵，可对供体母牛注射促性腺激素，随后与获能的精子进行体外受精。(4) 将胚胎干细胞置于饲养层上进行培养，其目的是维持细胞不分化状态。23.(11分)(1)碳源、氮源、水、无机盐(2分) 高压蒸汽灭菌(1分)(2)倒置(1分) 无菌水(1分)(3)增大培养液中的溶氧量、使菌株与培养基中的营养物质充分接触(2分) 稀释涂布平板(1分)30300 (1分) 当样品
35、的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌(2 分)解析 (1)普通培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养成分。所以嗜肺军团菌的培养基的营养成分包括水、碳源、氮源、无机盐和特殊营养物质等营养成分。培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(2)为了避免培养皿中培养基被皿盖或皿壁滴落的水污染，常常需将倒平板后凝固的培养皿倒置放置。为了排除培养基灭菌不彻底或者接种操作不规范等原因而造成的污染，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。(3)振荡培养的目的是向培养液供氧，同时使微生物与培养液充分接触，有利于微生物的繁殖与生长。接种培养基的常用方法有稀释涂布平板法和平板划
36、线法，但是如果还需要对培养液中的菌体进行计数，则只能采用稀释涂布平板法进行接种培养。一般选择菌落数在30300的平板进行计数，因为菌落数太少，会增加实验偶然性，而菌落数太多，出现多个细胞连在-起但只观察到一个菌落的情况增多，使得计数偏小。所以使用时需对菌种进行梯度稀释，使培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。24.(12分) (1)透明带反应和卵细胞膜反应(2 分)(2)化学诱导法(1分) 减数第二次分裂中期(2分)(3)原始性腺细胞(1分) 内细胞团(1分) 发育的全能性 (1分)(4)受体子宫对外来胚胎不产生免疫排斥，而且供体胚胎和受体子宫建立正常的生理和组织联系(3分)在
37、-196液氮中(1分)解析 (1)精卵结合时，透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精入卵的两道屏障。(2)山羊的精子常采用化学诱导法进行获能处理。取自卵巢的卵子需要培养到减数第二次分裂中期，才具备受精的能力。(3)ES细胞可以取自早期胚胎的内细胞团，也可以来自原始性腺细胞。据图可知，ES细胞注入囊胚的内细胞团处，一起发育成嵌合胚胎。功能上利用了ES细胞发育的全能性，能发育成成年动物体内任何一种组织细胞。(4) 移植的胚胎要在受体子宫正常发育，生理学基础是受体子宫对外来胚胎不产生免疫排斥，而且供体胚胎和受体子宫建立正常的生理和组织联系。25.(8分)(1)能保持植物原有的遗传特性，繁殖速度快(2分)
38、(2)有利于胚状体进行呼吸作用(1分) 矿质元素(1分) 糖(1分)(3)尖(1分) 培养 诱导分化(4)(2分)解析 (1) 植物微型繁殖是指用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术的特点有保持优良品种的遗传特性、高效快速地实现种苗的大量繁殖。(2)人工种子的胚状体在进行细胞呼吸时，需要从外界环境吸收O2，并将产生的CO2释放到外界环境中，因此人工种皮具备透气性的作用是有利于胚状体进行呼吸作用，以保持胚状体的活力。人工胚乳的作用是为胚状体的发育提供营养，因此应含有植物激素、矿质元素、糖等物质。(3)植物分生区附近(如茎尖)的病毒极少，甚至无病毒，因此为了获得脱毒苗，可以选取植物的茎尖进行组织培养。(4)将含有目的基因的植物细胞培养为一个完整的转基因诱导分化植物，需借助植物组织培养技术才能实现，其基本程序是：
