1、课时跟踪检测（七） 动物细胞培养一、选择题1关于动物细胞培养的叙述，错误的是()A通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养B在原代培养过程中，细胞在培养液中悬浮生长和增殖C发生接触抑制时需要再次使用胰蛋白酶处理细胞D动物细胞培养时要求培养瓶或培养皿内表面光滑解析：选B人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养，A正确；动物细胞具有贴壁生长的特点，B错误；细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象为接触抑制。打破接触抑制的方法是将贴满瓶壁细胞重新用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，C正确；由于细胞在培养过程中会发生贴壁生长现象，故要求
2、培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，D正确。2(2020邢台期末)动物细胞培养要处于无菌、无毒的环境中，下列操作与其无关的是()A对培养液和培养用具进行灭菌处理B在培养液中添加一定量的抗生素C定期更换培养液，防止代谢产物积累D向培养液中添加促生长因子等成分解析：选D要形成无菌、无毒的环境，需要消毒、灭菌；添加一定量的抗生素，可用于防止细菌污染；定期更换培养液，清除代谢废物可排除有毒物质，增加营养物质；向培养液中添加促生长因子等成分，这是为了满足动物细胞培养的营养和生长的需求。3细胞核重编程是指将人类成熟的体细胞重新诱导回干细胞状态，使其具有再分化形成多种类型细胞的潜能，可应用于临床医学。下列有关
3、叙述错误的是()A神经干细胞可用于治疗神经退行性疾病B干细胞分化成多种类型的细胞体现了细胞的全能性C细胞核重编程和干细胞的再分化均与细胞内基因的选择性表达相关D该项研究为临床上解决器官移植的免疫排斥反应带来希望解析：选B神经干细胞在治疗神经组织损伤和神经退行疾病方面具有重要的应用价值，A正确；干细胞分化成多种类型的细胞时没有形成完整个体，因此不能体现细胞的全能性，B错误；细胞核重编程和干细胞的再分化均与细胞内基因的选择性表达相关，C正确；细胞核重编程后可再分化形成多种类型细胞，因此该项研究为临床上解决器官移植的免疫排斥反应带来希望，D正确。4(2020菏泽期末)下列关于动物细胞培养的叙述，错误
4、的是()A动物细胞培养的原理是细胞的生长和增殖B动物细胞培养前要用酶处理使细胞分散开C可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体D恶性细胞系的细胞可进行传代培养解析：选C动物细胞培养的原理是细胞的生长和增殖，A正确；动物细胞培养前需要用胰蛋白酶处理，使细胞分散成单个细胞，B正确；不能通过细胞培养技术获得完整的动物个体，目前只能通过核移植技术获得完整的动物个体，C错误；恶性细胞系的细胞具有癌变的特点，可进行传代培养，D正确。5动物细胞培养是动物细胞工程的基础，下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是()A原代培养过程中大多数细胞的基因型会发生改变B二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的C癌细胞在培养瓶中培
5、养时会出现接触抑制现象D培养液中加入抗生素的目的是以防培养过程的污染解析：选D传代培养过程中少数细胞的细胞核型会发生改变，原代培养过程中细胞的基因型一般不发生改变，A错误；二倍体细胞的培养次数通常是有限的，只有少数细胞突变后可无限传代，B错误；癌细胞可无限增殖，因此其在培养瓶中培养时不会出现接触抑制现象，C错误；培养液中加入抗生素以防培养过程的污染，D正确。6某医院接生了一名婴儿，医院为他保留了脐带血，如果后来他患了胰岛素依赖型糖尿病，就可以通过脐带血中的干细胞为其治疗。下列选项中关于这个实例的说法，正确的是()A用干细胞培育出人体需要的器官来治疗疾病，需要激发细胞的所有全能性B可用脐带血干细
6、胞能治疗这个孩子的所有疾病C如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用到细胞培养技术D如果要移植用他的干细胞培养出的器官，应该要长期给他使用免疫抑制药物解析：选C用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治疗疾病，不需要激发细胞的所有全能性，只需诱导干细胞分化形成相应的组织器官即可，A错误；用脐带血中的干细胞不能治疗这个孩子所有的疾病，如传染性疾病等，B错误；如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用到细胞培养技术，然后发育成器官，C正确；自体器官移植不会发生免疫排斥反应，所以自体移植后不需要用免疫抑制药物，D错误。7对某种动物的肝肿瘤细胞进行动物细胞培养。下列说法错误的是()A在利用肝肿瘤组织块制
7、备细胞悬浮液时，可用胰蛋白酶处理B细胞培养应在含5% CO2的恒温箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸C为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D在合成培养基中，通常需加入动物血清等天然成分解析：选B在利用肝肿瘤组织块制备细胞悬浮液时，可用胰蛋白酶处理，A正确；细胞培养应在含5% CO2的恒温箱中进行，CO2的作用是维持培养基的pH，B错误；为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素，C正确；在合成培养基中，通常需加入动物血清等天然成分，D正确。8(2020邢台期末)如图表示动物细胞培养的过程，下列有关该过程的说法正确的是()A乙中进行动物细胞培养时应
8、通入无菌空气，以保证培养液中的氧气供应B宜用胰蛋白酶将甲中的动物组织块分散为单个的细胞C甲中用于培养的动物细胞宜取自成年动物D丙中细胞大量繁殖后，细胞之间相互接触能促进细胞的分裂解析：选B乙中进行动物细胞培养时应通入95%的空气和5%的CO2，A错误；宜用胰蛋白酶将甲中的动物组织块分散为单个的细胞，B正确；甲中用于培养的动物细胞宜取自幼龄动物，C错误；丙中细胞大量繁殖后，细胞之间相互接触会抑制细胞的分裂，D错误。9约翰格登和山中伸弥因在细胞核重编程技术领域做出革命性贡献而获得诺贝尔奖。如图为该技术的操作流程模式图，根据推断，以下说法正确的是()A干细胞的细胞核均具有单层膜结构B干细胞分化形成的
9、表皮细胞中染色体数目发生了变化C干细胞分化形成多种类型的细胞能体现细胞的全能性D干细胞可用于治疗因胰岛B细胞受损而引起的糖尿病解析：选D干细胞的细胞核具有双层膜结构，A错误；细胞分化的实质是基因的选择性表达，不会改变细胞中的遗传物质，因此干细胞分化形成的表皮细胞中染色体数目并没有发生变化，B错误；干细胞分化形成多种类型的细胞，但没有形成完整个体，不能体现细胞的全能性，C错误；干细胞可以分化形成胰岛B细胞，因此可用于治疗因胰岛B细胞受损而引起的糖尿病，D正确。10(2020南通期末)关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是()A动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理B用人工薄膜将胚状
10、体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子C植物组织培养过程中，不同阶段需用含不同浓度的细胞分裂素和生长素的培养基培养D动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒解析：选B动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使得动物组织分散成单个细胞，培养过程中要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，A正确；人工种子是指将植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，B错误；植物组织培养过程中，不同阶段需用不同浓度的细胞分裂素和生长素处理，C正确；动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖(几乎不含病毒)培养可用于植物脱除病毒，D正确。11如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲
11、线，图中b、e两点表示经筛选、分装后继续培养。下列有关叙述错误的是()A动物细胞培养选用的培养材料大多为动物的受精卵B原代培养和传代培养的分界点是曲线中b点Ce点后部分细胞可能发生癌变，变成不死性细胞D培养过程中细胞在培养瓶壁上不能形成多层细胞解析：选A动物细胞培养选用的培养材料大多为幼龄动物的器官或组织，A错误；根据图中曲线趋势可知，原代培养和传代培养的分界点是曲线中b点，B正确；细胞传代培养50代以后可能发生癌变，变成不死性细胞，C正确；正常动物细胞存在接触抑制，因此培养过程中细胞在培养瓶壁上不能形成多层细胞，D正确。12动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血
12、清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。据图分析，下列叙述错误的是()A补充血清后，正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B动物细胞培养过程中，需添加血清C培养基中补充血清对正常细胞的促进作用更明显D培养基中是否补充血清对正常细胞培养影响很大解析：选A正常细胞与癌细胞在有血清和无血清时曲线均不重叠，说明正常细胞与癌细胞的增殖速率不同；动物细胞培养过程中，只有添加血清的正常细胞才可生长、增殖；正常细胞与癌细胞在有血清的条件下培养，同一培养时间下细胞数目均比无血清时多，说明培养基中补充血清有助于正常细胞的培养，且由曲线图可知，对正常细胞的促进作用更明显；正常细胞在有血清和无血清培养时，同一培养时间下细胞数
13、目变化明显不同，说明培养基中是否补充血清对正常细胞培养影响很大。二、非选择题13某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。(2)细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_。(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。若用动物的肝脏组
14、织块制备肝细胞悬液，需用_消化处理。(4)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_，B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_或_合成水平的差异，确定Y的药效。解析：(1)肝肿瘤细胞比正常肝细胞的分裂能力强，细胞周期短，因此在其他条件相同时，相同时间内肝肿瘤细胞产生的子代细胞多。(2)细胞培养应在含有5% CO2的恒温培养箱中进行，其中CO2的作用是维持培养液的pH。(3)甲细胞为肿瘤细胞，已经失去接触抑制，而乙细胞为正常肝细胞，
15、存在接触抑制，因此在这两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长停止。甲细胞能无限增殖，因此其传代的次数比乙多；胰蛋白酶能消化组织细胞间的蛋白质，使组织细胞分散成单个细胞。(4)该实验的目的是试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，因此自变量为是否加入Y，B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水，则A组细胞培养液中应加入等量Y。已知基因X表达与肝肿瘤的发生密切相关，而基因X的表达包括转录和翻译两个步骤，抗癌药物Y的作用可能是抑制基因X的转录过程，也可能是抑制其翻译过程，因此通过分别检测基因X在A、B两组细胞中的mRNA或相关蛋白质合成水平的差异，可以确定Y的药效。答案：(1)多(2)维持培养液
16、的pH(3)停止多胰蛋白酶(4)YmRNA蛋白质14(2020邯郸一模)三维细胞培养技术是指将动物细胞与具有三维结构的支架材料共同培养，使细胞能够在三维立体空间生长、增殖和迁移的技术。其培养模式图如下，请回答下列问题：(1)三维培养胚胎干细胞时，首先应保证细胞处于_的环境，在培养液中加入牛磺酸、丁酰环腺苷酸等物质可以诱导胚胎干细胞的基因_，从而产生不同类型的组织细胞。(2)常用_将乳腺组织消化成单个细胞，其在培养瓶中进行悬液培养时会出现_现象。经过多次传代后，少数供体细胞中_的稳定性会降低而变成不死性细胞。(3)乳腺癌细胞在三维培养基中能够形成腺泡结构，呈现类似于动物体内组织细胞的生长情况，有
17、利于构建体内乳腺癌组织模型，与普通细胞悬液培养相比，利用三维细胞培养技术培养干细胞和癌细胞，其明显优点是_。解析：(1)由题干分析可知，三维培养胚胎干细胞时，首先应保证细胞处于无菌无毒的环境，在培养液中加入牛磺酸、丁酰环腺苷酸等物质可以诱导胚胎干细胞的基因选择性表达，从而产生不同类型的组织细胞。(2)根据动物细胞培养技术，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将乳腺组织消化成单个细胞，其在培养瓶中进行悬液培养时会出现贴壁生长和接触抑制现象。经过多次传代后，少数供体细胞中的遗传物质稳定性会降低发生基因突变而变成不死性细胞。(3)利用三维细胞培养技术培养干细胞和癌细胞，其明显优点是能更好地模拟体内环境，培养得到
18、更加类似于体内生长的细胞和组织。答案：(1)无菌无毒选择性表达(2)胰蛋白酶或胶原蛋白酶贴壁生长和接触抑制遗传物质(3)能更好地模拟体内环境，培养得到更加类似于体内生长的细胞和组织15Hela细胞系是人工培养、具有无限增殖能力的永生癌细胞系，在世界各地的相关实验室中为研究者提供了相同的研究对象。回答下列问题：(1)Hela细胞源自一位美国妇女的宫颈癌细胞，目前实验室中为了进一步研究Hela细胞，需进行_(填“原代”或“传代”)培养。细胞体外培养所需营养物质有糖、氨基酸、无机盐等，通常还需要加入_等天然成分，在动物细胞培养过程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是_。(2)某小组为研究葡萄糖
19、饥饿对Hela细胞生长的抑制情况，其他营养条件适宜，用不同葡萄糖浓度的培养基培养Hela细胞24 h，实验结果如表所示：葡萄糖浓度/(mmol/L)Hela细胞生长抑制率/%056.161.036.301.525.002.016.44实验结果表明：葡萄糖浓度与Hela细胞生长抑制率的关系是_。体内低浓度葡萄糖可_癌细胞的增殖，为肿瘤的限食疗法提供了理论依据。解析：(1)目前实验室中为了进一步研究Hela细胞，需进行传代培养，细胞体外培养所需营养物质有糖、氨基酸、无机盐等，通常还需要加入血清、血浆等天然成分。在动物细胞培养过程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是在多数动物细胞培养液适宜的pH范围内，胃蛋白酶已失去活性。(2)实验结果表明：葡萄糖浓度与Hela细胞生长抑制率的关系是葡萄糖浓度越低，Hela细胞生长抑制率越高。体内低浓度葡萄糖可抑制癌细胞的增殖，为肿瘤的限食疗法提供了理论依据。答案：(1)传代血清、血浆在多数动物细胞培养液适宜的pH范围内，胃蛋白酶已失去活性(2)葡萄糖浓度越低，Hela细胞生长抑制率越高抑制