1、 (时间：90分钟，满分：100分)一、选择题(本题共20小题，每小题2.5分，满分50分)1自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是()A碳源 B氮源C无机盐 D生长因子解析：选A。自养微生物能够利用二氧化碳和水生成有机物，不利用现成的含碳有机物；而异氧型微生物只能利用现成的含碳有机物，所以它们的主要区别是碳源不同。2酵母菌培养液常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而抑制微生物的生长，原因是()A碳源供应太充足B葡萄糖不是酵母菌的原料C改变了酵母菌培养液的pHD细胞会发生质壁分离解析：选D。当培养基中葡萄糖的浓度升高时，会导致培养液的渗透压升高，从而导致细胞发生质壁分离。3
2、下列关于细菌的叙述，错误的是()A硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质B某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物C生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质D含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌解析：选D。某些细菌如蓝细菌(蓝藻)、光合细菌以及红螺菌都能进行光合作用。生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，主要包括维生素、氨基酸和碱基等。而微生物的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，它们都是从外界获得补充的。常用的伊红美蓝乳糖培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌，如果有大肠杆菌，则菌落呈黑色。4关于灭菌和消毒的下列说法不正确的是()A灭
3、菌是指杀死环境中的所有微生物，包括芽孢和孢子B灭菌和消毒实质上是相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用的灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法解析：选B。灭菌与消毒是两个概念。灭菌是指杀灭一定环境中的所有微生物，包括芽孢和孢子。根据不同的材料选用不同的灭菌方法，如接种环用火焰烧灼法，培养基用高压蒸汽灭菌法等。消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，使用的是较为温和的物理或化学方法。5培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是()化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线灭菌高压蒸汽灭菌巴氏消毒法A BC D解析：选A。培养基用高压蒸汽灭菌法；培养
4、皿能耐高温，用干热灭菌法；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底灭菌的效果；实验操作者的双手可用化学试剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；为不破坏其营养成分，牛奶可采用巴氏消毒法。6牛肉膏蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法不正确的是()A不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用B在微生物生长温度范围内保持固体状态C琼脂凝固点低，利于微生物的生长D琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强解析：选C。本题考查琼脂在培养基中的作用。在液体培养基中加入凝固剂如琼脂后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一，固体培养基中可形成肉眼可见的单个细
5、胞繁殖而来的子细胞群体，即菌落，用于微生物的分离、计数和菌种鉴定等。琼脂作为一种理想的凝固剂，是其性质决定的，琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强。琼脂在98 以上可溶解于水，在45 以下凝固，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态。7下表表示在不同培养基中细菌的生长繁殖情况(E、F、G、H、I、J、K、M为培养基的成分，“”表示生长，“”表示不生长)。请分析细菌不能合成下列哪种物质()培养基成分A、B CA、B、CI、MA、B、C H、KA、B、CM、JA、B、CI、KA、B、C H、JA、B、CK、M生长状态A.H BICK DM解析：选C。
6、从能进行细菌培养的三组培养基中看出，它们共同含有K，且其他不能进行细菌培养的都不含K，故所培养的细菌不能合成K。8测定土壤中不同微生物的数量，要选用不同倍数的稀释液进行平板培养，请选出培养细菌时所用的稀释倍数()10102103104105106A BC D解析：选D。土壤中细菌的数量非常多，一般选取的稀释倍数比较高。9通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素，可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚，可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法不能从混杂的微生物群体中分别分离出()A大肠杆菌 B霉菌C放线菌 D圆褐固
7、氮菌解析：选A。固氮细菌的生长不需要从培养基中获得氮源，可在缺乏氮源的培养基上正常生长，因此可分离出圆褐固氮菌；在加入青霉素的培养基上不能生长细菌和放线菌，可分离出霉菌；在加入10%的酚的培养基中，因该培养基能抑制细菌和霉菌的生长，所以可分离出放线菌。利用上述三种培养基无法分离出大肠杆菌。10在101、102、103倍稀释液中的平均菌落数为2760、295和46，则菌落总数(个/mL)为()A2.76105 B2.95105C4.6105 D3.775105解析：选D。本题考查菌落计数法测定微生物的数目的方法。注意是计算不同稀释度的平均菌落数。首先选择平均菌落数在30300之间的，当只有一个稀
8、释倍数的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数除以涂布平板时所用稀释液体积(0.1 mL)，再乘以稀释倍数作为该样品的细菌总数；若有两个稀释倍数的平均菌落数均在30300之间，则按两者菌落总数之比值来决定，若比值小于2应采取两者的平均数，若大于2，则取其中较小的菌落总数。本题295、46在30300之间，46103与295102比值为1.6，应取二者的平均数进行计算。11用稀释涂布平板法来统计某土壤样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是()A菌落数量最多的平板B菌落数量最少的平板C菌落数量适中的平板D若干个平板菌落数量的平均值
9、答案：C12在一个“淀粉琼脂”培养基的5个圆点位置，分别用不同方法处理，将此实验装置放在37 恒温箱中，保温处理24 h后，将碘液滴在培养基的5个圆点上，其实验结果记录于下表：淀粉圆点实验处理方法碘液处理后的颜色反应新鲜唾液与盐酸混合蓝黑色经过煮沸的新鲜唾液蓝黑色接种面包霉棕黄色只有新鲜的唾液？只有一定浓度的蔗糖溶液？请指出和所发生的颜色反应，以及接种的面包霉的分泌物分别是()A棕黄色、棕黄色、淀粉酶B蓝黑色、棕黄色、麦芽糖酶C棕黄色、蓝黑色、淀粉酶D棕黄色、蓝黑色、麦芽糖酶解析：选C。唾液中含唾液淀粉酶，在适宜条件下可将淀粉分解。唾液淀粉酶的最适pH为中性，最适温度为37 ，故新鲜唾液与盐酸
10、混合或煮沸后，唾液淀粉酶将失去活性，不能分解淀粉，淀粉遇碘呈蓝黑色。实验装置中，中含唾液淀粉酶且有活性，可将淀粉分解，加碘液，呈棕黄色，中加碘液后呈棕黄色，故面包霉能分泌淀粉酶。中加一定浓度的蔗糖溶液，不影响淀粉与碘液反应，呈蓝黑色。13下列操作不属于微生物的分离步骤的是()A稀释 B划线或涂布C接斜面 D培养解析：选C。土壤中微生物分离的步骤是：土壤取样样本稀释微生物培养和观察等，其中微生物分离过程主要在于接种阶段，通过平板划线法或者稀释涂布平板法，使得微生物充分稀释和分离，从而使得平板上生长的一个菌落来源于单个的细菌，这样就达到了从土壤中分离微生物的目的。接斜面是在试管中扩大细菌数量或者短
11、时间保存菌种的方法，不属于分离细菌的过程。14下列关于纤维素的叙述中，不正确的是()A纤维素是由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物B纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，是因为这些微生物能产生纤维素酶C植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素D自然界中的各种生物均能把纤维素分解成葡萄糖，从而作为生物体的能量来源答案：D15下列关于纤维素酶的说法，错误的是()A纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种组分B纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖解析：选D。纤维素酶是一种可以把纤维素分解为葡萄糖的酶，它是一种复合酶，至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶
12、三种组分，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。所以D项错。16用刚果红染色时，加入刚果红应在()(1)制备培养基时(2)梯度稀释时(3)倒平板时(4)涂布时(5)长出菌落时A(1)(3) B(2)(5)C(3)(5) D(4)(5)解析：选C。刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。所以加入刚果红的方法有两种，一是在菌落长出来后，二是在倒平板时，都可以达到鉴别和分离菌落的目的。17生活在反刍动物胃内的纤维素分解菌，其新
13、陈代谢类型为()A自养需氧型 B异养厌氧型C异养需氧型 D自养厌氧型解析：选B。本题考查的是微生物的代谢类型，因为牛的胃中是缺氧的环境，因此能够在此生存的微生物应该是厌氧的，而这些微生物能够利用牛胃中的有机养料纤维素作为其营养物质，所以属于异养生物。18两种刚果红染色法的结果是()A均会出现透明圈B均不会出现透明圈C方法一出现，方法二不出现D方法一不出现，方法二出现答案：A19配制的培养基成分是：纤维素粉、NaNO3、Na2HPO47H2O、KH2PO4、MgSO47H2O、KCl、酵母膏、水解酪素，该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖()A酵母菌 B自生固氮菌C各种细菌 D纤维素分解菌解析：选
14、D。该培养基的有机营养成分里面含碳的营养物质是纤维素，不能分解利用纤维素的微生物不能在该培养基上生长，所以属于选择培养基。20在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是()A分解尿素的细菌 B硝化细菌C分解纤维素的细菌 D乳酸菌解析：选C。分解纤维素的细菌能将纤维素分解，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。二、非选择题(本题共4小题，满分50分)21(12分)下表为牛肉膏、蛋白胨培养基的成分列表，据此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5 g1 g0.5 g100 mL(1)蛋白胨在培养基中的作用是_。(2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基，
15、还需添加的成分是_。(3)表中各成分含量确定的原则是_。(4)培养基配制好后，分装前应进行的工作是_。(5)从配制培养基到培养完成，所采用的预防杂菌感染的方法是_。(6)在培养基凝固前要搁置斜面，其目的是_。解析：蛋白胨属于天然有机物，不仅为异养型生物提供碳源、氮源，还能提供生长因子。答案：(1)提供碳源、氮源、生长因子(2)琼脂(或凝固剂)(3)所培养的微生物对各营养成分的需要量(4)调pH(5)高压蒸汽灭菌、灼烧接种环、酒精棉球擦手、棉塞塞试管口、在火焰旁接种(6)扩大接种面积22(12分)自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是
16、对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤：制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。用稀释涂布平板法接种样品。适宜温度下培养。结果分析：(1)测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是_。A一个平板，统计的菌落数是23B两个平板，统计的菌落数分别是22和26，取平均值24C三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26D四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25(2)一同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的
17、体积为0.2 mL)_。(3)用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量_，因为_。(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？解析：(1)计数微生物时可选取多个菌落数相差不大的平板计数并求其平均值。(2)23.40.21061.17108(个)。(3)因为菌落可能由1个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。答案：(1)D(2)1.17108(3)多当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落(4)不能。因为杂菌可能来自培养基或来自培养过程。23(12分)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况
18、而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察及计数。请回答与此实验相关的问题。(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外。培养基还必须含有的基本成分是_和_。(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。(3)为了使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。(5)如果要检测水中是否含有大肠杆菌，培养基中还应加入_。解析：(1)蛋白胨可提供氮源、碳源、维生素，而淀粉可提供碳源，除此之外，微生物的生
19、长还需要无机盐和水。(2)对培养基的灭菌，在实验室内常用高压蒸汽灭菌法。(3)在实验的过程中，除实验变量以外其他各变量均应适宜且相同，以利于更好地达到实验目的。(4)不同的菌落具有各自的菌落特征(如形状、颜色、大小、隆起程度等)。(5)培养基中加入某种试剂，以鉴别某种微生物是否存在，称为鉴别培养基。大肠杆菌用伊红美蓝鉴别。答案：(1)氮源(碳源不作要求)碳源无机盐水(后两空顺序可颠倒)(2)高压蒸汽灭菌(3)无菌水(4)多大(或严重)(5)伊红美蓝24(14分)有些微生物含有纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微
20、生物进行发酵生产，为了提高酶的产量，请你设计一个实验，利用诱变育种的方法，获得产纤维素酶较多的菌株。(1)写出实验步骤：_。制备含有纤维素的固体鉴别培养基若干。_。一段时间后，取培养基_，观察记录菌落周围透明圈的大小情况。(2)预期实验结果及结论。解析：本题设计实验时包括两方面内容，首先是对现有菌种进行诱变处理，由于变异具有不定向性，获得的菌种可能有高产的也可能有低产的，还需要对处理后的菌种进行筛选，需要利用筛选纤维素分解菌的培养基，同时用刚果红染色法进行筛选。根据实验组与对照组中透明圈的大小来判断产生纤维素酶的多少，相同时间内形成的透明圈越大，说明产生的纤维素酶量越多，反之越少。答案：(1)将培养好的生产菌株分成两组，一组用一定剂量的诱变剂处理，另一组不处理作对照把诱变组的大量菌株接种到多个含有纤维素的固体培养基上，同时接种对照组(未处理)的菌株。把它们置于相同的条件下培养用刚果红染色(2)诱变组中菌落周围的透明圈与对照组相比较大，说明诱变育种获得了高纤维素酶产量的菌种。诱变组中菌落周围的透明圈与对照组相同，说明诱变育种没有使菌株发生变化。诱变组中菌落周围透明圈与对照组相比较小，说明诱变育种获得了低纤维素酶产量的菌种。
