1、山东省17级阶段检测联合考试生物一、选择题1.下列关于限制酶的叙述，正确的是（ ）A. 只有原核细胞中才有限制酶B. 限制酶能识别特定的核苷酸序列C. 限制酶识别的序列都由6个核苷酸组成D. 限制酶切割DNA分子产生的都是黏性末端【答案】B【解析】【分析】DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体.其中限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性未端和平末端两种【详解】A、限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，A错误；B、限制酶具有特异性，能识别特定的核苷酸
2、序列，B正确；C、不同限制酶识别的序列不同，并不都由6个核苷酸组成，C错误；D、不同的限制酶既可能产生黏性未端，也可能产生平末端，D错误。故选B。2.下列关于DNA连接酶的叙述，不正确的是（ ）A. 制备重组DNA需要DNA连接酶B. DNA连接酶按来源可分为EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶C. T4DNA连接酶可连接双链DNA片段间的磷酸和核糖D. EcoliDNA连接酶只能连接具有黏性末端的双链DNA片段【答案】C【解析】【分析】“分子缝合针”DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（EcoliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：相同点：都缝合磷酸二酯键。区别：EcoliDNA连接
3、酶来源大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。【详解】A、制备重组DNA需要将运载体与目的基因连接，要用到DNA连接酶，A正确；B、DNA连接酶按来源可分为EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶，B正确；C、T4DNA连接酶可连接双链DNA片段间的磷酸和脱氧核糖，C错误；D、EcoliDNA连接酶只能连接具有黏性末端的双链DNA片段，D正确。
4、故选C。3.如图表示某质粒上的氨苄青霉素抗性基因（Ampr）和四环素抗性基因（Tetr），P点为目的基因插入位点，则成功导入目的基因的重组质粒（ ）A. 既能在含氨苄青霉素培养基上生存，也能在含四环素培养基上生存B. 能在含氨苄青霉素培养基上生存，不能在含四环素培养基上生存C. 不能在含氨苄青霉素培养基上生存，能在含四环素培养基上生存D. 既不能在含氨苄青霉素培养基上生存，也不能在含四环素培养基上生存【答案】B【解析】【分析】质粒含有的抗生素抗性基因常作为标记基因，用于筛选成功导入重组质粒的受体菌。本题质粒含有氨苄青霉素抗性基因（Ampr）和四环素抗性基因（Tetr）两个抗性基因，但目的基因的
5、插入位点却正好位于Tetr上，插入的目的基因会破坏Tetr的结构。【详解】据图可知目的基因若成功导入，则插入抗四环素基因（Tetr）中，导致该基因被破坏，则受体菌不能在含四环素培养基上生存；而抗氨苄青霉素基因（Ampr）保持完整结构，受体菌可以在含氨苄青霉素的培养基上生存。因此成功导入重组质粒的受体细胞，能在含氨苄青霉素培养基上生存，不能在含四环素培养基上生存。故选B。4.下列有关基因工程的叙述，不正确的是（ ）A. 重组DNA分子的构建在体内进行B. 基因工程能使生物产生定向变异C. 目的基因主要是编码蛋白质的结构基因D. 基因工程能打破物种间的界限【答案】A【解析】【分析】基因工程是狭义的
6、遗传工程，基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定高效地表达。为了实现基因工程的目标，通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作，它包括目的基因的获得、重组DNA的形成，重组DNA导入受体细胞也称（宿主）细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达等几个方面。【详解】A、重组DNA分子的构建在体外进行，借助限制酶、DNA连接酶构建重组DNA分子，A错误；B、基因工程可定向改变生物的性状，B正确；C、目的基因主要是指编码蛋白质的基因，也可以是具有调控作用的因子，C正确；D、基因工程能打破物种间的界限，使不同种的基因发生重组，D
7、正确。故选A。5.下列关于PCR技术的叙述，错误的是（ ）A. 理论上，1个DNA分子第n次循环需要引物2n个B. PCR技术的基本原理是DNA双链复制C. 每次循环可分为变性、复性和延伸三步D. 该过程中DNA双链的解旋需要酶的催化【答案】D【解析】【分析】PCR技术：（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。（2）原理：DNA复制。（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）（5）过程：高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋
8、酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；中温延伸：合成子链。【详解】A、如果开始的基因只有一个，第n-1次结束后的基因有2n-1个，每个基因复制1次需要1对引物，第n次循环需要2n-1对引物，即2n个，A正确；B、PCR技术利用了细胞内DNA复制的原理，B正确；C、PCR的一个循环要经历变性、复性和延伸三个步骤，C正确；D、PCR过程中DNA双链的打开利用了高温使DNA变性，没有使用解旋酶，D错误。故选D。【点睛】6.下图表示三种限制酶BamH、Bgl和Mbo的识别序列和切割位点，下列叙述不正确的是（ ）A. 三种限制酶作用的化学键相同B. 三种限制酶切割DNA分子
9、后能形成相同的黏性末端C. 能被BamH或Bgl切割的位点也能被Mbo切割D. 能被Mbo切割的位点一定能被BamH或Bgl切割【答案】D【解析】分析】一种限制酶只能识别一种特定的DNA序列，且只能在特定的位点切割。【详解】A、三种限制酶作用的化学键均为磷酸二酯键，A正确；B、三种限制酶切割产生的黏性末端均为GATC，B正确；C、能被BamH或Bgl切割的位点一定含有GATC的序列，该序列可以被Mbo识别，故可以被其切割，C正确；D、能被Mbo切割的位点不一定能被BamH或Bgl识别，故不一定能被其切割，D错误。故选D。【点睛】7.下图是基因工程中基因表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需
10、的，则X最可能是A. 目的基因插入位点B. 启动子C. 标记基因D. DNA聚合酶识别位点【答案】B【解析】基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成。图中有终止子、标记基因(抗生素基因)、目的基因(插入的基因)、复制原点等,还缺少启动子。启动子位于目的基因的首端，所以X最可能是启动子，B选项是正确的。8.将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，有效地提高了番茄的耐寒能力。检测鱼的抗冻蛋白基因在番茄体内是否发挥功能作用的第一步是（ ）A. 在试验田中观察番茄的耐寒能力B. 检测番茄的体细胞中是否存在鱼的抗冻蛋白C. 检测鱼的抗冻蛋白基因是否转录出了mRNAD. 检测番茄体细胞中是否有鱼的抗冻蛋白
11、基因【答案】C【解析】【分析】目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】A、在试验田中观察番茄的耐寒能力是在个体水平上的鉴定，A错误；B、检测番茄的体细胞中是否存在鱼的抗冻蛋白，是检测目的基因是否翻译，B错误；C、检测鱼的抗冻蛋白基因是否转录出了mRNA，是检测目的基因是否转录，是检测目的基因是否发挥功能的第一步，C正确；D、检测番茄体细胞中是否有鱼的抗冻蛋白基因，
12、是检测目的基因是否导入受体细胞，不能判断目的基因能否发挥功能，D错误。故选C。9.利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，下列叙述错误的是（ ）A. 过程需要进行碱基互补配对B. 图中质粒的化学本质是DNAC. 过程使用的感受态细胞可通过CaCl2溶液处理获得D. 过程只需进行DNA分子杂交即可确定是否成功获得了“工程菌”【答案】D【解析】【分析】由图可知，表示逆转录过程，表示目的基因的获取，表示把目的基因导入受体细胞，表示目的基因的检测和鉴定。【详解】A、表示逆转录过程，需要进行碱基的互补配对，A正确；B、质粒是环状DNA分子，B正确；C、表示把目的基因导入受体细胞，需
13、要用钙离子处理使其处于感受态，C正确；D、表示目的基因的检测和鉴定，还需要进行分子杂交和抗原抗体杂交及个体水平的检测等，D错误。故选D。【点睛】10. 观察分析下图，该图表示的过程是A. 构建基因组文库B. 构建cDNA文库C. 构建基因表达载体D. 构建转基因工程菌【答案】A【解析】【分析】【详解】从图可知，该过程利用的是某种生物的基因组DNA，用限制酶切割后，与载体连接注入到受体菌中，该过程是构建基因组文库，故A正确。11.下图为蛋白质工程的流程图，下列说法正确的是（ ）A. 利用蛋白质工程制造出的蛋白质都是自然界本来就有的B. 蛋白质工程是一项完全摆脱基因工程技术的全新的生物工程技术C.
14、 过程a、b分别是转录、翻译D. 蛋白质工程不可能构建出一种新的基因【答案】C【解析】【分析】蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律以及生物功能的关系作为基础，通过基因的修饰或基因的合成，对现有的基因进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。图中a、b过程分别是转录、翻译过程。【详解】A、基因工程原则上只能生产自然界已经存在的蛋白质蛋白质工程可以生产自然界中不存在的蛋白质，A错误；B、蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程，B错误；C、据图可知，过程a、b分别是转录、翻译，C正确；D、蛋白质工程中可根据已经明确的蛋白质的结构构建出一种全新的基因，D错误。故选C。1
15、2.下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，不正确的是（ ）A. 二者所用培养基基本相同B. 二者都需要无菌操作条件C. 二者依据的生物学原理不同D. 二者培养的细胞都能进行有丝分裂【答案】A【解析】【分析】植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基成分营养物质（蔗糖）、植物激素等营养物质（葡萄糖）、动物血清等培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无毒苗等获得细胞或细胞产物分散处理无有脱分化有无【详解】A、植物组织培养的培养基成分含营养物质（蔗糖）、植物激素等，动物细胞培养的培养基成分含营养物质（葡
16、萄糖）、动物血清等，A错误；B、植物组织培养需要无菌操作条件，动物细胞培养是无菌无毒的液体环境，B正确；C、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，C正确；D、植物组织培养和动物细胞培养细胞分裂方式都是有丝分裂，D正确。故选A。13.下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体的培养进行遗传改良的过程，下列分析不正确的是（ ）A. 过程的目的是去除细胞壁B. 过程有可能使原生质体内的染色体数目发生改变C. 过程进行了细胞增殖D. 过程用比例不同的生长素和细胞分裂素处理后得到的结果相同【答案】D【解析】【分析】由图可知，表示用纤维素酶和果胶酶处理，表示诱变处理，表示脱分化。【详解
17、】A、表示用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁，A正确；B、可能会引起原生质体发生基因突变或染色体变异，B正确；C、表示脱分化，会发生细胞增殖，C正确；D、再分化时，生长素比例高时，有利于根的分化，细胞分裂素比例高时，利于芽的分化，D错误。故选D。【点睛】14.植物组织培养技术是植物细胞工程的基础技术之一，下列生产实践不需要依赖植物组织培养技术的是（ ）A. 利用单倍体育种技术培育出单育1号烟草B. 利用杂交育种技术培育出高产抗病小麦C. 利用转基因技术培育出抗棉铃虫的棉花D. 利用体细胞杂交技术培育出白菜甘蓝【答案】B【解析】【分析】植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、
18、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。【详解】A、单倍体育种过程先用花药离体培养获得单倍体植物，故利用单倍体育种技术培育出单育1号烟草需要用到植物组织培养技术，A正确；B、利用杂交育种技术培育出高产抗病小麦不需要用到植物组织培养技术，B错误；C、利用转基因技术培育出抗棉铃虫的棉花需要用到基因工程和植物组织培养技术，C正确；D、利用体细胞杂交技术培育白菜甘蓝过程中，将杂种细胞培养成杂种植株需要采用植物组织培养技术，D正确。故选B。15.下列有关植物体细胞杂交的叙述，正确的是（ ）A. 植物体细胞杂交的结果是获得杂种植株B. 植物体细胞杂交属于有性生殖C.
19、 植物体细胞杂交产生的杂种植株的变异类型属于基因重组D. 植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性【答案】A【解析】【分析】进行植物的体细胞杂交时先用酶解法去除植物细胞的细胞壁，进行植物原生质体的融合，形成杂种细胞，再通过植物的组织培养将杂种细胞培育成杂种植株。不同种的植物之间具有生殖隔离，该种方法打破了不同种植物间的生殖隔离，克服了远缘杂交不亲和的障碍。【详解】A、植物体细胞杂交可打破生殖隔离获得杂种植株，A正确；B、植物体细胞杂交也属于无性生殖，B错误；C、植物体细胞杂交产生的杂种植株的变异类型属于染色体变异，C错误；D、植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，D错误。
20、故选A。【点睛】16.将三色紫罗兰的蓝色素基因（B）转入白玫瑰，培育出花瓣呈现自然蓝色的新品种蓝玫瑰，快速繁殖新品种蓝玫瑰可采用植物组织培养技术，此时选用的蓝玫瑰外植体最好是（ ）A. 叶片B. 花瓣C. 茎尖D. 茎段【答案】C【解析】【分析】植物组织培养是指利用特定的培养将离体的植物细胞、组织或器官培养成完整植株的过程。【详解】要想快速繁殖新品种蓝玫瑰，最好选择蓝玫瑰的分裂旺盛的体细胞进行培养，在叶片、花瓣、茎尖、茎段中，茎尖的分裂最旺盛，最易培养。综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。故选C。【点睛】17.如图表示人工种子的结构，下列说法不正确的是（ ）A. 表示人工种皮、表示愈伤组织
21、B. 可表示人工胚乳或子叶C. 人工种子能保持亲本的优良性状D. 人工种子在适宜条件下能萌发成幼苗【答案】A【解析】【分析】人工种子的组成：胚状体和人工种皮，其中人工种皮具有保护作用（可加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等，也可添加植物生长调节剂以调节植物的生长发育。人工种子的优点：不受季节限制；可以很方便运输和储存；不会造成遗传性状的改变。分析题图：图中为人工种皮，为胚状体，为人工胚乳。【详解】A、表示人工种皮、表示胚状体，A错误；B、可表示人工胚乳或子叶，B正确；C、经植物组织培养产生的胚状体可直接制作“人工种子”，由于该技术属于无性生殖，因此能保持亲本的优良性状，C
22、正确；D、人工种子在适宜条件下，胚状体能萌发成幼苗，D正确。故选A。18.下列有关动物细胞工程的叙述，不正确的是A. 培养的动物细胞可用于检测有毒物质B. 体细胞核移植技术能用于治疗人类某些疾病C. 克隆动物的产生主要通过核移植实现D. 克隆动物的遗传物质来自供体细胞核【答案】D【解析】【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。【详解】A、检测有毒物质，判断某种物质的毒性，属于动物细胞工程的应用，A正确；B、动物体细胞核移植技术的应用前景包括加速家畜遗传改
23、良进程；培养可用于移植的组织、器官；作为疾病模型,研究疾病的发展和治疗疾病，B正确；C、克隆动物是通过核移植实现的，C正确；D、克隆动物细胞核遗传物质来自供体细胞核，细胞质遗传物质来自于受体细胞，D错误。故选D。19.将三倍体鲫鱼的肾脏细胞核移植到二倍体鲫鱼的去核卵细胞内，培养获得的克隆鱼A. 是二倍体B. 遗传物质来自于二倍体鲫鱼C. 高度不育D. 性状与三倍体鲫鱼完全相同【答案】C【解析】【详解】A、克隆鱼的核遗传物质都来自三倍体鲫鱼，因此克隆鱼属于三倍体，A错误；B、克隆鱼的细胞核遗传物质来自于三倍体鲫鱼，细胞质遗传物质来自于二倍体鲫鱼，B错误；C、该克隆鱼是三倍体，在减数分裂联会时发生
24、紊乱，不能产生正常的生殖细胞，所以高度不育，C正确；D、该克隆鱼的细胞核遗传物质来自三倍体鲫鱼，而细胞质遗传物质来自二倍体鲫鱼，因此其性状与三倍体鲫鱼相似，但不是完全相同，D错误。故选C20.下列关于对某种动物的肝肿瘤细胞进行培养的叙述，错误的是（ ）A. 制备肝肿瘤细胞悬液时，可用纤维素酶处理肿瘤组织块B. 培养时所需要的营养物质应与体内基本相同C. 进行细胞体外培养时，其适宜温度一般与动物的体温相近D. 细胞培养应在含95%空气加5%CO2的混合气体的恒温培养箱中进行【答案】A【解析】【分析】动物细胞培养指从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生
25、长和增殖。【详解】A、制备肝肿瘤细胞悬液时，应该用胶原蛋白酶或胰蛋白酶处理，不能用纤维素酶处理，A错误；B、培养时所需的营养物质应与体内基本相同，除了氨基酸、核苷酸、糖类等，还需要添加血浆等天然成分，B正确；C、动物细胞培养时所需要的温度是37左右，与体温接近，C正确；D、细胞培养应在含95%空气加5%CO2的混合气体的恒温培养箱中进行，二氧化碳可以维持培养液的pH，D正确。故选A。【点睛】21.制备抗埃博拉病毒单克隆抗体的简要过程如下图所示，该过程的细胞细胞中，不具有无限增殖能力的是（ ）给小鼠注射vp40蛋白（埃博拉病毒的组成蛋白）从小鼠脾脏中获取细胞诱导细胞与小鼠的细胞融合筛选出细胞克隆
26、化培养和抗体检测，获得细胞A. 细胞B. 细胞C. 细胞D. 细胞【答案】A【解析】【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。【详解】从小鼠脾脏中获取细胞为能产生抗体的B淋巴细胞，该细胞高度分化，不具有增殖能力。小鼠的细胞为骨髓瘤，有增殖能力。细胞为杂交瘤细胞，不仅有增殖能力，还能产生抗体。细胞为筛选出来的杂交瘤细胞，能产生单一的抗体。故选A。22.实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如下图所示。下列叙述错误的是（
27、 ）A. 甲过程一般是在幼龄的实验小鼠体内取皮肤组织B. 乙过程需要将获得的皮肤细胞制成细胞悬液C. 丙过程是原代培养，细胞会贴壁生长D. 丁过程是传代培养，细胞都不能保持二倍体核型【答案】D【解析】【分析】图示中甲表示从实验小鼠获取皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒；乙表示用胰蛋白酶将组织细胞分散成单个细胞；丙表示原代培养过程；丁表示传代培养。【详解】A、用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织，A正确；B、动物细胞培养前需用胰蛋白酶处理皮肤组织使组细胞分散开，制成细胞悬液，B正确；C、丙是原代培养，细胞会出现贴壁生长和接触抑制现象，C正确；D、丁是传代培养过程，该过程少部分细胞遗传
28、物质可能发生了变化，大部分能保持二倍体核型，D错误。故选D。23.下列关于卵子的发生的叙述，正确的是（ ）A. 减数第一次分裂和减数第二次分裂是连续发生的B. 减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程中完成的C. 减数第一次分裂是在雌性动物排卵之后发生的D. 一个卵原细胞通过减数分裂可形成四个卵子【答案】B【解析】【分析】卵子的发生：卵原细胞通过有丝分裂不断增加其数量，并演变为初级卵母细胞，被卵泡细胞包围，形成卵泡，这是在胎儿时期完成的，M是在雌性动物排卵前后完成的，结果是产生初级卵母细胞和第一极体；M是在受精过程中完成的。【详解】A、卵子形成时的减数分裂的两次分裂不是连续的，A错误；B、卵子形
29、成的减数第二次分裂是在输卵管中精子和卵子的结合过程中完成的，B正确；C、卵子的减数第一次分裂是雌性动物排卵前后完成的，C错误；D、一个卵原细胞通过减数分裂可形成1个卵子，D错误。故选B。24. 图是牛囊胚示意图，有关叙述不正确的是A. 透明带能阻止多精入卵B. 囊胚腔是一个充满液体的腔C. 内细胞团将来分化成内胚层D. 滋养层将来发育成胎膜和胎盘【答案】C【解析】【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的
30、各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。细胞分化在胚胎期达到最大限度【详解】A、透明带反应是阻止多精入卵的第一道屏障，A正确；B、囊胚腔是一个充满液体的腔，B正确；C、内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，C错误；D、滋养层将来发育成胎膜和胎盘，D正确。25.下列关于哺乳动物受精作用的叙述，正确的是（ ）A. 精子在睾丸中完成“获能”后才能参与受精B. 刚排出的卵子是次级卵母细胞C. 排出的卵子需培养成熟后才能参与
31、受精D. 受精过程主要包括精子穿越放射冠和透明带、进入卵细胞膜、囊胚的形成【答案】C【解析】【分析】哺乳动物的受精过程主要包括：精子穿越放射冠和透明带,进入卵细胞膜,原核形成和融合。受精卵的发育也由此开始。1.体内受精场所是母体的输卵管上段。2.体外受精和胚胎的早期培养(1)卵母细胞的采集和培养：主要方法：用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。第二种方法：从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。(2) 精子采
32、集和获能：在体外受精前，要对精子进行获能处理。(3) 受精：获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。【详解】A、精子在雌性生殖道中完成“获能”后才能参与受精，A错误；B、刚排出的卵子包含次级卵母细胞，还含其他细胞，B错误；C、刚排出的卵子尚未完全成熟，仅完成第一次减数分裂，需要在输卵管内进一步成熟，直到第二次减数分裂的中期才能与精子结合完成受精过程，C正确；D、受精过程主要包括精子穿越放射冠和透明带、进入卵细胞膜,原核形成和融合，D错误。故选C。26.下列关于体内受精的顺序排列正确的是第一次卵裂开始 释放第二极体 顶体反应 穿越透明带 雌、雄原核的形成 两组核染色
33、体合为一组A. B. C. D. 【答案】C【解析】【分析】受精是精子与卵子结合形成合子（即受精卵）的过程。它包括受精前的准备阶段和受精阶段。受精阶段主要包括，精子穿越放射冠和透明带，进入卵细胞膜，原核形成和配子结合。【详解】体内受精的过程为：精、卵相遇，发生顶体反应，精子穿入放射冠；精子接触透明带；精子穿过透明带，接触卵细胞膜；精子头膨胀，同时卵子完成第二次减数分裂，释放第二极体；雌、雄原核形成；核膜消失，两个原核融合；第一次卵裂即将开始。故选C。27.下图表示高等动物的个体发育过程，下列说法正确的是（ ）A. 图中过程和过程均在子宫中完成B. 受精卵形成囊胚的过程中，要进行有丝分裂和减数分
34、裂C. 原肠胚随分化程度的升高，细胞的全能性不断升高D. 图中性成熟的个体是通过有性生殖获得的【答案】D【解析】【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔细胞分化在胚胎期达到最大限度。【详解】A
35、、图中过程卵裂期一般在输卵管进行，后期才进入子宫，A错误；B、受精卵形成囊胚的过程中，要进行有丝分裂和细胞分化，B错误；C、原肠胚分化程度升高，全能性下降，C错误；D、图中性成熟的个体经历了精卵结合形成受精卵的过程，属于有性生殖，D正确。故选D。【点睛】28.雄性哺乳动物通过减数分裂形成的精细胞需要经过变形，才能形成精子，这一过程不包括（ ）A. 细胞核变为精子头部的主要部分B. 高尔基体发育为精子头部的顶体C. 中心体演变为精子的尾部D. 线粒体浓缩成原生质滴集中在精子尾基部【答案】D【解析】【分析】精原细胞通过减数分裂产生精子，一个精原细胞可以产生四个精子。【详解】A、精细胞中的细胞核变为
36、精子头部的主要部分，A正确；B、精细胞中的高尔基体发育为精子头部的顶体，B正确；C、精细胞中的中心体演变为精子的尾部，C正确；D、线粒体聚集在尾的基部形成线粒体鞘，D错误。故选D。【点睛】29.下列有关现代生物技术的叙述，不正确的是（ ）A. 用基因枪法可将目的基因导入单子叶植物中B. 克隆动物的成功培育，说明动物细胞具有全能性C. 异体间器官移植面临的难题之一是免疫排斥反应D. 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础【答案】B【解析】【分析】1、基因工程用基因枪法可将目的基因导入单子叶植物中；2、生物体通过无性繁殖所生成的群体或个体称为克隆，由动物体内一个细胞经过无性生殖过程进而发育形
37、成的动物个体为克隆动物。体细胞克隆即取出一个双倍体细胞核移入一个去核的卵细胞，并在一定条件下进行核卵重组，再植入代孕母体中发育成新个体的过程。供体细胞均来自高度分化的体细胞，其种类繁多、数量无限。3、胚胎移植的生理基础：（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。【详解】A、人用基因枪法可将目的基因导入单子叶植物中，A正确；B、克隆动物的成功培育，说明动物细胞核具有全能性，B错误；C、异体间器
38、官移植面临的最大难题是免疫排斥反应，C正确；D、动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础，D正确。故选B。30.下列有关叙述错误的是（ ）A. 基因探针与转基因细胞的基因组DNA杂交后，若显示出杂交带，则表明目的基因导入成功B. 植物体细胞杂交过程中，杂种细胞形成细胞壁标志着原生质体融合成功C. 利用体细胞杂交技术培育出了白菜-甘蓝，说明白菜与甘蓝不存在生殖隔离D. 若在卵细胞膜与透明带之间观察到了两个极体，则标志着卵母细胞已受精【答案】C【解析】【分析】1、目的基因的检测与鉴定：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术
39、检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。2、植物体细胞杂交的具体过程：【详解】A、基因探针与转基因细胞的基因组DNA杂交后，若显示出杂交带，则表明目的基因导入成功，A正确；B、植物体细胞杂交过程中，杂种细胞形成细胞壁标志着原生质体融合成功，B正确；C、白菜与甘蓝存在生殖隔离，利用体细胞杂交技术培育出了白菜一甘蓝杂种植物是可育的，C错误；D、若在卵细胞膜与透明带之间观察到了两个极体，则标志着卵母细胞完成受精，D正确。故选C。【点睛】二、非选择题31.科学家借用慢病毒将正常的血红蛋白基因导入患者的造血干细胞，再将“纠正”基因后的造血干细胞回输至患者体内，使其体内部分造血干细胞能长期合成正
40、常的血红蛋白，达到治疗镰刀型细胞贫血症的目的。请回答下列问题：（1）镰刀型细胞贫血症是血红蛋白基因的某一处序列CCTGAGG突变为CCTGTGG而导致的一种疾病。Mst酶能识别并切割序列CCTGAGG，用Mst酶处理异常的血红蛋白基因可得到3个DNA片段，那么用Mst酶处理正常的血红蛋白基因会得到_个DNA片段，可见该酶_（填“能”或“不能”）用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断。（2）要利用逆转录的方法合成血红蛋白基因，应从早幼红细胞中提取_，在_酶的作用下合成cDNA；与细胞中的血红蛋白基因相比，合成的cDNA没有_、_和内含子等。（3）在构建能导入造血干细胞的含血红蛋白基因的表达载体过程中，以
41、_作为工具酶，以_作为载体。（4）题干所述的基因治疗方法属于_（填“体内”或“体外”）基因治疗。【答案】 (1). 4 (2). 能 (3). mRNA (4). 逆转录 (5). 终止子 (6). 启动子 (7). 限制酶和DNA连接酶 (8). 慢病毒 (9). 体外【解析】【分析】1、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转
42、化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。2、蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。【详解】（1）镰刀型细胞贫血症是血红蛋白基因的某一
43、处序列CCTGAGG突变为CCTGTGG而导致的一种疾病。Mst酶能识别并切割序列CCTGAGG，故突变后有一处序列不能再被Mst酶能识别，用Mst酶处理异常的血红蛋白基因可得到3个DNA片段，那么用Mst酶处理正常的血红蛋白基因会得到4个DNA片段，可见该酶能用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断。（2）逆转录是以mRNA为模板合成cDNA的过程，故要利用逆转录的方法合成血红蛋白基因，应从早幼红细胞中提取mRNA，在逆转录酶的作用下合成cDNA；与细胞中的血红蛋白基因相比，合成的cDNA没有终止子、启动子和内含子等。（3）由题干可知，科学家借用慢病毒将正常的血红蛋白基因导入患者的造血干细胞，故在构建
44、表达载体过程中，以限制酶和DNA连接酶作为工具酶，以慢病毒作为载体。（4）基因治疗包括体内基因治疗和体外基因治疗，题干所述的基因治疗方法属于体外基因治疗。【点睛】本题考查基因工程和蛋白质工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，了解基因工程技术的相关应用；识记蛋白质工程的基本流程，能结合所学的知识准确答题。32.将正确的基因导入细胞以替代错误的突变基因是目前基因治疗的一种重要形式；也可借助基因编辑技术直接修复错误的基因进行基因治疗。请回答下列相关问题：（1）将正确的基因导入细胞，其核心是构建_。下图为进行这一核心过程的案例，该过程中需选择_限制酶进行酶切。（2）如果仅已知目的基因首
45、尾两端的部分核苷酸序列，通常可根据该基因首尾两端的已知脱氧核苷酸序列设计并合成_，利用_技术得到大量目的基因。（3）为鉴定上图所示3种连接方式形成的载体，选择Hpa酶和BamH酶对其进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析。若出现7300bp和200bp的两种条带，则所鉴定的是_载体；若出现_，则所鉴定的是载体自连载体。（4）CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑：根据目的基因的部分序列设计向导RNA，向导RNA与目的基因结合后，就会引导Cas9蛋白结合于目的基因的特异性位点并进行切割，从而介导基因添加、基因删除、基因校正等。向导RNA与目的基因的结合遵循_原则
46、，Cas9是一种_酶。【答案】 (1). 基因表达载体 (2). Xho (3). 引物 (4). PCR (5). 反向连接 (6). 7000bp的一种条带 (7). 碱基互补配对 (8). 限制【解析】【分析】基因工程的操作步骤有：目的基因的获取、基因表达载体的构建、把目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和鉴定。【详解】（1）基因工程的核心是构建基因表达载体。由图可知，目的基因和质粒均有Xho的识别序列，故应该用该酶进行切割。（2）常根据已知脱氧核苷酸的一段已知序列设计合成引物，通过PCR技术进行扩增。（3）目的基因的长度为500bp，质粒的长度为7000bp，若为载体自连，则只有Hpa
47、酶的识别序列，无BamH酶的识别序列，用二者切割后，只能打开一个切口，只有一种条带，长度为7000bp；若为正向连接，则重组质粒的总长度为7500bp，含有Hpa酶和BamH酶的识别序列各一个，同时用这两种酶切割后，会产生2种条带，分别为500bp、7000bp；若为反向连接，则重组质粒的总长度为7500bp，含有Hpa酶和BamH酶的识别序列各一个，同时用这两种酶切割后，会产生2种条带，分别为200bp、7300bp。（4）向导RNA与目的基因之间遵循碱基的互补配对原则，Cas9可以切割目的基因，故为限制酶。【点睛】本题的难点在于（3）的计算，首先需要考生标出每种连接方式载体中各种限制酶的位
48、置及相应的长度，再进行判断。33.赖氨酸是人体必需氨基酸，具有促进人体发育、增强免疫的功能，并能起到提高中枢神经组织功能的作用。某农科所的科技人员欲通过将玉米种子的某种蛋白酶改造成“M酶”，从而大大提高玉米种子中赖氨酸的含量，以培育出高赖氨酸的玉米新品种。请回答下列问题：（1）科技人员先从“提升玉米种子中赖氨酸的含量”这一功能出发，设计预期的“M酶”的_，再推测出相对应的目的基因的_序列，最终合成出“M酶”基因。（2）科技人员获得“M酶”基因后，常利用PCR技术在体外将其大量扩增，此过程需要一种特殊的酶是_，原料是_。（3）“M酶”基因只有插入_，才能确保“M酶”基因在玉米细胞中得以稳定遗传。
49、（4）依据每个生物细胞都具有_的原理，可将含有“M酶”基因的玉米细胞培育成转“M酶”基因的玉米植株。为了确保育种成功，科技人员需要通过测定玉米种子中_的含量，从_水平加以鉴定。【答案】 (1). 结构 (2). 脱氧核苷酸 (3). 热稳定DNA聚合酶（或Taq酶） (4). dNTP（或4种脱氧核苷酸） (5). 玉米细胞中染色体的DNA上 (6). 全能性 (7). 赖氨酸 (8). 个体【解析】【分析】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。蛋白质工程是在基因工程的基
50、础上，延伸出来的第二代基因工程。【详解】（1）根据题干信息已知，某农科所科技人员欲通过将玉米某种蛋白酶改造成“M酶”，则应该利用蛋白质工程，先预期构建出“M酶（蛋白质）的结构，再推测出相对应目的基因的脱氧核苷酸序列，最终合成出“M酶“基因。（2）基因工程中，获取的目的基因一般利用PCR技术进行扩增，过程中需要耐高温DNA聚合酶（Taq酶）的催化，原料是dNTP（或4种脱氧核苷酸）。（3）要想确保“M酶”基因在玉米细胞中得以稳定遗传，必须将“M酶”基因插入玉米细胞的染色体DNA中。（4）利用植物组织培养技术，依据植物细胞的全能性原理，可将含有“M酶”基因的玉米细胞培育成转“M酶”基因的玉米植株。
51、科技人员需要通过测定玉米种子中赖氨酸含量，从个体水平加以鉴定，以确保育种成功。【点睛】本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生运用所学基础知识，结合所学知识解决相关的生物学问题的能力。34.马铃薯卷叶病毒是由蚜虫传播病原体，与马铃薯有性杂交不亲和的野生种对卷叶病毒有很高的抗性。利用植物体细胞杂交技术可提高马铃薯对卷叶病毒的抗性，具体过程如下图所示。请回答下列问题：（1）马铃薯细胞和野生种细胞融合前，要先除去细胞壁，其原因是_，使用纤维素酶和_酶去除细胞壁利用了酶的_特点。（2）过程可用化学试剂_处理或用_法来诱导原生质体融合。（3）过程表示_的过程，过程分别是_、_。【答案】 (1). 细胞壁
52、会阻碍原生质体的融合 (2). 果胶 (3). 专一性（ (4). PEG（或聚乙二醇） (5). 物理（或离心、振动、电激） (6). 再生细胞壁 (7). 脱分化 (8). 再分化【解析】【分析】和表示去除细胞的细胞壁，制备原生质体，表示原生质体的融合，表示再生细胞壁，表示脱分化形成愈伤组织，表示再分化形成植株。【详解】（1）植物体细胞杂交，细胞壁会阻碍原生质体的融合，所以需要先除去细胞壁。植物细胞壁是由纤维素酶和果胶酶组成的，使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁利用了酶的专一性特点。（2）是原生质体的融合，可以用化学试剂如PEG（聚乙二醇）或用物理法（或离心、振动、电激）来诱导原生质体融合。（
53、3）表示再生细胞壁的过程，分别是脱分化和再分化。【点睛】本题考查植物体细胞杂交、植物组织培养等相关知识，识记其基本过程即可。35.传统单克隆抗体大多是鼠源性（利用骨髓瘤细胞与小鼠B淋巴细胞融合产生）的，而鼠源性单克隆抗体应用于人体治疗时存在诸多问题，因此，全人源化抗体（将人类抗体基因转移到抗体基因缺失的动物中，使该动物表达人类抗体）成为单克隆抗体研究的重点。请回答下列问题：（1）传统单克隆抗体的制备过程中，获取B淋巴细胞前需要给小鼠_。骨髓瘤细胞通常由细胞培养而来，培养过程中细胞生长到一定数量时，该类细胞不会出现_现象。（2）传统单克隆抗体制备过程中至少有两次筛选，其中第二次是筛选出_、此时获
54、得的杂交瘤细胞若放入小鼠体内进行培养，可从_中提取单克隆抗体。（3）与一般抗体相比，全人源化单克隆抗体的优点有_（答出两点）等。（4）制备单克隆抗体的过程中，运用了_和动物细胞培养等技术，而后者需要置于95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，其中CO2的作用是_。【答案】 (1). 注射特定的抗原 (2). 接触抑制 (3). 能产生特定抗体的杂交瘤细胞 (4). 小鼠腹水 (5). 特异性更强、灵敏度更高 (6). 动物细胞融合 (7). 维持培养液的pH【解析】【分析】单克隆抗体的制备涉及的生物技术有动物细胞培养和动物细胞融合等，其制备过程需要经过两次筛选。【详解】（1）制备单克隆抗体的过程中，需要提前对小鼠注射特定的抗原进行免疫处理。骨髓瘤细胞不会出现接触抑制现象。（2）第二次筛选是进行专一抗体检测，是为了筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；杂交瘤细胞若在小鼠的腹腔中培养，可以从腹水中提取抗体。（3）单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等优点。（4）制备单克隆抗体需要用到动物细胞培养和动物细胞融合等技术，动物细胞培养的过程中二氧化碳可以维持培养液的pH。【点睛】单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高、可大量制备。杂交瘤细胞的特点：既能无限增殖、又能产生专一性抗体。
