1、3.2体外受精和早期胚胎培养理一理判一判1.为了获得更多的卵母细胞，需用性激素对供体进行处理。()2卵母细胞除可从活体卵巢中采集外，还可从已屠宰的雌牛卵巢中获取。()3从体外受精到完成整个胚胎发育都在体外的“试管”中进行，所得到的动物称为“试管动物”。()4采集的卵母细胞都可直接与获能的精子在体外受精。()5受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植。()6早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清。()7采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液中才能形成受精卵。()8可以与获能的精子进行体外受精的卵母细胞需要培养到囊胚期。()悟一悟1.用促性腺激素处理时，只能注射不能饲喂：促性腺激素是肽
2、类化合物，饲喂会因消化道的消化作用而失去原有的效用。2精子获能处理前应离心处理：精液由精子和精清两部分组成。精清中含有一种能抑制精子获能的物质。因此在一般情况下，精液中的精子无法获能。精子获能处理前应进行离心处理，其目的是除去精清以利于精子获能。3试管动物与克隆动物的三个不同(1)起点不同：试管动物是受精卵，克隆动物是经核移植后的重组细胞。(2)遗传来源不同：试管动物来源于双亲，克隆动物主要来源于供核一方。(3)生殖方式不同：试管动物的获得过程为有性生殖，克隆动物的获得过程为无性生殖。感悟体会：练一练1.2017江苏卷下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述，错误的是()A精子在获能液中于37 、
3、5%CO2条件下培养的目的是使精子获能B小鼠在特定光控周期条件下饲养，注射相关激素有促进超数排卵的作用C分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，因此发育成的个体没有形态学差异D注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育解析：精子在获能液中于37 、5% CO2条件下培养，可使精子获能，A正确；给小鼠注射促性腺激素可促进其超数排卵，B正确；分割的胚胎细胞具有相同的遗传物质，但发育过程中基因突变或环境因素影响等，最终发育成的个体可能会有形态学差异，C错误；胚胎干细胞具有发育的全能性，能分化成各种组织器官，D正确。答案：C2江苏卷下面是以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。(1)进行小鼠胚胎工程
4、操作时，首先在光控周期下(光照14 h，黑暗10 h)饲养成年雌鼠，并注射促进性腺激素，目的是_。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是_。再在37 ，5%CO2条件下，精卵共同作用4 h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天后已看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎_期开始的标志。(2)如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞)，处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是_。(3)如果将小鼠甲
5、的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于_。(4)如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因_。解析：(1)对雌鼠进行光控周期饲养并注射促进性腺激素，其目的是促进排卵；从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是使精子获能，因为受精作用进行时，精子要消耗大量能量；卵裂开始后胚胎内部出现裂隙，这是胚胎囊胚期开始的标志。(2)处理后的受精卵由于只有雌核，而细胞松弛素B处理作用类似于用秋水仙素处理植物细胞，所以处理后的受精卵染色
6、体数目将加倍，这种方法在动物新品种选育中的显著优点是容易获得纯合子并缩短育种时间(同植物的单倍体育种)。(3)将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于小鼠甲(体细胞)的核基因和小鼠乙(卵细胞)的细胞质基因。(4)外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因是由于外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达。答案：(1)促进排卵(或超数排卵)使精子获能囊胚(2)容易获得纯合子并缩短育种时间(3)小鼠甲(体细胞)的核基因和小鼠乙(卵细胞)的细胞质基因(4)外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达考点一 体外受精1.下列不属于
7、收集精子的方法的是()A假阴道法B手握法C促性腺激素处理法 D电刺激法解析：精子的收集方法有假阴道法、手握法、电刺激法等，A、B、D均不符合题意；促性腺激素处理可使雌性供体超数排卵，不属于收集精子的方法，C正确。答案：C2体外受精时采集小鼠的卵子常用的方法是()A超数排卵处理法B活体采卵法C从早期胚胎中采集卵母细胞D从屠宰后母畜卵巢中采集卵母细胞解析：小鼠、猪、羊等动物的卵子采集的方法是用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，再从输卵管中冲取卵子，让卵子直接与获能的精子在体外受精，即超数排卵处理法，A正确；大型动物常用活体采卵法或从屠宰后的母畜卵巢中采集卵母细胞，B、D错误；采集卵母细胞的对象为
8、性成熟的雌性个体，而不是早期胚胎，C错误。答案：A32019辽源市田家炳高级中学高二期末精子获能的常用化学物质可能是下列哪一种()A氯化钙溶液 B肝脏提取液C肝素溶液 D氨基酸营养液解析：精子体外获能的方法有培养法和化学诱导法两种。化学诱导法即将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，使用化学药物诱导精子获能。答案：C42019甘肃高二期中下列不属于体外受精主要步骤的是()A卵母细胞的采集 B卵细胞的采集C精子的获能 D受精解析：体外受精的过程主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能及受精。具有受精能力的是M中期的卵母细胞，不是成熟的卵细胞。答案：B52019山东高二月考下
9、列关于采集卵子以及受精的说法，正确的是()用促性腺激素处理牛等大型动物后，从输卵管中冲取卵子精子入卵后，被激活的卵子完成减数第二次分裂受精卵形成后，在输卵管内完成胚胎发育从屠宰动物卵巢采集的卵母细胞，需要在体外人工培养成熟A BC D解析：对大型动物是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，或从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞，故错误；精子入卵后，被激活的卵子完成减数第二次分裂，故正确；受精卵发育成幼体的场所有输卵管和子宫，故错误；从屠宰动物的卵巢中采集的卵母细胞，需要在体外培养到减数第二次分裂中期，故正确。答案：D6哺乳动物体外受精过程的正确顺序是()采卵收集精子卵母细胞
10、的人工培养精子获能处理精子和成熟卵子在受精液中共同培养精子用CaCl2处理卵母细胞用一定浓度肝素溶液处理体外受精受精卵培养解析：哺乳动物体外受精主要包括卵母细胞的采集，精子的获取和受精等主要步骤。答案：B7下列关于体外受精技术的说法中，错误的是()A体外受精技术需要的温度大约为37 B体外受精技术已成为一项常规的动物繁殖生物技术C体外受精是从初级卵母细胞和初级精母细胞开始的D体外受精技术可用于研究动物生殖细胞的发生机制解析：体外受精技术是模拟自然受精过程，因此体外受精技术需要的温度大约为37 ，A项正确；体外受精技术已是一项比较成熟的技术，已成为一项常规的动物繁殖生物技术，B项正确；进行体外授
11、精时，获得的精子需进行获能处理，卵子应培养到减数第二次分裂中期，C项错误；通过体外受精技术，可研究生殖细胞参与受精的条件，研究动物生殖细胞的发生机制，D项正确。答案：C82019海南省白沙中学高二期中采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。关于其原因，下列说法不正确的是()A卵子从输卵管中冲出也要经历类似精子获能的过程B动物排出的卵子成熟程度不同C卵子在体外人工培养至减数第二次分裂中期时才成熟D冲出的卵子还需要培养一段时间才能由小变大解析：冲出的卵子还不成熟，只有培养至减数第二次分裂中期时，才具有与精子受精的能力。在此之前，也要经历类似精子获能的处理过程，A正确；动物
12、排出的卵子成熟程度不同，都要在输卵管进一步成熟，B正确；体外人工培养至减数第二次分裂中期时，才算成熟，可以与获能的精子受精，C正确；获取的卵子有的还不成熟，还需要培养一段时间，但体积大小变化不大，D错误。答案：D考点二 胚胎的早期培养9.2019吉林高一期末体外培养早期胚胎的过程中，下列哪一项条件是不需要的()A消毒灭菌B适宜的温度C充足的光照D适宜的养料和激素解析：体外培养早期胚胎必须在无菌条件下进行；在细胞的分裂和分化过程中，需要适宜的温度、适宜的养料和激素等，但不需要光照。综上所述，A、B、D均错误，C正确。答案：C102019安徽屯溪一中高三月考胚胎的早期培养需要用液体培养基，此培养液
13、的成分是()A水、无机盐、维生素、激素、有机盐、氨基酸、核苷酸、血清等B蔗糖、水、无机盐、激素、维生素等C水、无机盐、蔗糖、氨基酸、核苷酸、动物血清等D水、无机盐、维生素、有机盐、淀粉等解析：哺乳动物胚胎的培养液成分一般都比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质，因此，A项正确，B、C、D项错误。答案：A基础达标一、选择题(每小题5分，共60分)12019石嘴山市第三中学高三月考下列属于哺乳动物体外受精操作步骤的是()卵母细胞的采集精子的获取精子的变形受精A BC D解析：哺乳动物体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养，精子的采集和获
14、能，受精。答案：A22019汉川市第二中学高二期末下列关于受精作用和早期胚胎的说法，正确的是()A体外受精和体内受精都需要获能B卵母细胞在受精时已完成减数分裂C精子的头部主要是高尔基体形成的顶体D原肠胚的内细胞团属于全能细胞解析：不管体内受精还是体外受精，都需要获能，故A正确；与精子结合的是次级卵母细胞，故B错误；精子的头部主要是细胞核，故C错误；原肠胚的内细胞团属于囊胚期已经分化的细胞，因此，不属于全能细胞，而卵裂期和桑椹胚时期只进行细胞分裂，不需从外界获取营养物质，这两个时期的细胞属于全能细胞，故D错误；综上所述，选A项。答案：A32019辽宁鞍山一中高二期中下列有关体外受精技术的说法，错
15、误的是()A解决了胚胎移植中，胚胎生产成本高等关键问题，为胚胎工程提供了实验的原材料B对于牛精子的获能，可将其放入CaCl2溶液中利用化学药物诱导获能C收集野生或经济动物精子的方法多用电刺激法D精子和卵子一般要放在培养液小滴中共同培养一段时间才能完成受精解析：体外受精解决了自然生育率低，以及胚胎移植中胚胎生产成本高等关键问题，为胚胎工程提供了实验的原材料，故A正确；对于牛、羊等家畜的精子常采用化学诱导法，即将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，诱导获能，故B错误；收集野生或经济动物精子的方法多用电刺激法，故C正确；精子和卵子一般要放在培养液小滴中共同培养一段时间才能完成受精，
16、故D正确。答案：B4下列关于牛体外受精及胚胎工厂化生产的叙述中，正确的是()A将采集的卵母细胞立即与精子在获能培养液中共同培养即可受精B精子和卵细胞结合形成受精卵后应立即移入受体母牛子宫C用性激素处理，可使其排出更多的卵子D早期胚胎的培养通常需要在培养液中加入血清解析：采集的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才能与获能的精子受精，A错误；精子和卵细胞结合形成受精卵后需要培养成早期胚胎才能移入受体母牛子宫，B错误；用促性腺激素处理，可使其排出更多的卵子，C错误；早期胚胎的培养通常需要在培养液中加入血清，D正确。答案：D52019天津静海一中高三月考下列关于胚胎工程的叙述，错误的是()A精子获能
17、方法有培养法和化学诱导法B防止多精入卵受精的两道屏障有透明带反应和顶体反应C精卵发生过程中包含有丝分裂D卵子只有到了减数第二次分裂中期才能受精解析：精子获能处理的方法有培养法和化学诱导法两种，A正确；防止多精入卵受精的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜封闭作用，B错误；精子和卵子的发生过程中性原细胞都进行了有丝分裂和减数分裂，C正确；卵子只有到了减数第二次分裂中期才能与获能的精子完成受精，D正确。答案：B6体外受精和早期胚胎培养均用到培养液，下列生理过程所用培养液不正确的是()A精子获能，用肝素获能溶液B受精作用，用获能溶液或专用的受精溶液C胚胎的早期培养，用发育培养液D卵母细胞成熟培养，用钙离子
18、载体A23187溶液解析：通常采用的精子体外获能的方法有培养法和化学诱导法两种，前者是将取自附睾的精子在人工配制的获能液中培养，后者是将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导精子获能，A正确；体外受精，可以让获能的精子和培养成熟的卵子在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程，B正确；体外受精完成后，还需将受精卵移入发育培养液中继续培养，使其发育到早期胚胎的适宜阶段，C正确；钙离子载体A23187溶液是诱导精子的获能溶液，D错误。答案：D7下列关于牛体外受精胚胎的工厂化生产的叙述，正确的是()A精子和卵子受精形成受精卵后可移入母牛子宫B采集的卵母细胞应立即与精子共同
19、放入培养液才能形成受精卵C成熟卵子与获能的精子相遇形成的受精卵，需培养到一定阶段才可移植D体外受精胚胎的工厂化生产即胚胎发育和受精过程只需在体外进行解析：精子和卵子受精形成受精卵后，需要经过早期胚胎培养至桑椹胚或囊胚阶段，才可移入母牛子宫，A错误；采集的卵母细胞需经成熟培养后与获能的精子共同放入培养液才能形成受精卵，B错误；成熟卵子与获能的精子相遇形成的受精卵，需培养到一定阶段才可移植，C正确；体外受精胚胎的工厂化生产需经过体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植等过程才能实现，D错误。答案：C82019周口市中英文学校高二期末哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下
20、才能完成。下面为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图(n表示染色体组)。据图分析，下列叙述错误的是()A次级卵母细胞形成的过程需要激素调节B细胞只有在精子的作用下才能形成成熟卵子C、和细胞分裂后期染色体数目相同D培育转基因动物应选择细胞作为受体细胞解析：据图可知，减数第一次分裂完成需要促性腺激素处理，A正确；图中看出次级卵母细胞在精子的作用下才能完成减数第二次分裂，产生成熟的卵细胞，从而形成受精卵，B正确；初级卵母细胞和次级卵母细胞分裂后期细胞中染色体与体细胞相同，而是受精卵，进行有丝分裂，因此有丝分裂后期细胞中染色体的数目是体细胞的二倍，C错误；动物基因工程中，利用动物的受精卵作为受体细
21、胞，因为该细胞具有全能性，D正确。答案：C9下列关于体外受精技术的说法中，错误的是()A进行体外受精技术前需对精子进行获能处理B体外受精是从初级卵母细胞和初级精母细胞开始的C体外受精技术已成为一项常规的动物繁殖生物技术D体外受精技术可用于研究动物生殖细胞的发生机制解析：精子与卵子在体外受精前，需要对采集的精子进行获能处理，A正确；体外受精时，采集的卵母细胞需发育至减数第二次分裂中期才具有受精能力，即体外受精是从发育到减数第二次分裂中期的次级卵母细胞开始的，B错误；体外受精技术已成为一项常规的动物繁殖生物技术，可用于研究动物生殖细胞的发生机制，C、D正确。答案：B10我国首例“虎狮兽”于2002
22、年在南京红山动物园诞生，它是利用雄虎的精子和雌狮的卵子体外受精产生的，完成这一过程需要解决的问题，合理的是()A精子在体外用获能物质处理B用化学物质处理掉卵细胞膜，便于精子进入C抽取精子、卵子的细胞核进行融合D精子入卵后进行人工处理，防止多精入卵解析：“虎狮兽”是利用雄虎的精子和雌狮的卵子体外受精产生的，完成这一过程需要解决的问题是精子在体外用获能物质处理，使其具备受精能力，A正确；用化学物质处理掉卵细胞膜，卵细胞的结构遭到破坏，不能完成受精，B错误；不能人为地抽取精子、卵子的细胞核进行融合，C错误；精子入卵后就会发生卵细胞膜的封闭作用，以防止多精入卵，不需进行人工处理，D错误。答案：A11采
23、集的卵母细胞，一般要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，关于其原因，下列说法不正确的是()A动物排出的卵子成熟度不同B卵子也要经过类似精子的获能过程C体外培养的卵母细胞体积增大D体外培养至减数分裂第二次分裂中期才算成熟解析：动物排出的卵子成熟度不同，有的可能是初级卵母细胞，有的可能是次级卵母细胞，A正确；卵子也要经过类似精子的获能过程，即培养到减数第二次分裂中期才算成熟，B、D正确；体外培养的卵母细胞逐渐成熟，而不是体积增大，C错误。答案：C122019舒兰市第一高级中学校高二期末下列关于动物早期胚胎培养的叙述，错误的是()A早期胚胎培养的培养液成分通常含有血清B培养液的成分中需添加
24、维生素、生长素、氨基酸等C动物因种类不同，进行胚胎移植时早期胚胎所处阶段不同D动物早期胚胎培养需保证适宜的湿度和pH解析：动物细胞培养和早期胚胎培养的培养液成分通常含有血清，A正确；早期胚胎培养的培养液成分中需添加维生素、生长激素、氨基酸等，而生长素属于植物激素，B错误；动物因种类不同，进行胚胎移植时早期胚胎所处阶段不同，有的在桑椹胚，有的在囊胚，C正确；动物早期胚胎培养需保证适宜的湿度和pH，D正确。答案：B二、非选择题(40分)13(12分)2018年1月25日，由中科院神经科学研究所团队克隆的猕猴“中中”和“华华”，登上了全球顶尖学术期刊细胞的封面，该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆
25、猴作为实验动物模型的新时代。回答下列问題：(1)正常情况下，哺乳动物的受精过程主要包括：_，进入卵细胞膜，原核形成和融合。(2)哺乳动物的体外受精主要包括_、_等几个主要步骤。(3)在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有培养法和_。(4)在使用合成培养基培养早期胚胎时，通常还需加入_等天然物质，并需要适时_，以清除代谢产物，防止代谢产物积累对早期胚胎造成危害。解析：(1)获能后的精子与卵子相遇后，首先发生顶体反应，依靠顶体内的酶先溶解卵丘细胞间的物质，使精子穿越放射冠，然后将透明带溶出一条孔道，使精子穿越透明带，进入卵细胞膜。(2)进行哺乳动物的体外受精，首先需要采集卵母
26、细胞，并培养至减数第二次分裂中期；采集精子，并进行获能处理，然后进行体外受精。(3)对精子进行获能处理的方法有培养法和化学诱导法两种。对于啮齿动物、家兔和猪等动物的精子，一般采用培养法；对牛、羊等家畜的精子常采用化学诱导法。(4)动物细胞培养时，除加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素外，通常还需加入动物血清等天然物质，以满足早期胚胎发育的需要。适时更换培养液，可以清除代谢产物，防止代谢产物积累对早期胚胎造成危害。答案：(1)精子穿越放射冠和透明带(2)卵母细胞的采集精子的获取和受精(3)化学诱导法(4)血清(或血浆)更换培养液14(12分)我国全面二孩政策已于2016年1月1日起正式实
27、施。十二年前，33岁的产妇朱女士利用试管婴儿技术，成功生下一个男孩。2016年3月，朱女士决定生育第二个孩子，医院找到当年为她冷冻的“胚胎”，经过检胎等程序，朱女士已成功怀孕12周。冷冻12年后复苏、植入，该“冻龄”宝宝将有望成为国内最“老”的宝宝。有意思的是，这个沉睡了12年的“冰宝宝”，跟自己11岁的亲哥哥其实是“同龄”。请回答以下相关问题：(1)由于女性的自然周期产生的卵子太少，在取卵前通常需要注射_激素，促使一次有更多的卵泡发育。试管婴儿技术采用了体外受精等技术，精子顶体内含有的_能协助精子穿过卵细胞的_最终进入卵细胞内完成受精作用。(2)随着胚胎的进一步发育，胚胎的内部会出现含有液体
28、的囊腔囊胚腔，这个时期的胚胎叫做囊胚。囊胚进一步扩大，会导致透明带的破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做_。(3)胚胎的早期培养与动物细胞培养一样，都需要满足_及营养等条件。解析：(1)给女性注射促性腺激素可促使其一次有更多的卵泡发育；顶体内含有的顶体酶能协助精子穿过卵细胞的放射冠和透明带，最终进入卵细胞内完成受精作用。(2)随着胚胎的进一步发育，胚胎的内部会出现含有液体的囊腔囊胚腔，这个时期的胚胎叫做囊胚。囊胚进一步扩大，会导致透明带的破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化。(3)胚胎的早期培养与动物细胞培养一样，都需要满足无菌无毒的环境、温度和pH、气体环境及营养等条件。答案：(1)
29、促性腺顶体酶放射冠和透明带(2)孵化(3)无菌无毒的环境、温度和pH、气体环境15(16分)2019江苏省如东高级中学高二期末亚麻酸(ALA)能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答：卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在39 、5%CO2的培养箱中培养2224 h。卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表1。体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微
30、镜观察判断是否完成受精。早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养4448 h后检查分裂情况，每隔48 h更换一次培养液，第59天观察囊胚发育情况，统计结果如表2。表1亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响ALA浓度/molL1卵母细胞数核成熟卵子数02291371020113350227166100215137200215135表2亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响ALA浓度/molL1培养卵数分裂数囊胚数030917175103251828250292185971003101888420023114568(1)步骤中，细胞培养箱中加5%CO2的作用是_。(2)步骤中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征
31、是_。步骤中，判断是否受精的依据是_。(3)步骤中，受精卵经过_(时期)发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是_。(4)根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200molL1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起_作用。(5)本实验结果表明，_的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利，其判断依据是_。解析：(1)步骤是动物细胞培养的过程，细胞培养箱中加5%CO2的作用是维持培养液pH的相对稳定。(2)成熟的卵母细胞是培养到减数第二次分裂中期的细胞，减数第二次分裂中期的特征是染色体的着丝点排列在赤道板上；步骤中判断是否受精的依据是在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到两个极体。(3)受精卵经过卵
32、裂期、桑椹胚发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是清除有害代谢产物，补充营养物质。(4)从表中数据可以看出，表格1和2中亚麻酸溶液为0molL1的一组为对照组，与其相比，亚麻酸溶液为200molL1时，核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高，因此可知200molL1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起促进作用。(5)根据表中数据，当核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高时所对应的亚麻酸的浓度为50molL1，此浓度对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利。答案：(1)维持培养液pH的相对稳定(2)染色体的着丝点排列在赤道板上在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到两个极体(3)卵裂期、桑椹胚清除有害代谢产物，补充营养物质(4)促进(5)50molL1核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高