1、课时跟踪检测四 微生物的实验室培养(满分50分时间25分钟)一、选择题(每小题3分，共24分)1下列关于平菇培养的操作程序，正确的是()A配制牛肉膏蛋白胨培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养B配制牛肉膏蛋白胨培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养C配制棉子壳培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养D配制棉子壳培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养解析：选D培养平菇常用的培养基有棉子壳、花生饼、玉米芯等，具体的操作程序是：配制培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养。2下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述错误的是()A氮源物质为该微生物提供必要的氮素B碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营
2、养物质D水是该微生物的营养要素之一解析：选B该碳源是CO2，属于无机物，不能作为微生物的能源物质。3无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是()A对培养操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌B对培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌C为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行D实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触解析：选A灭菌是采用强烈的理化因素对用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基进行处理，使物体内外一切微生物，包括芽孢和孢子都要被杀死；实验操作者的衣着和手以及操作空间只能进行消毒。4关于实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作，下列说法正确的是()A
3、配制培养基、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行B倒平板时，倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖C划线接种时，灼烧接种环后立即进行再次划线D划线接种结束后，需将平板倒置后放入培养箱中培养解析：选D倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，配制培养基不需要在酒精灯火焰旁进行，A错误；倒入培养基后应立即盖上培养皿的皿盖，冷却后将平板倒过来放置，B错误；划线接种时，灼烧接种环后要待其冷却后才能进行再次划线，C错误；划线接种结束后，需将平板倒置后放入培养箱中培养，D正确。5将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 恒温箱的目的是()A对比观察培养基有没有被微生物利用B对比分析培养基是否被杂菌污染C没必要放
4、入未接种的培养基D为了下次接种时再使用解析：选B放入未接种的培养基，起到对照作用，可确定培养基是否被杂菌污染。6为了保存菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述错误的是()A对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C临时保藏菌种容易被污染或发生变异D对于需要长期保存的菌种，可以采用低温4 保藏的方法解析：选D对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3 mL甘油瓶中加入1 mL的甘油后灭菌，将1 mL的菌液转移到甘油瓶中，放在20 的冷冻箱中保存。7平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是()A都要将菌液进行一
5、系列的梯度稀释B平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面C稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基上进行培养D都会在培养基表面形成单个的菌落解析：选D平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个的菌落。8.右面是微生物平板划线示意图。划线的顺序为。下列叙述正确的是()A在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌B划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上C接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的D第区和第区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数解析：选C在
6、每次划线前后都要对接种环进行灭菌；进行划线操作时，左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖；注意接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的；划线时第区和第区的划线不能相连。二、非选择题(共26分)9(12分)回答下列微生物培养的问题：(1)如表是某培养液的成分及含量，该培养液培养的微生物同化作用类型是_；若用此培养液培养固氮微生物，则应除去的成分是_，应加入的物质是_。编号成分(NH4)HCO3KH2PO4CaSO4FeCl2维生素水含量0.5 g3.0 g0.5 g0.5 g少许1 000 mL(2)下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表，
7、据此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5 g1 g0.5 g100 mL牛肉膏、蛋白胨在培养基中的作用是提供_、_、_等营养。要用表中所给材料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的成分是_。表中各成分含量确定的原则是_。培养基配制好后，分装前应进行的工作是_。从配制培养基直到培养完成，所采用的预防杂菌感染的方法0是_、_、_等。(3)微生物接种的方法很多，最常用的是_和_。解析：(1)培养基中不含有机碳源，可判断培养的生物同化作用类型为自养型；若用此培养液培养固氮微生物，则应除去氮源(NH4)HCO3，但需加入有机物提供碳源。(2)根据所培养微生物对各营养成分的需要量配制培养基的成
8、分，若要观察细菌菌落状况需用固体培养基，还需添加琼脂；微生物培养时需对培养基、接种工具进行无菌处理，并进行严格的无菌操作。(3)常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。答案：(1)自养型(NH4)HCO3(或)有机物(2)碳源氮源维生素(或磷酸盐等)琼脂(凝固剂)所培养微生物对各营养成分的需要量调整pH高压蒸汽灭菌烧灼接种环酒精棉擦手(或棉塞塞试管口、在火焰旁接种)(3)平板划线法稀释涂布平板法10(14分)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。(1)细菌培养：采集疑似患者的
9、样本，分离培养，获得可疑菌落。(2)细菌鉴定：实验流程如图所示：对配制的液体培养基等需采取_方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为_(填“无机碳”或“有机碳”)。挑选可疑菌落制片后，用_观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后，35 培养24 h，液体培养基变浑浊，原因是_。对照组试管中应加入_，与实验组同时培养6 h后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_(填“高”或“低”)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体，与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有_。解析：培养基应用高压蒸汽方法进行灭菌。炭疽杆菌同化类型为异养型，应选有机碳作为其碳源。微生物个体小，肉眼观察不到，必须借助显微镜才能观察到菌体特征。在液体培养基中，细菌大量繁殖会导致培养液变浑浊；该实验中实验变量为是否加入噬菌体，所以对照组除不加噬菌体外，其他处理都应该和实验组保持一致(即应加入不含噬菌体的生理盐水)。噬菌体可破坏细菌细胞，从而使培养液变清。在特异性免疫的感应阶段，吞噬细胞参与了对抗原的摄取、处理和呈递，效应B(浆)细胞是直接产生抗体的细胞。答案：(2)高压蒸汽(98 kPa蒸汽)有机碳显微镜细菌大量繁殖等量生理盐水低吞噬细胞、效应B(浆)细胞