1、课时跟踪检测(一)微生物的分离和培养一、选择题1不同培养基的具体配方不同，但一般都含()A碳源、磷酸盐和维生素B氮源和维生素C水、碳源、氮源和无机盐D碳元素、氧元素、氢元素、氮元素2下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是()A氮源物质为该微生物提供必要的氮素B碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D水是该微生物的营养要素之一3高压湿热灭菌的操作顺序应该是()加水排冷气装灭菌物品100 kPa下灭菌加盖0 kPa下排气，打开灭菌锅ABC D4有关培养基配制原则表述正确的是()A任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子B碳源和氮
2、源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素C微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧、渗透压的影响D营养物质的浓度越高越好5细菌培养基的配制步骤是()A配制培养液、分装、调节pH、灭菌、包扎、搁置斜面B配制培养液、灭菌、调节pH、包扎、分装、搁置斜面C配制培养液、调节pH、分装、包扎、灭菌、搁置斜面D配制培养液、灭菌、分装、调节pH、包扎、搁置斜面6下列有关倒平板操作错误的是()A将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上D等待平板冷却凝固后需要倒过来放置7将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 恒温箱的目的是(
3、)A对比观察培养基有没有被微生物利用B对比分析培养基上是否生有杂菌C没必要放入未接种的培养基D为了下次接种时再使用8下列关于对大肠杆菌的接种的叙述不正确的是()A接种环在接种的试管的斜面上轻轻划“S”型曲线B在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基、培养皿和接种环进行消毒C不能将刚刚灼烧过的接种环直接挑取菌种D使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃二、非选择题9某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：(1)对买回来的菌种进行扩大培
4、养，首先制备试管培养基，写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料：_、_、_、_、_。其中提供氮源的是_；提供碳源的主要物质是_。(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的_。在烧杯中加入琼脂后要不停地_，防止_。(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌，压力_ kPa，温度_，时间_左右。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应_。(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入_，把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(5)从一支试管向另一支试管接种
5、时注意，接种环要在酒精灯_(填“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环_后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管在适温下培养，长成菌落后放入_冰箱中保存。10炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。(1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。(2)细菌鉴定：实验流程如下图所示：对配制的液体培养基等需采取_方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为_(填“无机碳”或“有机碳”)。挑选可疑菌落制片后，用_观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后，35 培养24 h，液
6、体培养基变浑浊，原因是_。对照组试管中应加入_，与实验组同时培养6 h后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_(填“高”或“低”)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体，与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有_。答 案1选C培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。2选B该微生物以CO2为唯一碳源，但CO2不能为微生物提供能量，不属于能源物质。3选A高压湿热灭菌的使用包括加水、装锅、加热排气、保温保压、出锅等步骤。装锅是指将待灭菌物品放在灭菌桶中，盖好锅盖，按对称方法旋
7、紧四周固定螺栓，打开排气阀。4选C不同的微生物对每种成分的需求不同，所以培养基的成分也各有不同。培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。5选C配制细菌培养基时，配制好培养液后应先调节pH，再分装、包扎、高压蒸汽灭菌并冷却后再搁置斜面。6选C整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵，因此，灭过菌的培养皿要放在火焰旁；打开的锥形瓶瓶口要迅速通过火焰；培养皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙，不能将培养皿盖完全打开；等待平板冷却凝固后需要倒过来放置。7选B通过设计对照实验，目的是为了检测培养基制备是否成功，即是否污染了杂菌。8选B对培养基和培养皿要进行灭菌而不是消毒；因为灼烧过的接种环温度太高，直接接触菌种会将菌
8、种杀死，所以要将接种环接触没有菌种的培养基的顶端待温度降低后再挑取菌种；有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，所以使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。9解析：(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方：牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂蒸馏水5.0 g10.0 g5.0 g15.0 g1 000 mL由配方可知所需的原料；凡能提供所需氮元素的物质为氮源，牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。(2)在配制培养基时营养要协调，按所培养微生物对各种成分的需求确定；在加入琼脂后，要不断搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。(3)玻璃器皿的灭菌应用高压蒸汽灭菌锅，在压力为100 kPa、温度为121 条件下
9、，灭菌20 min左右。若棉塞上沾有培养基，则易被杂菌污染，应作废。(4)不加水，无从谈起高压蒸汽，还有可能损坏设备。(5)酒精灯外焰温度高，灭菌效果好。灼烧后待冷却再蘸取菌种，否则会烫死菌种造成实验失败。答案：(1)牛肉膏蛋白胨蒸馏水无机盐琼脂蛋白胨、牛肉膏牛肉膏(2)比例搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(3)高压蒸汽灭菌锅100121 20 min废弃(4)适量水(5)外冷却410解析：培养基应用高压蒸汽方法进行灭菌。炭疽杆菌同化类型为异养型，应选有机碳作为其碳源。微生物个体小，肉眼观察不到，必须借助显微镜才能观察到菌体特征。在液体培养基中，细菌大量繁殖会导致培养液变浑浊；该实验中实验变量为是否加入噬菌体，所以对照组除不加噬菌体外，其他处理都应该和实验组保持一致(即应加入不含噬菌体的生理盐水)。噬菌体可破坏细菌细胞，从而使培养液变清。在特异性免疫的感应阶段，吞噬细胞参与了对抗原的摄取、处理和呈递，效应B(浆)细胞是直接产生抗体的细胞。答案：(2)高压蒸汽(98 kPa蒸汽)有机碳显微镜细菌大量繁殖等量生理盐水低吞噬细胞、效应B(浆)细胞