1、章末综合检测(一) (时间:90分钟满分:100分)一、选择题(本题包括16小题,每小题3分,共48分)1培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是()化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线消毒高压蒸汽灭菌巴氏消毒法ABC D解析:选A。培养基用高压蒸汽灭菌法;培养皿能耐高温,用干热灭菌法;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底灭菌的效果;实验操作者的双手可用化学试剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;为不破坏其营养成分,牛奶可采用巴氏消毒法。2下列属于菌落特征的是()菌落的形状菌落的边缘特征菌落的多少隆起程度颜色有无荚膜A BC D解析:选B。不同微生物在特
2、定培养基上生长形成的菌落具有稳定的形状、大小和隆起程度、颜色、边缘特征等,这些可以成为对微生物进行分类和鉴定的重要依据。3培养甲型H1N1病毒时,应选用()A无菌的牛肉汤B含多种无机盐的培养液C固体培养基D适宜温度和湿度条件下的活鸡胚解析:选D。病毒必须寄生在活细胞中才能生存,A、B、C都是普通的培养基,故错误。活鸡胚是活细胞,故D正确。4平板划线操作时划出了五个区域,适宜培养后,观察结果是( )A从第一区域到第五区域菌落数逐渐增加B从第一区域到第五区域菌落数逐渐减少C五个区域内的菌落数差不多D中间区域较多,两端区域较少解析:选B。平板划线法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌
3、种逐步稀释分散到培养基的表面;在数次划线后培养,可以分离出由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群即菌落。因此,除了第一次划线从样品中获取菌种,以后的每次划线都是从上一次划线获取菌种,从而达到稀释分离的目的,最终得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群为菌落,故从第一区域到第五区域菌落数逐渐减少,B项正确,A、C、D项错误。5下列选项中,不是使用选择培养基培养微生物的目的是()A通过表现特殊性状,与其他微生物相区别 B使需要的微生物大量繁殖C除去其他微生物 D可以增加要培养的微生物的浓度解析:选A。选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基,利用这种
4、培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来,故A错误,B、C、D正确。6分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是()加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐A BC D解析:选C。分解尿素的细菌是异养微生物,因此培养基中应该加入有机碳源,如葡萄糖;分离分解尿素的细菌的培养基从功能上分属于选择培养基,应该以尿素为唯一氮源;从物理性质上分属于固体培养基,因此应加入凝固剂琼脂。7某同学在对土壤中的尿素分解菌进行统计时,从稀释106倍的菌液中取样涂布了3个平板,结果培养后3个平板上的菌落数分别为220、230和245,下列有关说法错误的是()A实验前可对未接种的培养基
5、进行恒温培养,以确定培养基是否被污染B该实验接种使用的是以尿素为唯一氮源的培养基C3个平板上菌落的平均数可作为推算每克样品中菌株数的依据D若培养基中混入其他含氮物质,统计出的数据会偏低解析:选D。实验前可对未接种的培养基进行恒温培养,若有菌落产生,说明培养基被污染;该实验使用的是以尿素为唯一氮源的选择培养基,这样只有能够分解尿素的细菌才能在培养基中生存;3个平板上的菌落数均在30300之间,因此可取它们的平均数对每克样品中的菌株数进行估算;若培养基中混入其他含氮物质,会有不能分解尿素的细菌在此生存并形成菌落,因此统计出的数据会偏高。8生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人
6、类对化石燃料的消耗,科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如图)。在筛选产生脂肪酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供()A碳源 B氮源C生长因子 D无机盐解析:选A。植物油是一种脂肪,其元素组成为C、H、O,因此植物油属于碳源。9焦化厂活性污泥中富含难降解的有机物苯甲酰肼,是当前焦化行业环保治理的难点。某同学通过查阅资料发现可通过细菌生物降解方法处理焦化厂污染物。下列有关分析错误的是()A配制以苯甲酰肼作为唯一碳源的选择培养基进行筛选B利用平板划线法可以对初步筛选出的目的菌进行纯化C逐步提高培养基中苯甲酰肼的浓度可以得到高效降解污染物的
7、优质菌株D应该从农田土壤中筛选目的菌答案:D10MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”,对青霉素等多种抗生素有抗性。为了研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响,某兴趣小组的实验设计及结果如表所示,下列说法不正确的是( )组别培养基中的添加物MRSA菌1100 g/mL蛋白质H生长正常220 g/mL青霉素生长正常32 g/mL青霉素100 g/mL 蛋白质H死亡A.细菌的死亡不能通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定B第2、3组对比表明,使用低浓度的青霉素可杀死MRSA菌C实验还需设计有2 g/mL青霉素做处理的对照组D此实验设计不能揭示蛋白质H的作用机理解析:
8、选B。细菌是原核细胞,无细胞核,因而不能通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定,A正确;第2组和第3组对比说明使用低浓度青霉素和高浓度蛋白质H混合物可杀死MRSA菌,B错误;由于第2组的青霉素是20 g/mL,而第3组的青霉素是2 g/mL,所以实验还需设计有2 g/mL青霉素做处理的对照组,C正确;此实验设计只发现低浓度青霉素和高浓度蛋白质H混合物可杀死MRSA菌,但不能揭示蛋白质H的作用机理,D正确。11生产实践中配制微生物发酵所需要的培养基时,一般遵循“经济节约”的原则。如“以野(野生植物)代家(栽培植物)”“以纤(秸秆)代糖(淀粉)”“以氮(非蛋白氮)代朊(蛋白氮)”“以烃代粮”等。下
9、列表述不正确的是()A“以野代家”培养微生物时,需要加入更多的生长因子B“以纤代糖”能为某些微生物的生长提供碳源和能源C“以氮代朊”是因为铵盐、硝酸盐等是微生物常用的氮源D“以烃代粮”培养的微生物可以用于净化被石油污染的海域解析:选A。从题干给出的提示内容可以看出,“以野代家”就是以野生植物的原料代替栽培植物的原料,实际上野生植物含有的营养成分比栽培植物更丰富,所以不用在用野生原料培养微生物的过程中加入更多的生长因子。12玉米是一种重要的农作物,为了提高玉米的产量,科学家在玉米育种和栽培过程中作了大量的研究。如图是关于玉米培养的过程,据图判断下列说法中错误的是()A从繁殖原理上分析,AD属于无
10、性生殖B植株D和G中的染色体组数不同CEG不能体现细胞的全能性DEF过程中获得的植株一般没有直接的使用价值,即一般不应用于大田生产解析:选C。图示AD表示了玉米茎尖组织培养过程,从繁殖原理分析属于无性生殖。EG表示花药离体培养过程,该过程体现了细胞全能性。植株G中的染色体组数是D中细胞的一半,花药离体培养得到的单倍体植株一般没有直接使用价值。13在工业化大量培养植物试管苗的过程中,一般进行如下操作,则正确的操作顺序是()诱导形成芽取合适外植体诱导形成愈伤组织诱导形成未分化状态的细胞诱导形成根ABC D解析:选B。植物细胞培养的一般操作顺序是:选取合适的外植体;诱导形成未分化状态的细胞,并诱其分
11、裂形成愈伤组织;再经再分化过程,诱导愈伤组织细胞分化发育成芽和根,从而形成试管苗,移栽后长成植物体。14下图是利用三倍体香蕉的茎尖培养脱毒香蕉植株的过程示意图。下列叙述正确的是()A过程中发生了有丝分裂和减数分裂B对香蕉进行花药离体培养可获得单倍体C阶段为脱分化过程DX代表愈伤组织解析:选D。利用三倍体香蕉的茎尖培养脱毒香蕉植株的过程属于植物组织培养,该过程中不发生减数分裂;三倍体香蕉无法形成正常的花粉,进行花药离体培养不能获得单倍体;阶段为再分化过程,阶段是脱分化过程,形成的X为愈伤组织。15组织培养出来的植物一般很少有植物病毒危害,其原因在于( )A在组织培养过程中经过了脱分化和再分化,进
12、行的是快速分裂和分化B人工配制的培养基上,植物病毒根本无法生存C进行组织培养用的材料是刚分裂产生的茎尖、根尖或芽尖D接种组织培养之前进行了严格的消毒处理解析:选C。组织培养出来的植物一般很少有植物病毒危害,其原因在于进行组织培养用的材料是刚分裂产生的茎尖、根尖或芽尖,它们代谢旺盛,分裂能力强,不会或很难感染病毒,C正确;A、B、D错误。16下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程,据图分析不正确的是()A该培养过程可以体现棉花叶肉细胞的全能性B过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变C过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能D过程需用适宜浓度的生长素和细胞分裂素处理解析:选B。该培
13、养过程可以体现棉花叶肉细胞的全能性,A正确;突变的方向是不定向的,B错误;是脱分化过程,该过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能,故C正确;表示再分化过程,决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例,特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要,故D正确。二、非选择题(本题包括8小题,共52分)17(7分)有机磷农药是用于防治植物病虫害的含磷有机化合物,广泛应用于农业生产中,有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标,不少品种对人、畜的毒性很强,人误食后如不及时医治就会危及生命,某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题:(1)为了获得能降解有机磷农药
14、的微生物菌种,可在被有机磷农药污染的土壤中取样,并在含有碳源、氮源及_等的选择培养基上添加适量的_进行选择培养。(2)将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1 L含20 mg有机磷农药的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜),观察实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时,则应选择微生物_(填“甲”“乙”或“丙”)作为菌种进行后续培养,理由是_。(3)制备固体培养基的基本步骤是计算_熔化分装加棉塞包扎_倒平板。(4)若要测定培养液中选定菌种的菌体数,既可在显微镜下用_直接计数,也可选用_法统计活菌数目。答案:(1)水和无机盐有机磷农
15、药(2)丙微生物丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强(3)称量高压蒸汽灭菌(4)血球计数板涂布平板18(6分)利用微生物分解淀粉生产糖浆具有广阔的应用前景。某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌,进行了如下实验。(1)实验步骤:配制以_为唯一碳源的固体培养基,为了使培养基凝固成固体,应该向培养基中加入的物质是_。将土壤样品接种到已灭菌的培养基上,在恒温培养箱中培养一段时间后,培养基上出现_。将接种针用_法灭菌后,从中的培养基上挑取一定量细菌,接种入_(填“固体”“半固体”或“液体”)培养基,在恒温摇床上培养24 h,使细菌大量繁殖。配制与相同的培养基,并加入少量碘液,使培养
16、基呈蓝紫色。用_法将大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上。培养一段时间后,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现_现象的菌落即为初选菌落,经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。(2)上述所有倒平板和接种操作,都应在超净台上_附近进行。(3)上述实验步骤中,从用途看,所用培养基属于_培养基,和所用培养基属于_培养基。解析:(1)该实验的目的是分离能高效分解淀粉的细菌,所以在培养基中淀粉应为唯一的碳源。如果配制固体培养基,需要加入琼脂。土壤中因为含有细菌,所以将土壤样品进行培养后会在培养基上出现菌落。金属用具(如接种针),应该用灼烧法进行灭菌。扩大培养时应该用液体培养基。接种可以
17、采用稀释涂布平板法。如果淀粉被分解,则蓝色变浅,所以出现浅色现象的菌落就为初选菌落。(2)无论是倒平板还是接种,都需要在酒精灯火焰附近进行。(3)从实验的目的看,所用培养基属于选择培养基,和所用培养基属于鉴别培养基。答案:(1)淀粉琼脂菌落灼烧液体稀释涂布平板浅色(较大透明圈)(2)酒精灯火焰(3)选择鉴别19(6分)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答下列问题:(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于_培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法
18、有两种,即_和_。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。解析:(1)欲筛选出能降解原油的菌株,培养基中应只含有原油而无其他碳源,不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存,这类培养基属于选择培养基。(2)分离纯化菌种时,需采用的接种方法有平板划线法和涂布平板法,使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便纯化菌种。(3)降解原油能力越强的菌株,在菌落周围形成的分解圈越大。
19、(4)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)、高压蒸汽灭菌(如培养基)等。无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行,以避免周围微生物的污染。答案:(1)原油选择(2)平板划线法涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰20(7分)纤维素是自然界分布最广、含量最多的一种多糖,马、牛等食草动物具有消化纤维素的能力,请回答有关问题:(1)与培养土壤中分离的纤维素分解菌相比,培养马胃中分离出的纤维素分解菌要调整培养基的pH,还要保证_ 条件。配制好的培养基培养前应采用 _法进行灭菌处理。从功能上看,该培养基是_ 培养基。(2)给锥形瓶内的培养液接种时应在酒
20、精灯火焰附近进行,防止_污染培养基。对无菌操作时用到的玻璃器皿要用_ 的方法彻底灭菌。(3)某同学使用划线法分离纯化菌株,经一段时间培养,发现有的线上长满了菌,有的线上无菌落,造成这种情况的原因可能是划线操作时_。(4)将筛选培养的纤维素分解菌破碎后,用_的方法可将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开。纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖,根据这一特性,可用_ 试剂判断提取物是否起到了降解纤维素的作用。解析:(1)马胃是无氧环境,所以需保证培养时是无氧环境。培养基一般用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。此培养基是为了选择出特定的微生物。(2)操作在酒精灯火焰旁的原因是防止杂菌污染。玻璃器皿可用干热灭菌法
21、。(3)某同学使用划线法分离纯化菌株,经一段时间培养,发现有的线上长满了菌,有的线上无菌落,造成这种情况的原因可能是划线操作时接种环灼烧后未冷却(或未从上一线末端开始划线)。(4)将筛选培养的纤维素分解菌破碎后, 离心的方法可将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开。纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖,根据这一特性,可用斐林试剂判断提取物是否起到了降解纤维素的作用。答案:(1)无氧(或无氧和温度等合理条件)高压蒸汽灭菌选择(2)杂菌干热灭菌(3)接种环灼烧后未冷却(或未从上一线末端开始划线)(4)(密度梯度)离心斐林21(7分) 回答有关微生物的培养与应用问题:(1)微生物的培养需要使用培养基
22、,不同培养基的配方不同,但一般都有_、碳源、氮源;在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基时,需加入_作为唯一的碳源,该培养基属于_培养基;若将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上,在该培养基中需要加入的特殊染料是 _,当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生 _来筛选纤维素分解菌。(2)若要统计土壤样品中纤维素分解菌的数目,宜采用_法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的_就能大约推测出样品中的活菌数。(3)一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4个,则每毫升样品中的活菌数是(所用稀释液的体积为0.2 mL)_个。解析:(1)微生物的培养需要使用
23、培养基,不同培养基的配方不同,但一般都有水、无机盐、碳源、氮源;在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基时,需加入纤维素作为唯一的碳源,该培养基属于选择培养基;若将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上,在该培养基中需要加入的特殊染料是刚果红,当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(2)若要统计土壤样品中纤维素分解菌的数目,宜采用涂布平板法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中的活菌数。(3)一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4个,则每毫升样品中的活菌数是(所用稀释液的体积为0.2 mL)
24、1.17106个。答案:(1)水、无机盐纤维素选择刚果红透明圈(2)涂布平板菌落数目(3)1.1710622(7分)某地是全国最适宜生产水果的生态区之一,生产的苹果浓缩果汁酸度优于其他地区的苹果,深受欧美市场欢迎,发展无病毒苗木成为建立高产优质商品苹果基地的重要措施。(1)下面是某地农林科学院进行苹果试管苗培养的一般过程:请填写a、c所表示的内容:a_,c_。(2)该过程中a、c的启动关键在于培养基中所加生长素和细胞分裂素的浓度、_以及_。(3)醋酸杆菌是生产苹果醋必用的菌种,可以从食醋中分离得到纯化的醋酸杆菌。扩大培养醋酸杆菌时,一般采用平板倒置培养,原因是_。解析:(1)植物组织培养过程包
25、括离体的植物组织或细胞经a脱分化形成b愈伤组织,再经c再分化形成胚状体或丛芽最后发育成完整的植株。(2)脱分化和再分化的启动关键是培养基中所加生长素和细胞分裂素的浓度、使用的先后顺序和用量的比例。(3)微生物纯化过程中平板倒置培养,原因是防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染。答案:(1)脱分化再分化(2)使用的先后顺序用量的比例(3)防止培养皿盖上凝结的水滴落入培养基造成污染 23(6分)我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放进培养基中进行培养,最终发育成完整的新植株。如图是组织培养形成兰花植株的示意图,请据图回答下列问题:(1)用此技术培养形成兰花植株依据的原理是_。(2)在培养过程中,要
26、促进细胞分裂生长,培养基中应有营养物质和植物激素,营养物质包括无机物和小分子的有机物,植物激素包括_和_两类植物激素。(3)在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证_。(4)过程进行的细胞分裂方式是_,过程除了细胞分裂外,还进行细胞_等过程。(5)从育种的角度来看,植物组织培养与有性繁殖相比,优势主要有(列举两条):_。解析:该技术依据的是植物细胞的全能性,实现细胞全能性的首要条件是离体、无菌,然后要给予一定的营养物质、激素和适宜的外界条件。在培养过程中,细胞以有丝分裂的方式增殖,经过细胞分裂、分化最终形成植株。植物组织培养属于无性繁殖,具有保持亲
27、本优良性状、能快速大量繁殖种苗等优点。答案:(1)植物细胞的全能性(2)生长素细胞分裂素(3)无菌(4)有丝分裂分化(5)能保持母本的优良性状;培养周期短,繁殖效率高(或快速繁殖);能培育无病毒植物等(列出两条即可)24(6分)为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效,老师带领生物兴趣小组的同学设计了如下实验(实验过程符合无菌操作要求):用无菌水漱口,向漱口液中加入适量的该中药牙膏;配制牛肉膏蛋白胨固体培养基;将上述样品接种到培养基上,在适宜条件下进行培养;一段时间后,对培养结果进行观察并进行菌落计数。请分析上述实验过程并回答下列问题:(1)培养基中牛肉膏的作用主要是为微生物
28、生长提供_等营养物质;培养基灭菌常用的方法是_。(2)如何证明所用培养基已经彻底灭菌?_。(3)本实验样品接种时最好采用_法。培养一段时间后,培养基表面长出菌落,每一个标准菌落来源于样品中的_。(4)请指出本实验设计中的一个明显的错误,并加以改正。_。解析:该实验的目的是检验某中药牙膏是否有抑菌功效。从实验的操作中可以看出,该实验缺乏对照,应该将漱口液分为两份,一份加牙膏,一份不加牙膏作为对照,其他操作相同。(1)、(2)牛肉膏既是碳源也是氮源,还能为细菌生长提供维生素。培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。如果单独将没接种的培养基进行培养,如果发现没有菌落产生,说明灭菌彻底,如果有菌落产生,说明还有残菌未被杀灭。(3)本实验最好采用涂布平板法进行接种,如果菌液稀释充分的话,每个菌落是由单个细菌生长而成。答案:(1)碳源、氮源、维生素高压蒸汽灭菌法(2)对未接种的培养基进行培养,如无菌落出现,则证明培养基灭菌彻底(3)涂布平板一个活菌(4)没有设置对照实验;应将漱口液分为两份,一份加牙膏,一份不加牙膏,其他条件相同,分别接种培养