1、专题限时集训(十五)专题十五生物技术实践(时间：40分钟)1下列有关传统发酵技术应用的叙述，不合理的是 ()A可利用选择培养基筛选出生产所需的优良菌种B制作泡菜所用的微生物属于分解者C果醋的制作过程中醋酸菌只进行无氧呼吸D在腐乳制作过程中必须有能分泌蛋白酶的微生物参与2如图7151是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是() 图7151A操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B划线操作需在火焰上进行C在5区域中才有可能得到所需菌落D在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌3下列关于“转化”的说法不正确的是()AATP水解释放的能量可转化成光能、电能等B
2、细胞内多个基因发生突变，细胞就转化成癌细胞C在含适量DNA酶和S型菌DNA的培养基中，R型菌不能转化为S型菌D目的基因导入受体细胞，并在细胞内维持稳定和表达的过程称为转化4下列有关生物技术的操作过程或应用的叙述，错误的是 ()A测定泡菜中亚硝酸盐含量时需要标准显色液B可用聚乙二醇促进植物细胞原生质体的融合C胚胎分割技术可看作是动物无性繁殖的方法D以尿素作为唯一碳源的培养基用于鉴别细菌5下列叙述正确的是 ()A果酒发酵要定期“放气”，并注意防止外界杂菌污染B果醋制作时先通气发酵后密封发酵C利用DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度大的特点将DNA与杂质分离D电泳技术中分子的迁移速率取
3、决于分子质量的大小6(双选)下列叙述中错误的是()A改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B细胞代谢产物的工厂化生产体现了细胞的全能性C用电泳法可以分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质D试管婴儿、设计试管婴儿技术均为有性生殖7(双选)以下有关生物技术的叙述，错误的是 ()A用凝胶色谱法分离血红蛋白时，大分子蛋白移动速度较慢BPCR扩增反应需要在缓冲溶液中加入DNA模板C提取DNA时，DNA在2 mol/L 的NaCl溶液中易沉淀析出D微生物实验结束后，对使用过的培养基应进行灭菌处理8(双选)下列有关酶和固定化技术的应用的叙述，正确的是()A从酶的固定方式看，物理吸附法比化学结
4、合法对酶活性影响小B棉织物能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤C尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用D加酶洗衣粉中的酶都是固定化酶9PCR需要模板DNA、引物、脱氧核糖核苷酸和DNA聚合酶、ATP等条件，其简要过程如图7152所示。请分析回答下列有关问题：图7152(1)PCR技术能把某一DNA 片段进行扩增，依据的原理是_。PCR与体内DNA复制的不同之处主要表现在环境温度的不同，在PCR中先用95 高温处理的目的是_，而这一过程中在细胞内是通过_实现的。(2)通过分析得出新合成的DNA分子中，AT，CG，这个事实说明DNA分子的合成遵循_。(3)若将1个DNA分子拷贝10次
5、，则需要在缓冲液中至少加入_个引物。(4)DNA子链复制的方向是_，这是由于_。(5)PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的_。10从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是采集菌样富集培养纯种分离性能测定。富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。(1)接种前要对培养基进行_处理。在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在_条件下进行。(2)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分
6、离、纯化。如培养纤维素分解菌的菌样应从_的环境中采集。(3)从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制_培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的_。(4)经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是_，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生_来筛选纤维素分解菌。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_。11图7153表示葡萄酒酿制的简单过程，请据图分析回答：图7153(1)从图可知，图甲是为了使酵母菌进行_，以增加酵母菌的数量，图乙是为了使酵母菌_获得葡萄酒。最后，可以用_试剂检验是否有酒精生成。整个酿制过程一般将
7、温度控制在1825 ，原因是_。(2)图甲中葡萄汁和白糖的混合液为酵母菌提供的营养成分有_。为防止发酵液被污染，对使用的器具要_并晾干，并用_消毒。(3)从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌时， 最常用的接种方法有_和_两种。接种后，培养基上会出现一些分别由一个酵母菌繁殖而成的菌落，在生态学上，这些菌落被称为_。(4)工业生产上为提高葡萄出汁率并使果汁变得澄清，生产中常需用到_。为了能反复利用酵母菌，需要将纯化后并经过繁殖培育得到的酵母菌与海藻酸钠溶液混合制成“凝胶珠”，这是使用_法来固定酵母细胞。12玫瑰被誉为“花中皇后”，玫瑰精油也是世界上最贵的“液体黄金”。如图7154为玫瑰精油的实验流程，请
8、分析回答：图7154(1)玫瑰精油适合用_蒸馏法提取。在操作时可向蒸馏烧瓶中加入几片碎瓷片，目的是_。(2)为确保玫瑰精油的提取，应选择鲜玫瑰花与清水的比值是_。当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中影响精油提取量的主要因素有_和_。(3)油水混合物需加入_，以加速油水分层。分离的油层中还含有一定的水分，需加入_处理。(4)玫瑰精油的提取需大量原料，通常采用_技术实现玫瑰的快速繁殖。 13.有机磷化合物在农业生产中作为杀虫剂被广泛使用，长期以来因使用其量大、范围广，容易造成水体污染等诸多环境问题。(1)为了筛选甲胺磷的降解细菌，将农药厂的甲胺磷污染土壤悬液涂布在_的固体培养基上进行培养，可以
9、对降解菌进行定向的_。(2)在分离得到的菌株A中检测到的ophc2蛋白，可以催化甲胺磷的降解，这种蛋白质是在细胞的_上合成的。若要定量分析ophc2蛋白的催化能力，应测定单位时间内_。 (3)为了测定菌株A的降解效率，应配置0 mg/L、10 mg/L、30 mg/L、50 mg/L、70 mg/L的甲胺磷溶液，测定不同浓度甲胺磷溶液的吸光值，画出标准曲线，得到吸光值与甲胺磷浓度的关系：y0.02x0.01，如图7155所示。 图7155将含有100 mg/L甲胺磷的菌株A培养液分别在不同温度下培养5天后，测定吸光值，结果如下表所示，已知降解率(初始甲胺磷浓度降解后甲胺磷浓度)/初始甲胺磷浓度
10、，则取得的最大降解率为_(忽略细菌对吸光值的影响和培养液体积变化)，若甲胺磷自身化学分解，则计算的降解率数值会_(填“偏大”“不变”或“偏小”)。温度/152025303540吸光值(菌株A)1.711.531.150.491.321.89(4)继续分析细菌的16S rDNA可以鉴定种类，提取得到菌株A的DNA后，通过_扩增得到大量的16S rDNA，进而对细菌分类。 (5)导入ophc2基因的烟草可获得降解有机磷的能力，烟草花粉的遗传物质存在于细胞核和线粒体中，为了避免转基因烟草的花粉对野生型烟草造成基因污染，可将ophc2基因导入烟草细胞的_中。专题限时集训(十五)1C解析 选择培养基可抑
11、制杂菌生长，获得目的菌种，A项正确；制作泡菜所用的微生物是乳酸菌，为分解者，B项正确；醋酸菌为原核生物，但为需氧型生物，进行有氧呼吸，C项错误；腐乳制作的原理是利用蛋白酶将蛋白质分解为小分子多肽和氨基酸，利用脂肪酶将脂肪分解成脂肪酸和甘油，D项正确。2D解析 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。操作前要将接种环放在火焰上灭菌，直到接种环烧红，A项错误；划线操作需在火焰旁进行，B项错误；如果菌种稀释度较高，则平板划线法在几次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，即菌落，C项错误；在操作的第一步灼烧接种环是为了
12、避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线之前都要灼烧接种环，是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种；在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。故在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌，D项正确。3B解析 ATP水解释放的能量可用于各种生命活动，包括发光、放电等，A项正确；细胞内多个原癌基因和抑癌基因发生突变，细胞才能转化成癌细胞，B项错误；S型菌DNA被DNA酶水解后，无法进入R型菌内实现转化，C项正确；目的基因导入受体细胞，并在细胞内维持稳定和表达的过程称为转化，D项正确。4D解析 通过与标准显色液进行比色
13、，可测定泡菜中亚硝酸盐含量，A项正确；可用电激、聚乙二醇等促进植物细胞原生质体的融合，B项正确；胚胎分割技术为无性繁殖技术，C项正确；以尿素作为唯一氮源的培养基用于筛选尿素分解菌，D项错误。5A解析 果醋制作时，由于醋酸菌为需氧型细菌，发酵时应一直通气，B项错误；DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最小，C项错误；电泳法分离物质时分子的迁移速率取决于带电性质、分子形状和分子质量的大小，D项错误。6AB解析 向2 mol/L的NaCl中加水逐渐稀释到0.14 mol/L时，可使得DNA析出，A项错误；获得细胞产物时，只需要将细胞培养到愈伤组织，此时并没有得到完整的个体，故不能体现细
14、胞的全能性，B项错误；电泳法分离蛋白质的原理依据蛋白质间的带电性质、分子大小和形状不同，C项正确；试管婴儿、设计试管婴儿均有生殖细胞的获得和成熟以及体外受精，故均为有性生殖，D项正确。7AC解析 用凝胶色谱法分离血红蛋白时，小分子蛋白移动速度较慢，A项错误；DNA在2 mol/L 的NaCl溶液中溶解度很大，不易沉淀析出，C项错误。8AB解析 化学结合法可能影响酶的活性部位而影响反应效果，而吸附法是物理方法不影响酶的分子结构，A项正确；棉织物的主要成分是纤维素，用添加了纤维素酶的洗衣粉进行洗涤会使棉织物蓬松，有利于污物的洗涤，纤维素酶还能去除掉棉织物表面的浮毛，平整棉织物表面，使洗涤后的棉织物
15、柔软、蓬松，花纹清晰，色泽更加鲜艳，穿着更加舒适，B项正确；尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开，而不能再次使用，C项错误；洗衣粉中的酶没有包埋法、化学结合法和物理吸附法这些步骤，是完全游离状态的，不是固定化酶，D项错误。9(1)DNA复制DNA变性(使DNA的两条链解开)解旋酶的催化(2)碱基互补配对原则 (3)2112(4)5到3DNA聚合酶只能从引物的3端拼接单个脱氧核苷酸分子(5)病毒核酸解析 PCR技术又称多聚酶链式反应，扩增过程中遵循的原理就是DNA复制；分析得出新合成的DNA分子中，AT，CG，这个事实说明DNA分子的合成遵循碱基互补配对原则；在PCR中选用95 高温处理的目的
16、是在无解旋酶的催化下将DNA分子中的氢键断裂，两条链解开，使DNA分子变性。引物是一种单链DNA或RNA分子，它能与解开的DNA母链的3端结合，为DNA聚合酶提供吸附位点，使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核糖核苷酸，从而决定了DNA子链复制的方向是从5到3。在DNA分子扩增时，需要两种引物，由于新合成的子链都需要引物作为复制的起点，故所需的引物数目等于新合成的DNA子链数目，即22102(2112)个；PCR扩增技术就是扩增DNA，因此若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，可以用PCR扩增血液中的核酸。10(1)高压蒸汽灭菌无菌 (2)富含纤维素(3)选择碳源(4)刚果红 透明圈菌液浓度过
17、高(土壤溶液稀释不够)解析 (1)按照微生物的需求配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，取菌种的接种环要进行灼烧灭菌、操作要在酒精灯的火焰附近进行，培养要在无菌的恒温箱内。因此，全部的实验过程要在无菌条件下完成。(2)筛选菌种应从适于目的菌种生长、繁殖的环境中寻找，故培养纤维素分解菌应从富含纤维素的环境中收集。(3)目的菌能够降解纤维素，故应向培养基中添加纤维素来制作选择性培养基筛选目的菌。纤维素是植物体内的多糖，被纤维素分解菌作用后可产生葡萄糖作为碳源。(4)纤维素分解菌的筛选原理是：纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高、增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染、严
18、格无菌操作；或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌、每划一个新区域前都要对接种环进行灭菌处理)等。11(1)有氧呼吸发酵重铬酸钾这一温度最适合酵母菌生长和繁殖(2)碳源、氮源、水、无机盐和生长因子清洗干净体积分数为70%酒精(3)平板划线法稀释涂布平板法种群(4)果胶酶包埋 解析 (1)图甲搅拌过程中，酵母菌有氧呼吸，能够释放较多的能量从而进行繁殖，因此酵母菌的数量会增加。图乙密封，所以酵母菌无氧呼吸发酵产生酒精。1825 最适合酵母菌生长和繁殖。(2)培养液要为酵母菌提供碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。为防止发酵液被污染，对使用的器具要清洗干净并晾干，并用体积分数为70%酒精消毒。(3)分离
19、纯化微生物最常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(4)为提高葡萄出汁率并使果汁变得澄清，生产中常需用到果胶酶将果胶分解。将酵母菌与海藻酸钠溶液混合制成“凝胶珠”，这种固定酵母细胞的方法叫包埋法。12(1)水蒸气防止暴沸(2)14蒸馏温度蒸馏时间(3)NaCl无水Na2SO4(4)植物组织培养解析 (1)水蒸气蒸馏法适用于具有挥发性的，能随水蒸气蒸馏而不被破坏，与水不发生反应，且难溶或不溶于水的成分的提取。蒸馏时加入碎瓷片是为了防止暴沸。(2)玫瑰精油粗提取过程中，玫瑰花瓣与清水的质量比为14。当水和原料量一定时，蒸馏过程中影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和蒸馏温度，在一定时间内随蒸馏
20、时间的延长提取量不断增加，一定时间后不再增加；如果蒸馏温度过高，提取量也会减少。(3)在蒸馏液水层经盐析法将成分提取出来，分离的油层中的水用无水Na2SO4去除。(4)植物组织培养技术可以实现玫瑰的快速繁殖。13(1)以甲胺磷为唯一碳源(氮源)选择(2)核糖体甲胺磷的降解量(3)75%偏大(4)PCR(5)叶绿体解析 (1)为了筛选降解甲胺磷的细菌，就需要将被农药厂的甲胺磷污染土壤悬浮液涂布在以甲胺磷为唯一碳源(氮源)的固体培养基上进行培养，从而定向获得降解甲胺磷的细菌。(2)蛋白质的合成是在核糖体上，然后在内质网、高尔基体上进行加工、组装，形成成熟的蛋白质。若要定量分析ophc2蛋白的催化能
21、力，应测定单位时间内甲胺磷的降解量或甲胺磷的降解产物的生成量。(3)根据题意可知当温度为30 时吸光值最小(0.49)，则经5天降解后，甲胺磷浓度为(0.490.01)0.0225 mg/L，故取得的最大降解率等于(10025)10075%。若甲胺磷自身化学分解，由于环境等多种原因的影响，其实际的降解率小于理论数值。(4)提取得到菌株A的DNA后，通过PCR技术扩增得到大量的16S rDNA，那是因为多聚酶链式反应(PCR)技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。(5)叶绿体中含有DNA，其遗传方式不遵循基因的遗传定律。细胞质遗传表现为母系遗传，把ophc2基因导入到烟草的叶绿体DNA中，而烟草花粉中不会含有ophc2基因，即可避免转基因烟草的花粉对野生型烟草造成基因污染。
