1、课时达标训练(六)动物细胞融合与单克隆抗体(时间：25分钟；满分：50分)一、选择题(每小题2分，共20分)1培养人细胞与小鼠融合细胞发现，细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，在仅含有人的1号染色体的融合细胞中，合成出人的尿苷单磷酸激酶。下列有关叙述中，不合理的是()A与人或小鼠细胞相比，融合细胞发生了遗传物质的改变B研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术C在融合细胞中，人的1号染色体DNA与小鼠DNA发生了重组D这种研究可能发现人的某一特定基因与特定染色体的关系2单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是()A特异性强、灵敏度高
2、B与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D由B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌3动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是()A诱导融合的方法完全相同B所用的技术手段完全相同C所采用的原理完全相同D都能形成杂种细胞420世纪30年代，科学家们发现肺结核、天花、水痘和麻疹等疾病的患者的病理组织中存在多核细胞，这些多核细胞最可能的来源是()A细胞进行了无丝分裂造成的B细胞进行有丝分裂时，染色体复制后没有分开形成两个子细胞C有丝分裂时，细胞核进行了分裂，而细胞质没有进行分裂D细胞在体内病毒的作用下发生了细胞融合5用动物细胞工程技术制备单克隆抗体，下列
3、实验步骤中错误的是()A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B用氯化钙作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合C筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体D该杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体6(重庆高考)如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图，下列有关叙述正确的是()A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群7单克隆抗体制备过程中，对骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细
4、胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是()B淋巴细胞骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞AB C D8下列与细胞工程技术相关的表述中，不正确的是()A植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性B细胞融合技术使研究人员得以克服远缘杂交不亲和的障碍C动、植物细胞融合技术的基本原理相同，诱导融合的方法类似D培养动物细胞与培养植物细胞所用的培养基成分基本相同9如图是某种细胞工程技术，若图表示动物细胞融合和植物体细胞杂交，则对于两者的比较中，正确的是()诱导融合的方法完全相同用的技术手段不相同采用的原理完全相同都能形成杂种细胞A B C D10以H1N1病毒核衣壳蛋白为抗原，
5、采用细胞工程制备单克隆抗体，下列叙述正确的是()A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清为单克隆抗体B体外培养单个浆细胞可以获得大量针对H1N1病毒的单克隆抗体C将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与H1N1病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可以诊断该病毒感染体二、非选择题(共30分)11(10分)如图表示细胞融合技术的一些过程，据图回答：(1)从A和B细胞到C细胞的过程中，必须用_处理。(2)若A、B细胞为植物细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了细胞壁，这种酶可能是_，由此生成的A和B细胞称为_。由A、B到C的过程中，常用的物理方法有_。融
6、合完成的标志是_，形成D细胞还要应用_技术，把其培养成植株。(3)若A细胞为骨髓瘤细胞，B为淋巴细胞，那么D细胞称为_，由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程，称为_，这种细胞既能无限繁殖，又能产生_。(4)若A为人细胞，B为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞上的蛋白质，在C细胞阶段，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光，到D细胞阶级，两种颜色的荧光均匀分布，原因是_。(5)若A、B细胞为动物细胞，一般取自_，然后用_将其分散开。由A、B到C的过程中，采用的不同于植物细胞融合的手段是_。(6)若该过程为制备单克隆抗体，A和B融合后形成的C有几种？(只考虑两两结合)_。12(10分)人类在预防与诊
7、疗传染疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：请回答：(1)过程代表的是_。(2)过程构建A基因表达载体时，必须使用_和_两种工具酶。(3)过程采用的实验技术是_，获得的X是_。(4)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行_比较；或用图中的_进行特异性结合检测。13(10分)某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞
8、为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是_。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_。(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_处理。(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_。(5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关
9、，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_或_合成水平的差异，确定Y的药效。答 案1选C在人细胞与小鼠细胞的融合细胞中，与人或小鼠细胞相比，染色体数目发生了变化，融合细胞发生了遗传物质的改变，属于染色体变异，并非DNA重组。2选C抗体是由B淋巴细胞分泌的，每一种B淋巴细胞只能分泌一种抗体。要想获得大量单一抗体，需要将某一种B淋巴细胞大量克隆，但是在体外培养的条件下，B淋巴细胞不能无限增殖。由B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞，
10、能在体外培养的条件下大量增殖，并分泌单克隆抗体。3选D两种细胞工程技术中都要进行细胞融合，但融合的技术不完全相同；动物细胞的融合常用灭活的病毒做诱导剂，而植物细胞融合则不用；动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性；两者都能形成杂种细胞，但植物的杂种细胞最终形成杂种植株。4选D选项C、D都可形成多核细胞，但结合题干信息，此种现象与感染病毒有关，故选项D最有可能。5选BB淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合需要灭活的病毒、聚乙二醇或物理因素来诱导。氯化钙不能作为诱导剂，氯化钙的作用是在基因工程中用于提高细胞壁的通透性，便于重组质粒进入微生物细胞内。6选D是从
11、已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞(浆细胞)，A项错误；胰蛋白酶常用在动物细胞培养过程中，其作用是使组织分散成单个细胞，图示中应使用促融剂如聚乙二醇(PEG)，B项错误；图示为杂交瘤细胞，其同时具有浆细胞产生抗体的特性和骨髓瘤细胞无限增殖的特性，C项错误；图示是经筛选获得的能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D项正确。7选A在题中特定的选择培养基上，能够存活、增殖的细胞只有杂交瘤细胞。8选D植物组织培养的理论基础是细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能，A正确；动物细胞融合能突破有性杂交的障碍，即可以克服生物远缘杂交不亲和的障碍，B正确；动物细胞融合与植物原生质体融合的原理是基本
12、相同的，即细胞膜的流动性，诱导融合的手段都有物理法和化学法，C正确；动物细胞培养所用培养基为液体培养基，必须添加血清等天然成分，而植物组织培养所用培养基为固体培养基，需要添加植物激素，D错误。9选C若图表示动物细胞融合和植物体细胞杂交，这两者的共同点是：都能形成杂种细胞。两者的区别是诱导融合的方法不完全相同：前者是使细胞分散后，诱导细胞融合，而后者是去除细胞壁后诱导原生质体融合；用的技术手段不完全相同：前者是离心、电激、聚乙二醇、灭活的病毒等试剂诱导，而后者是离心、电激、聚乙二醇等试剂诱导；采用的原理不完全相同：前者是细胞膜的流动性，而后者是细胞膜的流动性和细胞的全能性。10选D单克隆抗体是相
13、应的杂交瘤细胞产生的，单个浆细胞的培养不能获得单克隆抗体；用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，血清中的抗体不是单一抗体，其还含有体内已存在的其他抗原的抗体；等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，可以形成三种杂交细胞，但只有浆细胞和骨髓瘤细胞融合而成的细胞称为杂交瘤细胞。11解析：植物体细胞杂交前需先去掉细胞壁，因为细胞壁由纤维素和果胶组成，应用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。第二步就是让不同的原生质体融合，融合必须采用一定的技术手段，进行人工诱导。在完成细胞融合后，还要用植物组织培养技术将杂种细胞培育成植株。动物在免疫反应过程中，每一种B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须使能分泌
14、该单一抗体的B淋巴细胞大量增殖。B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞同时培养，在灭活的病毒(或聚乙二醇)的诱导下，促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，得到杂交瘤细胞。它兼有两个亲本细胞的特性既能大量增殖，又能产生某种特异性的抗体。答案：(1)诱导因素(2)纤维素酶和果胶酶原生质体电激、振动产生细胞壁植物组织培养(3)杂交瘤细胞细胞培养单一抗体(4)构成细胞膜的蛋白质和磷脂分子具有一定的流动性(5)动物胚胎或出生不久的幼龄动物的组织或器官胰蛋白酶用灭活的病毒诱导细胞融合(6)3种12解析：(
15、1)根据图中过程中由RNA指导合成DNA可判断为逆转录。(2)基因工程中构建基因表达载体时用限制酶将目的基因和运载体切出相同的黏性末端或平末端，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接起来。(3)图中为小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的融合过程，可得到杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体。(4)病毒表面的A蛋白为主要抗原，因此可用A蛋白制备疫苗，刺激机体产生抗体。对于病毒的检测可采用与已知病毒进行核酸序列比较的方法，也可根据抗原与抗体发生特异性结合的特点，用抗A蛋白的单克隆抗体进行检测。答案：(1)逆转录(2)限制酶DNA连接酶(3)细胞融合杂交瘤细胞(4)A蛋白核酸(基因)序列抗A
16、蛋白的单克隆抗体13解析：(1)甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。肿瘤细胞为无限增殖的细胞，细胞周期短。在相同条件下，培养相同的时间，甲细胞的数量多于乙细胞。(2)动物细胞培养液中必须加入动物血清，血清中含有血清蛋白、生长因子、激素等合成培养基中缺乏的物质。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养中进行，CO2的作用是维持培养液的pH。(3)甲为肿瘤细胞，能无限增殖，传代的次数要比乙细胞多，乙细胞(正常肝细胞)在培养瓶中贴壁生长，当铺满瓶壁时，生长停止。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)使其分散成单个细胞。(4)培养液中加入抗生素来抑制和杀灭细菌，抗生素对动物细胞没有影响。(5)设计一组加入抗癌药物的实验组，一组不加药物的对照组，通过检测药物影响X基因的表达过程，即通过检测X基因转录形成mRNA、翻译形成蛋白质的量来确定药效。答案：(1)多(2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质维持培养液的pH(3)停止多胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)(4)抗生素(5)YmRNA蛋白质