1、专题一 基因工程基因工程小考（1） 1、 基因工程是在 水平上进行操作的；基因工程的原理是 。2、 基因工程的优点： 。3、 限制酶主要是从 中分离纯化出来的。功能是：它们能够识别双链DNA分子的某种特定的 ，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。可切割产生 和 两种形式的末端。4、 DNA连接酶分为 和 。作用实质：恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的 。能连接两种末端的DNA连接酶是 。5、 常用的载体为 ，其化学本质是 状的 。除此以外还有还有 和 也可以作为基因工程的载体。6、 载体必须具备的条件：能在受体细胞中保存下来并能 ； 具有1个或多个 ，以便与外源基因连接。 具有
2、。7、 依次写出基因工程的四个步骤：（并用标明核心步骤） 8、为什么同一基因在不同生物体内表达的产物相同？ 。9、为什么两种不同生物的DNA能拼接在一起？ 。 10、获取目的基因的常用方法有： 11、基因文库包括 和 。12、构建cDNA文库：用某种发育的某个时期的 在 酶的作用下合成cDNA片段，与 连接后储存在 中。 13、构建基因组文库：将某种生物体内的 提取出来，选用适当的限制酶将其切成一定范围大小的片段14、PCR技术的原理 ，前提是： 。15、PCR技术的过程（写度）： 、 、 。 16、PCR技术的条件： 。基因工程小考2 1、构建基因表达载体的目的： 。2、基因表达载体的组成必
3、须有 。 3、启动子位于目的基因的 ，它具有 识别和结合的部位。4、标记基因的作用： 。5、将目的基因导入植物细胞最常用的方法： 法，适用于 植物。除此以外还有 法（我国独创）和 法（成本高）。6、植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的 化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的 上的 可转移至受体细胞，并整合 上。7、将目的基因导入动物细胞采用最多的方法是 。8、什么是cDNA： 。9、将目的基因导入原核细胞常用的方法是用 处理原核细胞，使其成为 细胞。 10、检测目的基因是否表达的方法： 。 检测目的基因是否插入到受体细胞的方法： 。 检测目的基因是否转录的方法： 。11、DNA分
4、子探针： 。12、一个抗虫基因导入植物细胞后是否赋予了植物抗虫特性，需要做 实验。13、目的基因能否在受体细胞中维持稳定和遗传的关键： 。 14、乳腺生物反应器是将 与 等调控组件重组在一起，通过 方法导入到 （“雌”或“雄”）性哺乳动物的 中，然后送入母体，使其生长发育为转基因动物。15、基因治疗包括 基因治疗和 基因治疗。16、蛋白质工程的基本途径：从 出发 。 17、蛋白质工程指以蛋白质分子结构规律及其与功能关系作为基础，通过 或 ，对 进行改造，或 ，以满足人类生产和生活的需要。 18、基因治疗是？ 。【答案】基因工程小考（1）答案 8、 基因工程是在 分子 水平上进行操作的；基因工程
5、的原理是 基因重组 。9、 基因工程的优点： 克服远缘杂交不亲和的障碍， 目的性强，能定向改变生物的遗传性状 。10、 限制酶主要是从 原核生物 中分离纯化出来的。功能是：它们能够识别双链DNA分子的某种特定的 脱氧核苷酸序列 ，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 断开。可切割产生 黏性末端 和 平末端 两种形式的末端。11、 DNA连接酶分为 Ecoli DNA连接酶 和 T4DNA连接酶 。作用实质：恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 。能连接两种末端的DNA连接酶是 T4DNA连接酶 。12、 常用的载体为 质粒 ，其化学本质是 环 状的 DNA 。除此以
6、外还有还有 动植物病毒 和 噬菌体的衍生物 也可以作为基因工程的载体。13、 载体必须具备的条件：能在受体细胞中保存下来并能 自我复制 ； 具有1个或多个 限制酶切割位点 ，以便与外源基因连接。 具有 标记基因 。14、 依次写出基因工程的四个步骤：（并用标明核心步骤） 目的基因的获取 基因表达载体的构建（核心、关键步骤） 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定。 8、为什么同一基因在不同生物体内表达的产物相同 所有生物共用一套密码子 9、为什么两种不同生物的DNA能拼接在一起？ 都具有相同的结构和化学组成 。 10、获取目的基因的常用方法有： 从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩
7、增目的基因 化学方法人工合成11、基因文库包括 基因组文库 和 部分基因文库 （不能答cDNA文库）。12、构建cDNA文库：用某种发育的某个时期的 mRNA 在 逆转录 酶的作用下合成cDNA片段，与 载体 连接后储存在 受体菌群 中。 13、构建基因组文库：将某种生物体内的 全部DNA 提取出来，选用适当的限制酶将其切成一定范围大小的片段14、PCR技术的原理 DNA双链复制 ，前提是： 有一段已知目的基因的脱氧核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物 。14、PCR技术的过程（写温度）： 变性（9095）、复性（5560）、延伸（7075） 。 15、PCR技术的条件： 目的基因DNA模板
8、引物 4种脱氧核苷酸（dNTP） 热稳定DNA聚合酶（Taq酶） 基因工程小考2 答案 1、构建基因表达载体的目的： 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用 。2、基因表达载体的组成必须有 目的基因 、 启动子 、 终止子 、 标记基因 。 3、启动子位于目的基因的 首端 ，它具有 RNA聚合酶 识别和结合的部位。4、标记基因的作用： 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来 。（或 供重组DNA的鉴定和选择 ） 。5、将目的基因导入植物细胞最常用的方法： 农杆菌转化 法，适用于 双子叶和裸子植物。除此以外还有 花粉管通
9、道 法（我国独创）和 基因枪 法（成本高）。6、 植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的 酚类 化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的 Ti质粒 上的 T-DNA 可转移至受体细胞，并整合 受体细胞染色体DNA 上。7、将目的基因导入动物细胞采用最多的方法是 显微注射法 。8、什么是cDNA： mRNA在逆转录酶的作用下合成的DNA 。9、将目的基因导入原核细胞常用的方法是用 Ga2+ 处理原核细胞，使其成为 感受态（能够吸收周围DNA分子的状态） 细胞。 10、检测目的基因是否表达的方法： 抗原抗体杂交 。 检测目的基因是否插入到受体细胞的方法： DNA分子杂交 。 检测目的基因
10、是否转录的方法： 分子杂交 。11、DNA分子探针： 用放射性同位素等标记含有目的基因的DNA片段 。12、一个抗虫基因导入植物细胞后是否赋予了植物抗虫特性，需要做 抗虫接种 实验。13、目的基因能否在受体细胞中维持稳定和遗传的关键： 目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上 。 14、乳腺生物反应器是将 药用蛋白基因 与 乳腺蛋白基因的启动子 等调控组件重组在一起，通过 显微注射 方法导入到 雌 （“雌”或“雄”）性哺乳动物的 受精卵 中，然后送入母体，使其生长发育为转基因动物。15、基因治疗包括 体外 基因治疗和 体内 基因治疗。16、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发 设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列 找到相应的脱氧核苷酸序列 17、蛋白质工程指以蛋白质分子结构规律及其与功能关系作为基础，通过 基因修饰 或 基因合成 ，对 现有的蛋白质 进行改造，或 合成新的蛋白质 ，以满足人类生产和生活的需要。 18、基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。
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