1、探索遗传物质的过程第2课时DNA的提取及鉴定班级姓名【学习目标】1、 结合病毒重建实验,理解DNA是主要的遗传物质的含义2、 结合实践活动,掌握DNA粗提取与鉴定的过程与方法。【自主学习】一、DNA是主要的遗传物质1RNA是遗传物质的证据(1)烟草花叶病毒 (TMV)的实验:烟草花叶病毒结构:实验过程:结论:控制烟草花叶病毒性状的物质是而不是。(2)TMV(烟草花叶病毒)与HRV(车前草病毒)的病毒重建实验:实验过程:重建病毒烟草的病斑重建病毒烟草的病斑结论:控制TMV、HRV性状的物质是而不是。二、DNA的粗提取与鉴定1实验目的:初步掌握DNA的粗提取与鉴定的方法。2实验原理(1)DNA在不
2、同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,当NaCl溶液为时,DNA的溶解度最低。(2)DNA不溶于,但是细胞中的某些物质则溶于酒精,利用这一原理可以进一步提取含杂质较少的DNA。(3)DNA二苯胺。3实验材料:细胞液。4. 实验步骤:(1)制备鸡血细胞:取0.1g/ml的溶液100ml和新鲜鸡血180ml,放入烧杯中,充分搅拌,将混合均匀的鸡血细胞置于4摄氏度的冰箱内,静置一天。柠檬酸钠作用:;静置一天目的:(2) 提取核物质:取510mL鸡血细胞悬液入烧杯中,加蒸馏水20mL,同时,用玻璃棒沿一个方向快速充分搅拌,然后用纱布过滤取其滤液。加水搅拌作用:;过滤目的:(3) 溶解核内的DNA:在滤液中
3、加入2mol/L的NaCl40mL,并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,核中DNA游离并充分溶解,染色质中的DNA和蛋白质分离。(4)析出DNA黏稠物:沿烧杯内壁加入蒸馏水,同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌。由于溶液浓度的下降,使得 DNA溶解度下降,蛋白质溶解度上升,DNA析出成丝状黏稠物,当黏稠物不再时,停止加入蒸馏水。(5) 滤取DNA黏稠物:用多层纱布过滤,取纱布上 DNA的黏稠物(6) DNA黏稠物再溶解: 取含DNA的黏稠物放入桡杯内,加入2mol/L的NaCl溶液40mL,用玻璃棒沿一个方向不停搅拌3min,使黏稠物尽可能多地溶解。(7) 过滤含DNA的氯化钠溶液:用两层纱布过
4、滤含 DNA的氯化钠溶液,取其滤液。(8) 提取含杂质较少的DNA:在滤液中加入冷却的,并用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌,由于 DNA不溶于酒精,会出现乳白色丝状物,用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸去表面的水分。(9) DNA的鉴定:取两只试管,向两支试管中各加入0.015mol/L的NaCl溶液5mL,将丝状物放入其中一支试管中,搅拌使其充分溶解后,向两支试管中分别加入4mL 二苯胺试剂,混匀后沸水溶中加热5min,待试管冷却后,比较两试管的颜色变化,将发现加入DNA的试管中的溶液呈色,从而鉴定DNA的存在。【自主学习】1用甲种病毒的RNA和乙种病毒的蛋白质外壳组成一种转基因病毒丙,以病毒丙侵染
5、宿主细胞,在宿主细胞中产生大量子代病毒,子代病毒具有的特征是A甲种病毒的特征B乙种病毒的特征C丙种病毒的特征D子代病毒特有的特征2下列有关核酸与遗传物质关系的叙述,不正确的是()ADNA是绝大多数生物的遗传物质B有些生物的遗传物质是RNAC在真核生物中,DNA和RNA都是遗传物质,其中DNA是主要的遗传物质D核酸是所有生物的遗传物质,其中DNA是主要的遗传物质3下列操作中对DNA提取量影响较小的是()A使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,释放出DNA等物质B搅拌时,要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C在析出DNA黏稠物时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中黏稠物不再增多D在酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却4下列叙述正确的是()A含有RNA的生物,其遗传物质一定是RNAB只含有DNA的生物,其遗传物质不一定是DNAC既含有DNA又含有RNA的生物,其遗传物质是DNA和RNAD既含有DNA又含有RNA的生物,其遗传物质是DNA而不是RNA10在采用鸡血为材料对DNA进行粗提取的实验中,若需进一步提取含杂质较少的DNA,可以依据的原理是()A在物质的量浓度为0.14 mol/L的氯化钠溶液中DNA的溶解度最小BDNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色CDNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精D质量浓度为0.1 gmL1的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用