1、1.2基因工程的基本操作程序理一理判一判1.PCR反应中温度的周期性改变是为了使DNA聚合酶催化不同的反应。()2启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用。()3为保证目的基因在水稻细胞中能够表达，载体上应含有特定的复制原点。()4外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制。()5表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得。()6人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性。()7从大肠杆菌细胞中可获得人胰岛素基因的mRNA，说明目的基因完成了表达。()8动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是受精卵能使目的基因高效表达。()悟一悟1.获取目的基
2、因的不同方法(1)如果不知道目的基因的核苷酸序列，可以通过构建基因文库的方法，即通过受体菌储存并扩增目的基因后，从基因文库中获取目的基因。(2)如果知道目的基因的核苷酸序列，而且基因比较小，可以通过DNA合成仪，利用化学方法直接人工合成。(3)如果知道要扩增的目的基因及其两端的核苷酸序列，而且基因又比较大，可以通过RCR技术扩增。2限制酶剪切目的基因与质粒的次数不同：获取一个目的基因需限制酶剪切2次，共产生4个黏性末端或平末端，切割质粒一般只需要限制酶剪切1次，产生2个黏性末端或平末端，因为质粒是环状DNA分子，而目的基因在DNA分子链上。3切割目的基因和载体并非只能用同一种限制酶：如果用两种
3、不同限制酶切割后形成的黏性末端相同，则在DNA连接酶的作用下，目的基因与载体也可以连接起来。4目的基因的插入点不是随意的：基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入到启动子与终止子之间。5基因工程操作过程中只有第三步“将目的基因导入受体细胞”没有碱基互补配对现象。6在DNA分子、mRNA分子上检测目的基因是否插入、目的基因是否转录时，用的探针都是放射性同位素等标记的含有目的基因的DNA片段。检测原理都是碱基互补配对原则，只是被检测的物质不同，一个是转基因生物的基因组DNA，一个是转基因生物细胞内的mRNA。7进行翻译水平的检测，则是利用抗原与抗体特异性结合的原理。感悟体会：练一练1.
4、2019全国卷基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。回答下列问题。(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括_和_。(2)生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是_。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是_。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的_。(3)目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_。解析：本题借助基因工程的相关知识，考查考生对生物学问题进行解释的能力；通过PCR与体内DNA复制的比较，体现了科学思维中分析与推断要素。(1)基因文库包括基因组文库
5、和cDNA文库。(2)体内DNA复制时，需用解旋酶打开氢键使双链DNA解旋，而PCR扩增目的基因时，是借助高温加热至9095 使DNA变性解旋。(3)PCR反应体系中进行互补链的合成时，温度需控制在7075 ，则应使用耐高温的DNA聚合酶，即Taq酶，而不能使用大肠杆菌DNA聚合酶(高温下会失活)。答案：(1)基因组文库cDNA文库(2)解旋酶加热至9095 氢键(3)Taq酶热稳定性高，而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活22019江苏卷图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。请回答下列问题：(1)EcoR V酶
6、切位点为，EcoR V酶切出来的线性载体P1为_末端。(2)用Taq DNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为_的脱氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在_酶作用下，形成重组质粒P3。(3)为筛选出含有重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如下表(“”代表生长，“”代表不生长)。根据表中结果判断，应选择的菌落是_(填表中字母)类，另外两类菌落质粒导入情况分别是_、_。菌落类型平板类型ABC无抗生素氨苄青霉素四环素氨苄青霉素四环素(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含
7、有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是_。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400 bp片段，原因是_。解析：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生的理解能力和获取信息能力。(1)EcoR V酶切位点在酶所识别序列的中心轴线处，产生的是平末端。(2)DNA连接酶对平末端的连接效率较低，因此通常要将平末端改造成黏性末端后再进行连接。由于目的基因片段的两端各自带一个腺嘌呤脱氧核苷酸，根据碱基互补配对原则，处理后的质粒两端需要各添加一个碱基为胸腺嘧啶的脱氧核苷酸；要将处理后的
8、质粒与目的基因连接起来，需要用DNA连接酶。(3)由于四环素抗性基因中含有EcoR V酶识别的序列及切割位点，所以形成的重组质粒中四环素抗性基因已经被破坏，而氨苄青霉素抗性基因正常。根据表中结果可知，A菌落抗氨苄青霉素和四环素，说明A菌落中导入的是P0质粒；B菌落抗氨苄青霉素而不抗四环素，说明B菌落中导入的是重组质粒；C菌落既不抗氨苄青霉素，也不抗四环素，说明C菌落中没有导入质粒。(4)由于处理后的P0质粒的两个末端都含一个胸腺嘧啶脱氧核苷酸，而目的基因片段的两端各自带一个腺嘌呤脱氧核苷酸，所以目的基因在和P0质粒连接时可能会出现两种情况：正向连接和反向连接。分析图2可知，理论上可以选择的引物
9、组合有甲和丙、乙和丙两种情况。如果选择甲和丙这对引物，则无论目的基因是否正确插入，扩增的片段都是50 bp300 bp100 bp450 bp，不符合要求；如果选择乙和丙这对引物，正向连接和反向连接后所得结果不同，所以应选择乙和丙这对引物进行PCR鉴定。如果目的基因和P0质粒反向连接，则引物乙会出现在重组质粒的外侧，此时若加入引物甲和乙，则可以扩增出300 bp100 bp400 bp的片段。答案：(1)平(2)胸腺嘧啶(T)DNA连接(3)BA类菌落含有P0C类菌落未转入质粒(4)乙、丙目的基因反向连接考点一 目的基因的获取1.2019辽宁鞍山一中高二期中下列关于基因文库的说法中，错误的是(
10、)A某果蝇X染色体上的所有基因组成的文库是部分基因文库B基因组文库中只有部分基因可以在物种间进行交流C将某种生物体内的DNA全部提取出来即获得了该生物的基因组文库D一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库只有一种解析：某果蝇X染色体上的所有基因只是果蝇全部基因的一部分，所以组成的文库是部分基因文库，故A正确；基因组文库的部分基因(特别是不能表达形成mRNA的非酶切部分)很难通过某种方法从基因组文库中分离出来，从而影响了它们在物种间交流的可能性，因此基因组文库中只有部分基因可以在物种间进行交流，故B正确；将某种生物体内的DNA全部提取出来，用限制酶切割DNA成一定大小范围的DNA，用于构
11、建基因组文库，故C错误；一种生物的mRNA有很多种，所以cDNA文库可以有许多种，但基因组文库只有一种。答案：C考点二 基因表达载体的构建2.2019北京四中高二期中下列一般不作为基因工程中运载体上的标记基因的是()A抗性基因B发光基因C产物具有颜色反应的基因 D贮藏蛋白的基因解析：抗性基因可作为基因工程的标记基因，以利于筛选重组DNA，A正确；发光基因如绿色荧光蛋白基因也可以用作基因工程的标记基因，B正确；产物具有颜色反应的基因可作为标记基因，根据颜色反应与否筛选重组DNA，C正确；贮藏蛋白的基因不能用于筛选重组DNA，不能作为标记基因，D错误。答案：D32019安徽高二月考如图为基因表达载
12、体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是()A氨苄青霉素抗性基因 B启动子C限制酶 DDNA连接酶解析：基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成。图中有终止子、标记基因(抗生素基因)、目的基因(插入基因)、复制原点等，还缺少启动子，所以X最可能是启动子。答案：B42019福建高二期中基因表达载体的构建所需的条件有()同一种限制酶具有某些标记基因的质粒RNA聚合酶目的基因DNA连接酶启动子终止子A BC D解析：构建基因表达载体时，需要用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，正确；运载体要具有某些标记基因，以便于筛选含有重组DNA分子的受体细胞，正确；RN
13、A聚合酶能催化转录过程，而基因表达载体的构建过程不需要RNA聚合酶，错误；基因表达载体的组成中包括目的基因，正确；构建基因表达载体时，需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子，正确；基因表达载体的组成中包括启动子和终止子，、正确。答案：B考点三 将目的基因导入受体细胞5.2019河北高二期末将目的基因导入动物细胞最常用的方法是()A农杆菌转化法 B基因枪法C显微注射法 D花粉管通道法解析：农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的常用方法，A错误；基因枪法是将目的基因导入植物细胞的方法之一，但不是最常用的，B错误；将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射法，C正确；花粉管通道
14、法是将目的基因导入植物细胞的方法之一，但不是最常用的，D错误。答案：C62019延安市宝塔区第四中学高二期末将目的基因导入植物细胞的方法不包括()A农杆菌转化法 B显微注射法C花粉管通道法 D基因枪法解析：将目的基因导入植物细胞的方法包括农杆菌转化法、花粉管通道法和基因枪法，显微注射法是将目的基因导入动物细胞的方法。答案：B72019山西太原五中高二月考基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，其原因不包括()A多为单细胞，结构简单，操作方便B繁殖速度快C遗传物质含量少，易操作D性状稳定，变异少解析：原核生物多为单细胞，其结构简单，一般采用Ca2处理法，A正确；原核生物繁殖快，可
15、很快获得大量的转基因物质，B正确；原核生物的遗传物质相对较少，可减少对目的基因的干扰，C正确；真核生物的性状比细菌等原核细胞稳定，变异少，D错误。答案：D考点四 目的基因的检测与鉴定8.2019河北高二期末下列目的基因的检测与鉴定方法，是从个体水平上进行的是()ADNADNA分子杂交技术BDNARNA分子杂交技术C抗原抗体杂交技术D抗虫接种实验解析：DNADNA与DNARNA分子杂交技术都是在分子水平上进行的检测，A、B错误；抗原抗体杂交技术是在分子水平上的检测，C错误；抗虫接种实验属于个体水平上的检测，D正确。答案：D92019北京高二期末下列关于核酸分子杂交的叙述，错误的是()A核酸分子杂
16、交遵循碱基互补配对原则B核酸分子杂交可检测目的基因是否存在C核酸分子杂交可检测是否进行翻译D核酸分子杂交可检测目的基因是否发生突变解析：核酸分子杂交指互补的核苷酸序列通过碱基互补配对形成稳定的杂合双链DNA或RNA分子，A正确；核酸分子杂交可以根据所使用探针的已知序列进行特异性的靶序列(DNA序列或RNA序列)检测，B正确；翻译的产物是多肽或蛋白质分子，C错误；由于杂交过程具有高度特异性，可检测出基因是否发生突变，D正确。答案：C基础达标一、选择题(每小题5分，共60分)12019沙雅县第二中学高二期中基因工程的正确操作步骤是()使目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞检测目的基因的表达是
17、否符合特定性状要求提取目的基因A BC D解析：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：第一步：目的基因的获取，即提取目的基因；第二步：基因表达载体的构建，即使目的基因与运载体结合；第三步：将目的基因导入受体细胞，即将目的基因导入受体细胞；第四步：目的基因的检测与表达，即检测目的基因的表达是否符合特定性状要求。答案：C2下列过程中没有涉及碱基互补配对原则的是()A提取目的基因B目的基因与运载体结合C将目的基因导入受体细胞D目的基因的表达和检测解析：提取目的基因时，PCR扩增和人工合成目的基因等技术均涉及碱基互补配对；目的基因和运载体结合时，黏性末端的碱基可互补配对；目的基因表达过程的转录和翻译涉及
18、碱基互补配对；目的基因导入受体细胞不涉及碱基互补配对原则。答案：C32019吉林高二期中DNA探针能检测到标本上的()A遗传密码 B细胞结构C蛋白质的氨基酸序列 D遗传信息解析：遗传密码在mRNA上，A错误；DNA探针只能进行分子水平上的检测，不能检测细胞结构，B错误；DNA探针能检测核苷酸序列，但不能检测蛋白质的氨基酸序列，C错误；DNA探针可以检测目标核苷酸序列是否存在，即检测遗传信息，D正确。答案：D42019陕西渭南市尚德中学高二期中在基因工程的操作过程中，构建重组质粒不需要()DNA连接酶同一种限制酶DNA聚合酶具有标记基因的质粒目的基因4种核糖核苷酸A BC D解析：DNA连接酶可
19、将具有相同黏性末端的目的基因和运载体连接起来，正确；同一种限制酶切割目的基因与载体，可形成相同的黏性末端，正确；DNA复制过程中需要DNA聚合酶，但是在基因工程中不需要，错误；具有标记基因的质粒作为载体，以便进行目的基因的检测，正确；基因表达载体中含有目的基因、启动子、终止子和标记基因，正确；合成目的基因时需要4种脱氧核苷酸，而基因表达载体的构建不需要，错误。因此，在基因工程的操作过程中，构建重组质粒不需要。答案：A52019黑龙江牡丹江一中高二期中动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是()A受精卵体积较大，便于DNA导入操作B受精卵细胞能使目的基因高效表达C受精卵基因组更易接受DN
20、A的插入D受精卵可发育成动物个体解析：动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是动物体细胞的全能性受到限制，不能表现出来，而受精卵的全能性最高，可以发育成完整的动物个体，所以D选项正确。答案：D62019河南南阳中学高二期中如图为基因表达载体的模式图，下列有关基因工程的说法，错误的是()A基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C图中启动子和终止子不同于起始密码子和终止密码子D抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因解析：基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，A正确；不同基因表达载体的构建过程不一定相同，B错误；
21、启动子和终止子均是DNA片段，起始密码和终止密码是碱基序列，且位于RNA上，C正确；抗生素抗性基因可作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。答案：B72019安徽师范大学附属中学高二期中基因文库的构建是基因工程操作中不可缺少的环节，下列关于基因文库的说法，错误的是()A某种生物的基因组文库比cDNA文库容量大BcDNA文库中含有基因中的启动子，而基因组文库中没有C真核生物基因组文库中含有内含子，而cDNA文库没有DcDNA文库中的基因一般均可在物种间交流，而基因组文库中的基因只有部分可以解析：某种生物的基因组文库(含有全部基因)比cDNA文库(含部分基因)容量大，A正确；c
22、DNA文库中不含有基因中的启动子，基因组文库中含有启动子，B错误；真核生物基因组文库中含有内含子，而cDNA文库没有，C正确；cDNA文库中的基因一般均可在物种间交流，而基因组文库中的基因只有部分可以，D正确。答案：B82019安徽合肥一中高二期中下图中表示一项重要生物技术的关键步骤，字母X最可能代表()A不能合成胰岛素的细菌细胞B能合成抗体的细菌细胞C能合成胰岛素的细菌细胞D不能合成抗生素的细菌细胞解析：人的胰岛素基因导入细菌细胞后，需通过目的基因的检测和鉴定才能确定目的基因是否表达，因此该细菌可能合成胰岛素，A错误、C正确；细菌细胞无内质网、高尔基体不能合成抗体，B错误；有的细菌细胞能合成
23、抗生素，D错误。答案：C92019河北高二月考下列受体细胞与导入方法的匹配，正确的是()A棉花细胞花粉管通道法B羊受精卵基因枪法C大肠杆菌农杆菌转化法D农杆菌农杆菌转化法解析：将目的基因导入棉花细胞内常用花粉管通道法，A正确；显微注射技术是将目的基因导入动物细胞最有效的方法，B错误；Ca2处理法能使大肠杆菌、农杆菌细胞的生理状态发生改变，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，故将目的基因导入大肠杆菌，应采用感受态细胞法(Ca2处理法)，C错误，D错误。答案：A102019安徽合肥高升学校高二月考在基因表达载体的构建中，下列说法中，不正确的是()一个基因表达载体的组成只包括目的基因、启动
24、子、终止子有了启动子才能驱动基因转录出mRNA终止子的作用是使转录在所需要的地方停止所有基因表达载体的构建是完全相同的必须在细胞内进行A BC D解析：基因表达载体的构建是基因工程的核心内容，一个表达载体的组成，除了目的基因外，还有启动子、终止子和标记基因等，错误；启动子在基因的首端，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始，正确；终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束，正确；由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的，错误；基因表达载体的构建必须在细胞外进行，错误。正确，错误。答案：B112019江苏高二期末下列关于
25、基因工程操作程序的叙述，正确的是()A将目的基因导入受体细胞是基因工程的核心步骤B检测目的基因是否翻译的原理是DNA分子杂交技术C从cDNA文库中获取的DNA来源于mRNA的反转录DPCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上解析：基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，A错误；检测目的基因是否翻译应用的是抗原抗体杂交方法，B错误；cDNA文库建立的过程是指某生物某一发育时期所转录的mRNA全部经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接后储存在受体菌群中，C正确；利用PCR技术扩增的目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，D错误。答案：C122019福建厦门外国语学校高二月考
26、研究人员将鱼的抗冻基因导入番茄体内，获得了抗冻能力明显提高的番茄新品种。下列操作合理的是()A设计相应DNA单链片段作为引物，利用PCR技术扩增目的基因B利用限制性核酸内切酶和DNA聚合酶构建基因表达载体C将基因表达载体导入番茄体细胞之前需用Ca2处理细胞D运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达解析：提取目的基因可以用PCR技术进行目的基因的扩增，以一段已知目的基因的核苷酸序列为模板，设计相应DNA单链片段作为引物，可以在短时间内获得大量的目的基因，A正确；构建基因表达载体时要利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶，B错误；将基因表达载体导入番茄体细胞常用的方法是农杆菌转化法，不用
27、Ca2处理细胞，C错误；检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达可用抗原抗体杂交的方法，D错误。答案：A二、非选择题(40分)13(12分)科学家将大麦细胞中的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌可产生相应蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒，其基本的操作过程如图所示。请据图回答下列问题：(1)图中所示技术定向改变了酵母菌的性状，所利用的原理是_。(2)本操作中为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内，所用的运载体是_。(3)图中a、b过程使用到的酶分别是_。(4)将LTP1基因导入酵母菌细胞并成功表达，这里“成功表达”的含义是_。解析：(1)基因工程实现了不同种生物基因的重新组合，依据的原理是基因重组。(
28、2)大肠杆菌细胞中的质粒是小型环状DNA分子，适于作为运载体。分析题图可知，将目的基因导入酵母菌细胞使用的运载体是质粒。(3)a过程中，用限制性核酸内切酶对含目的基因的DNA片段进行切割；b过程构建重组质粒需用DNA连接酶连接目的基因和运载体。(4)将LTP1基因导入酵母菌细胞并成功表达，这里“成功表达”的含义是LTP1基因在酵母菌细胞中通过转录和翻译控制合成相应蛋白质。答案：(1)基因重组(2)质粒(3)限制性核酸内切酶、DNA连接酶(4)啤酒酵母菌可产生相应蛋白14(15分)2019乌鲁木齐市第四中学高二期末有关科学家将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达
29、，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株抗虫棉。其过程大致如下图所示：(1)基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心步骤是_。(2)获取Bt毒蛋白基因的方法一般有_等(最少写出2种)。(3)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有TDNA，把目的基因插入Ti质粒的TDNA中是利用了TDNA的_特点。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为_。(4)将目的基因导入受体细胞的方法很多，在本题中涉及到的方法是_。解析：(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其核心是基因表达载体的构建。(2)
30、Bt毒蛋白基因属于目的基因，获取目的基因的方法一般有：从基因文库中提取、利用PCR技术扩增、人工合成等。(3)农杆菌中的Ti质粒上的TDNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA分子上。在培育转基因植物时，利用Ti质粒上的TDNA的这一特点，可将目的基因转移到受体细胞染色体DNA上。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为转化。(4)由图可知：在该题中将目的基因导入受体细胞，采用的方法是农杆菌转化法。答案：(1)基因表达载体的构建(2)从基因文库中提取、PCR扩增、人工合成(3)可转移到受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA分子上转化(4)农杆菌转化法15(
31、13分)2019东台市创新学校高二月考根据下列所给材料回答问题：材料一把人的胰岛素基因拼接到大肠杆菌的质粒上，然后导入大肠杆菌体内，产生出人的胰岛素。材料二有人把蜘蛛产生丝腺蛋白的基因转入羊的细胞中，在羊分泌的乳汁中加入某种物质后，可抽出细丝，这种细丝可望用作手术的缝合线。(1)上述生物新品种的产生运用了_技术。(2)一种生物的基因可在另一种生物体内表达，而不影响其他基因的表达，这说明基因是有_效应的_片段，且具有一定的独立性；同时可以说明各种生物共用一套_。(3)上述技术所用的工具酶有_、_。(4)材料二中所用缝合线的化学本质是_，与普通缝合线相比，其优点是_。解析：(1)把人的胰岛素基因(目的基因)拼接到大肠杆菌的质粒上(运载体)，然后导入大肠杆菌内(受体细胞)，产生出人的胰岛素，运用了基因工程技术。(2)一种生物的基因在另一种生物体内表达，而不影响其他基因的表达，这说明基因是有遗传效应的DNA片段，具有一定的独立性；同时可以说明各种生物共用一套遗传密码子。(3)在基因工程中，所用的工具酶有限制酶和DNA连接酶，此外还需要运载体。(4)材料二中所用缝合线是蜘蛛丝腺蛋白，其本质是蛋白质，与普通缝合线相比其优点是在体内易被分解，不需要人工拆线。答案：(1)基因工程(2)遗传DNA遗传密码(3)限制酶DNA连接酶(4)蛋白质不需拆线，可被人体吸收
