1、课时跟踪检测（八）动物细胞融合技术与单克隆抗体一、选择题1在单克隆抗体制备中，关于杂交瘤细胞制备的叙述，正确的是()A可利用电融合等物理方法直接诱导两个细胞的融合B可利用细胞中染色体的数目和形态筛选出杂交瘤细胞C利用了细胞膜的流动性和基因重组等原理D用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体解析：选A单克隆抗体制备中可利用电融合等物理方法直接诱导两个细胞的融合，A正确；因为观察细胞染色体需要对细胞解离等处理，导致细胞死亡，所以不能通过观察染色体的数目和形态筛选杂交瘤细胞，B错误；杂交瘤细胞的制备利用了细胞膜的流动性和细胞增殖等原理，C错误；用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞需要在专
2、一抗体检测和克隆化培养后才能用于生产单克隆抗体，D错误。2用a表示骨髓瘤细胞，b表示浆细胞，则细胞融合过程中前两次筛选的目的分别为()Aa、aa、ab、bb、ba、aa、ababBa、aa、ab、bb、bab、bb、babCa、aa、ab、bb、bab产生特定抗体的abDa、aa、ab、bb、baa能无限增殖的aa解析：选C第一次是筛选出杂交瘤细胞(即ab)，第二次是筛选出能产生特异性抗体的ab。3如图表示单克隆抗体的制备过程，该技术未涉及的生物学原理是()A细胞膜具有一定的流动性B高度分化的动物细胞核具有全能性C一个浆细胞只产生一种抗体D骨髓瘤细胞在体外培养时能无限增殖解析：选B单克隆抗体的
3、制备过程涉及动物细胞融合，其原理是细胞膜具有一定的流动性；单克隆抗体的制备过程中未体现动物细胞核的全能性；单克隆抗体是化学性质单一的抗体，一个浆细胞只能产生一种抗体；单克隆抗体的制备过程涉及体外细胞培养，利用了肿瘤细胞在体外培养时可以无限增殖的能力。4由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”。下列对此叙述错误的是()A“瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成B“弹头”是由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成C“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能D“生物导弹”疗效高，毒副作用小解析：选C“瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成，A正确；“弹头”由
4、放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成，B正确；“弹头”中的药物能杀伤肿瘤细胞，也能杀伤正常细胞，没有选择性，C错误；“生物导弹”疗效高，毒副作用小，D正确。5(2020徐州期末)某科研所为防治SARS，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出了单克隆抗体。下列叙述错误的是()A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，以获得相应的B细胞B体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C将B细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法能诊断出SARS病毒感染者解析：选B用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，使其产生免疫
5、反应，以获得相应的B细胞，A正确；单个浆细胞有产生抗体的能力，但没有无限增殖的能力，因此在体外培养单个浆细胞不可能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，B错误；将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，C正确；单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，因此利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，D正确。6如图为动物细胞融合技术过程图，下列相关叙述错误的是()A图中c为灭活的病毒，此外还可用物理或化学方法诱导融合B图中过程发生了细胞膜的融合，体现了细胞膜的选择透过性C图中过程表示通过有
6、丝分裂过程产生杂种细胞D动物细胞融合技术可用于制备单克隆抗体解析：选B图中c为灭活的病毒，此外还可用物理或化学方法诱导融合，A正确；图中过程发生了细胞膜的融合，体现了细胞膜的流动性，B错误；图中过程表示通过有丝分裂过程产生杂种细胞，C正确；动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体，D正确。7(2020福州期末)下列不属于单克隆抗体在实践上应用的实例是()A制成“生物导弹”，将药物定向地带到癌细胞所在部位B利用同位素标记的单克隆抗体定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病C利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成早早孕诊断试剂D将某细菌的抗药基因导入小鼠细胞内解析：选D生物导弹单克隆抗体放射性同位素、化
7、学药物或细胞毒素，因此利用“生物导弹”将药物定向地带到癌细胞所在部位为单克隆抗体在实践上应用。利用同位素标记的单克隆抗体定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病；利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做早早孕诊断试剂，都属于单克隆抗体在实践上应用。将抗药细菌的某基因引入小鼠细胞内属于基因工程的范畴。8(2020北京西城区期末)将人细胞与小鼠细胞融合，培养出的杂种细胞可能会随机丢失来自人细胞的染色体。在丢失人的1号染色体的融合细胞中，不能合成人的尿苷单磷酸激酶。下列有关叙述不合理的是()A与人和小鼠细胞相比，融合细胞发生了遗传物质的改变B研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术C融合细胞经过培养，能实
8、现细胞的全能性D尿苷单磷酸激酶的基因很可能在1号染色体上解析：选C与人和小鼠细胞相比，融合细胞含有两个细胞的遗传物质，说明发生了遗传物质的改变；研究方法中应选择适当的培养基用来选择融合细胞，常用PEG、灭活病毒和电激来诱导细胞融合；融合细胞经过培养，可能会产生新的细胞，但不能产生个体，所以不可能实现细胞的全能性；在丢失人的1号染色体的融合细胞中，不能合成人的尿苷单磷酸激酶，说明尿苷单磷酸激酶的基因很可能在1号染色体上。9(2020邢台期末)下列有关动物细胞融合和植物细胞融合的说法，正确的是()A都可以用灭活的病毒促进细胞融合B细胞融合前都要先制备原生质体C依据的原理都是细胞的全能性D都能够使远
9、缘杂交成为可能解析：选D不能用灭活的病毒促进植物细胞融合，A错误；植物细胞融合前需要先制备原生质体，而动物细胞不需要，B错误；动物细胞融合和植物细胞融合依据的原理都是细胞膜的流动性，C错误；动物细胞融合和植物细胞融合都能打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能，D正确。10如图是抗HCG(人绒毛膜促性腺激素)单克隆抗体制备流程图，下列叙述错误的是()A过程中常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒和电激等B过程中筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生抗HCG抗体C过程中利用了DNA分子杂交的原理D过程培养液中所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH解析：选C过程常用灭活的病毒诱导，也可用
10、聚乙二醇和电激等，A正确；过程中筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生抗HCG抗体，还需通过抗体检测，B正确；过程中利用了抗原和抗体特异性结合的原理，C错误；过程为动物细胞培养，培养液中需要的气体主要有O2和CO2，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH，D正确。11.单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途径能被氨基蝶呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞融合后，再加入含氨基蝶呤的培养液。将这些混合物分装于如图所示的细胞培养板的小孔中培养。下列相关叙述错误的是()A制备单克隆抗体运用了动物细胞融合和动物细胞培养技术B融合B淋巴细胞
11、与骨髓瘤细胞时，培养液中可以加入PEGC培养液中加入氨基蝶呤的目的是为了筛选杂交瘤细胞D小孔中的细胞经过增殖后，均会产生所需特异性抗体解析：选D制备杂交瘤细胞运用了动物细胞融合技术，杂交瘤细胞培养需应用动物细胞培养技术，A正确；融合B淋巴细胞与骨髓瘤细胞时，培养液中可以加入PEG，诱导细胞融合，B正确；由题意知，骨髓瘤细胞中核酸的合成能被氨基蝶呤阻断，培养液中加入氨基蝶呤，骨髓瘤细胞不能增殖，杂交瘤细胞能增殖，从而可筛选出杂交瘤细胞，C正确；小孔中增殖的杂交瘤细胞不一定能产生所需要的特异性抗体，需要进一步筛选才能获得产生特异性抗体的杂交瘤细胞，D错误。12(2020滨州期末)如图是制备乙肝病毒
12、表面抗体的流程图，下列叙述正确的是()A细胞表示经免疫处理后的B淋巴细胞B植物细胞的原生质体融合与过程均可用灭活病毒处理C两次筛选均需进行专一抗体检测D图中对小鼠的两次注射目的相同解析：选A图中细胞是从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，A正确；植物细胞的原生质体融合不能用灭活病毒处理，B错误；第一次筛选是为了得到杂交瘤细胞，不需要进行专一抗体检测，C错误；第一次注射的是抗原，目的是获取能产生相应抗体的B淋巴细胞，第二次注射的是产生专一抗体的杂交瘤细胞，目的是让能产生特异性抗体的杂交瘤细胞在小鼠体内大量增殖，以获取单克隆抗体，因此两次注射的目的不同，D错误。二、非选择题13研究人员在癌症小鼠模
13、型中和在实体瘤患者的外周血中发现了癌细胞和免疫细胞融合在一起形成杂合体(杂合癌细胞)。与未发生融合的癌细胞相比，这些杂合癌细胞在体外具有更大的迁移和侵袭能力，并且当被注射到小鼠中时，与未融合的癌细胞相比，它们更容易发生转移。如图为细胞融合的过程示意图，请分析回答下列问题：(1)若A细胞为小鼠黑色素瘤细胞，B细胞为小鼠巨噬细胞(免疫细胞的一种)，C为在小鼠体内形成的杂合癌细胞。研究发现C细胞比B细胞具有更大的迁移和侵袭能力，据此判断，C细胞表面糖蛋白可能比B细胞表面糖蛋白_，导致C细胞更易扩散和转移。只是在体外融合过程中需诱导融合，常用的诱导因素有_等(至少写出两项)。(2)若题图是制备单克隆抗
14、体的过程，从A、B细胞到C细胞的过程中，所形成的C有_种(仅考虑两个细胞间的融合)，用特定的选择性培养基筛选后得到的D细胞应该是_，D细胞还需进行_，才可获得能够分泌所需抗体的细胞。医疗上，把单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结合制成“_”，借助抗体的定向作用可将药物带到病变细胞并将其杀死。解析：(1)根据C细胞比B细胞具有更大的迁移和侵袭能力，结合癌细胞易扩散迁移的原因分析，C细胞表面的糖蛋白比没有融合的B细胞更少。动物细胞在体外融合过程中常用聚乙二醇、灭活的病毒、电激等方法诱导。(2)若题图是制备单克隆抗体的过程，从A、B细胞到C细胞的过程中，所形成的C有AA型、BB型、AB型3种。用特定的
15、选择性培养基筛选后得到的D细胞应该是融合的杂交瘤细胞，D细胞还需要进行克隆化培养和专一抗体检测，就可以获得能够分泌所需抗体的细胞。答案：(1)更少聚乙二醇、灭活的病毒、电激(2)3杂交瘤细胞克隆化培养和专一抗体检测生物导弹14埃博拉病毒(EBO)呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白)，其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。人感染埃博拉病毒后会引起出血热，治疗该病的有效方法是注射疫苗或者抗体。如图为制备埃博拉病毒的单克隆抗体的过程，据图回答问题：(1)埃博拉病毒(EBO)侵入人体时，在细胞中以RNA为模板，在_酶的作用下，合成相应的DNA并指导蛋白质合
16、成，进行增殖。冻干剂型埃博拉病毒疫苗于2017年10月在我国研制成功。以GP蛋白作为疫苗比较安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有_。(2)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有_的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用_融合。筛选后的所需细胞群应具备的特点是_。(3)在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加_等天然成分。(4)获得的单克隆抗体最终可以从_中提取。“生物导弹”中，抗体的靶向作用是利用了其具有_的特点。解析：(1)由题意可知，埃博拉病毒(EBO)侵入人体时，在细胞中以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，合成相应的DN
17、A并指导蛋白质合成，进行增殖。冻干剂型埃博拉病毒疫苗于2017年10月在我国研制成功。以GP蛋白作为疫苗比较安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有抗原性。(2)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有一定的流动性的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用灭活的病毒融合。筛选后的所需细胞群应具备的特点是既能无限增殖又能产生专一抗体。(3)在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清、血浆等天然成分。(4)获得的单克隆抗体最终可以从小鼠腹水或培养液中提取。“生物导弹”中，抗体的靶向作用是利用了其具有特异性的特点。答案：(1)逆转录抗原性
18、(2)一定的流动性灭活的病毒既能无限增殖又能产生专一抗体(3)血清(4)小鼠腹水或培养液特异性15(2020厦门期末)CTLA4是人体中一种能够抑制T细胞增殖的蛋白质。科学家通过单克隆抗体制备技术来生产CTLA4抗体，用于增强T细胞对肿瘤的免疫反应，方法如下。请回答下列问题：(1)将_注入小鼠体内，从免疫小鼠体内分离获得B淋巴细胞，与_进行融合，再用_进行筛选获得杂交瘤细胞。该细胞的特点是_。对上述细胞还需要进行克隆化培养和_，经过一系列筛选获得可大规模培养的细胞群体。(2)临床试验发现，利用小鼠制备的单克隆抗体(鼠源单克隆抗体)具有外源性，容易被人体免疫系统清除。抗体结构如图所示，抗体与抗原
19、特异性结合的区域是V区，引起人体免疫反应的主要是C区。科学家通过设计“人鼠嵌合抗体”来解决这一问题。从人体中获取编码抗体_(填“C区”或“V区”)序列的基因，然后从杂交瘤细胞中提取编码鼠源单克隆抗体_(填“C区”或“V区”)序列的基因，对两种基因进行修饰、拼接，利用运载体将重组基因导入骨髓瘤细胞，并进行培养，获取人鼠嵌合抗体。(3)与鼠源单克隆抗体相比，人鼠嵌合抗体的优点是_。解析：(1)用单克隆抗体制备技术来生产CTLA4抗体，应将CTLA4蛋白注入小鼠体内，从免疫小鼠体内分离获得B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，再用特定的选择培养基进行筛选获得杂交瘤细胞。该细胞的特点是既能迅速大量增殖，又
20、能产生专一的抗体。对上述细胞还需要进行克隆化培养和专一抗体检测，经过一系列筛选获得可大规模培养的细胞群体。(2)利用小鼠制备的单克隆抗体(鼠源单克隆抗体)具有外源性，容易被人体免疫系统清除。科学家通过设计“人鼠嵌合抗体”来解决这一问题。具体过程是从人体中获取编码抗体C区序列的基因，然后从杂交瘤细胞中提取编码鼠源单克隆抗体V区序列的基因，对两种基因进行修饰、拼接，利用运载体将重组基因导入骨髓瘤细胞，并进行培养，获取人鼠嵌合抗体。(3)与鼠源单克隆抗体相比，人鼠嵌合抗体的优点是既保留了单克隆抗体的高特异性，又降低了人体对鼠源单克隆抗体的免疫排斥，从而提高治疗效果。答案：(1)CTLA4(或CTLA4蛋白)骨髓瘤细胞特定的选择培养基既能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体专一抗体检测(2)C区V区(3)既保留了单克隆抗体的高特异性，又降低了人体对鼠源单克隆抗体的免疫排斥，从而提高治疗效果