1、时间：45分钟满分：100分基础组(共70分，除标注外，每小题5分)12016衡水二中一轮检测随着科技的发展，微生物在生产活动中得到了广泛应用。下列关于微生物培养的叙述，正确的是()A青霉素就是抗生素，在青霉菌的培养过程中不用严格灭菌B培养基中加入的琼脂可以作为微生物的碳源C为了避免污染，在微生物培养过程中，操作人员的手必须经过严格灭菌D在菌种选育过程中可以利用人工诱变等手段答案D解析青霉素虽然是一种抗生素，但并不能消灭所有微生物，所以在青霉菌的培养过程中仍需要消灭杂菌；培养基中加入的琼脂是凝固剂，可使培养基呈固态；在微生物的培养过程中，必须注意消毒和灭菌，灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所
2、有的微生物，因此操作人员的手不能进行灭菌，只能进行消毒，即用较为温和的理化方法杀死物体表面或内部的部分微生物。22016武邑中学预测下列有关果酒、果醋的制作和腐乳制作的说法，不正确的是()A腐乳制作有多种微生物的参与，其中起主要作用的是根霉B果酒制作时的菌种属于真核生物，而果醋制作时的菌种属于原核生物C果酒制作时需要密封发酵，果醋制作时需要不断通入无菌空气D果醋制作时需要的温度比果酒制作时需要的温度高答案A解析腐乳制作中，起主要作用的是毛霉，而不是根霉，A项错误；果酒制作时的酵母菌是真核生物，果醋制作时的醋酸菌是原核生物，B项正确；酵母菌需要密封发酵进行无氧呼吸产生酒精，醋酸菌进行有氧呼吸产生
3、醋酸，C项正确；果醋发酵时需要3035 ，果酒发酵时需要1825 ，D项正确。32016冀州中学模拟下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是()A微生物培养前，需对培养基进行消毒B测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源答案A解析理解微生物分离、培养的原理和计数方法是解题关键。微生物培养前，需对培养基进行灭菌处理，要将所有的微生物杀死；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；土壤中各类微生物的数量是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行
4、分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。42016枣强中学预测可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()A以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B以尿素为唯一氮源的培养基中加二苯胺试剂C以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂答案A解析理解微生物分离的方法是解题关键。细菌合成的脲酶可以催化尿素分解形成氨。氨会使培养基的碱性增强，pH升高。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂会变红，则说明该细菌能产生脲酶分解尿素。52016衡水中学月考苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生
5、的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是()A图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B如果要测定中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C若图中为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一的碳源D使用平板划线法可以在上获得单菌落答案C解析用苯酚作为选择培养基的特殊碳源可以选出目的菌株；测定培养液中细菌数目多用稀释涂布平板法；若为对照实验，则应含除苯酚外的其他碳源，以苯酚作为唯一碳源；使用稀释涂布平板法或平板划线法都可以在上获得单菌落。62016冀州中学月考(15分)回答下列有关泡菜制作的问题：
6、(1)制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是_。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是_。(2)泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行_的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的_中。(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有_、_和_等。(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是_，原因是_。答案(1)杀灭杂菌增加乳酸菌数量(2)无氧呼吸细胞质(3)温度腌制时间食盐用量(4)乳酸菌数量增多，杂菌数量减少乳酸菌比杂菌更为耐酸解析(1)制作泡菜时，所用盐水需煮沸，因为高温能杀灭杂菌。陈泡菜液里含有
7、乳酸菌，加陈泡菜液能增加乳酸菌数量，缩短制作泡菜的时间。(2)乳酸菌是厌氧型的原核生物，无氧呼吸发生在细胞质中。(3)影响亚硝酸盐含量的因素有温度、腌制时间和食盐用量等。(4)乳酸菌比杂菌更为耐酸，所以泡菜液变酸这段时间内，乳酸菌数量增加，杂菌数量减少。72016武邑中学周测(15分)纤维素分解菌可以分解纤维素，从而消除纤维素长期堆积对土壤造成的污染，某生物小组欲从土壤中筛选出能高效降解纤维素的菌株。请回答问题：(1)纤维素分解菌可产生纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，其中能使纤维素分解成纤维二糖的酶有_。(2)欲从土壤中筛选出能高效降解纤维素的菌株，需选择_取样。筛选纤维素分解菌的常用方法是_
8、，当纤维素被分解后，培养基中会出现_。接种过程中，要将土壤样品稀释液接种于以_作为唯一碳源的固体培养基中，从功能来说，该培养基属于_培养基。(3)为了确定筛选出的菌是否为纤维素分解菌，需进行_的实验，一般测定分解纤维素所产生的_进行定量的测定。答案(1)C1酶和CX酶(2)纤维素丰富的环境(或含腐殖质丰富的环境)刚果红染色法以纤维素分解菌为中心的透明圈纤维素选择(3)发酵产纤维素酶葡萄糖解析(1)纤维素分解菌可产生纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，其中能使纤维素分解成纤维二糖的酶是C1酶和CX酶。(2)欲从土壤中筛选出能高效降解纤维素的菌株，需选择纤维素丰富的环境(或含腐殖质丰富的环境)进行取样
9、。筛选纤维素分解菌的常用方法是刚果红染色法，当纤维素被分解后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。接种过程中，要将土壤样品稀释液接种于以纤维素作为唯一碳源的固体培养基，从功能来说，该培养基属于选择培养基。(3)为了确定是否为纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶实验，纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。82016冀州中学期中(15分)微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问
10、题：(1)土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自_的土壤。(2)为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用_培养基。常用的接种方法是_和_。(3)接种后，应密封培养的原因是_，培养一段时间后在培养基上形成_，此时选取_就可获得高效菌株。(4)扩大培养过程中需要对微生物进行_。取0.2 mL样品，用_培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为_个/mL。该统计结果_(填“低于”或“高于”)实际值。答案(1)长期被石油污染(含石油多)(2)选择平板划线法稀释涂布平板法(3)该类微生物是厌氧型降油圈降油圈大的菌落(4)计数固体1000低于解析(1)在
11、长期被石油污染的土壤中生存的微生物，能降解石油，所以土壤取样时，应从含石油多的土壤中采集。(2)从功能上分，应选用特定的选择培养基对该类微生物进行筛选和纯化；常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(3)该类微生物是厌氧型微生物，所以接种后应密封培养；培养一段时间后在培养基上可形成降油圈；降油圈越大，说明该处的微生物降解石油的能力越强，所以应选择降油圈大的菌落进行培养以获得高效菌株。(4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数；需用固体培养基对其培养，以便统计菌落数量；计算微生物的数量应取三个平板的平均值，所以样品中微生物的数量为(200180220)30.21000(个/mL)；因为当
12、两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，即该统计结果低于实际值。能力组(共30分，每题15分)92016衡水中学仿真某班同学用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒，其简要流程如下： (1)实验过程中，该小组同学发现榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是_。(2)分离酵母菌应使用_培养基，固定化酵母细胞常采用_法，若想使这些酵母细胞能反复使用，实验过程中一定要注意_。(3)在酸性条件下，可用_来检测发酵产物中是否有酒精产生。若想进一步检测所得果酒中酵母菌的密度，可采用_法。(4)发酵完成后，该班同学制作的果酒品质非常好，为方便后续年级使用，可将菌液_保存。(
13、5)另一个班的同学用葡萄制作的果酒酒味醇正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，请分析出现酸味的原因_。答案(1)用果胶酶处理(2)选择包埋无菌条件(避免微生物的污染)(3)重铬酸钾稀释涂布平板(4)转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在20 的冷冻箱中(5)密封不严，其他微生物进行有氧呼吸，将果酒转变成果酸解析(1)实验过程中，榨取的果汁浑浊，用果胶酶处理可除掉果胶成分，使浑浊的果汁变得澄清。(2)培养基按功能可分为选择培养基和鉴别培养基，选择培养基是根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，广泛用于菌种筛选等领域；鉴别培养基中加有能与目的菌的无色代谢产物发生
14、显色反应的指示剂，从而用肉眼辨别颜色就能从近似菌落中找出目的菌菌落，所以分离酵母菌应用选择培养基，固定化酵母细胞常采用包埋法，若想使这些酵母细胞能反复使用，实验过程中一定要注意无菌条件(避免微生物的污染)。(3)在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，故可以用重铬酸钾来检测是否有酒精产生。若想进一步检测所得果酒中酵母菌的密度，可采用稀释涂布平板法。(4)发酵完成后，该班同学制作的果酒品质非常好，为方便后续年级使用，可将菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在20 的冷冻箱中保存。(5)果酒保存时，如果密封不严，其他微生物进行有氧呼吸，将果酒转变成果酸，会使果酒带有明显的酸味。102016
15、衡水中学猜题微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关问题：(1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，它称为_，若用该培养基培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。(2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。(3)上图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是AB_(用字母和箭头表示)；找出图乙中两处错误的操作_、_(用字母表示)。(4)某同学用平板划线法接种后的培养基培养12 h后，如果培养基上_，则说明无菌操作基本符合要
16、求。答案(1)倒平板温度(氧气)pH(无菌)(2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(3)G FECDHCD(4)生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点解析(1)题图甲所示的实验操作步骤之一为倒平板，若用该培养基培养大肠杆菌，还要考虑温度、氧气、pH和无菌操作等一系列相关条件。(2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染，因此要设置对照实验，对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生，若有则说明培养基已被污染，应重新配制培养基进行实验。(3)题图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是ABGFECDH；图乙中两处错误的操作是C未在酒精灯火焰旁进行操作，D将第五区域内的划线与第一区相连。(4)接种后的培养基培养12 h后，如果培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明没有杂菌污染，无菌操作基本符合要求。
