1、细胞工程基础对点练考纲对点夯基础考点一植物的组织培养()1下图是某组织培养过程的简图。下列有关说法，正确的是()花粉粒愈伤组织胚状体植株A花药离体培养的条件与种子萌发的条件完全相同B若花粉粒核中有两个或多个染色体组，则所得植株为二倍体或多倍体C过程都是细胞分化的过程，因此起作用的激素只有生长素D该过程体现了植物细胞的全能性2“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是()A除去细胞壁以形成原生质体，该过程可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶B通常诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG诱导和灭活
2、的病毒诱导C杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁D从愈伤组织形成“白菜甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程考点二动物的细胞培养与体细胞克隆()细胞融合与单克隆抗体()3下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是()A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B克隆培养法培养过程中少数细胞的基因型会发生改变C二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的D恶性细胞系的细胞可进行传代培养42021山东师大附中高三一模下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述错误的是()A图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法可诱导细胞融合获得乙C用特
3、定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长D丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁提能强化练考点强化重能力52021江苏南京市、盐城市高三调研下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是()A用胰蛋白酶处理动物组织后，可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液B少数细胞在连续培养50代后可获得不死性，是某些基因选择性表达的结果C根据在高倍镜下观察到基因突变的比例可推知某化学药品的毒性DPEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养能得到优良动物个体62021浙南名校联盟联考为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。下列
4、叙述错误的是()A筛选2含多次筛选，其基本原理与筛选1相同B为了诱导小鼠甲产生特异性的B淋巴细胞，可以对其注射病毒AC利用灭活的病毒或聚乙二醇等作介导，可融合B淋巴细胞和骨髓瘤细胞D为了克隆阳性杂交瘤细胞，可将其注射到小鼠腹腔内增殖并获得大量单抗大题冲关练综合创新求突破72021衡水中学全国高三联考抗EGFR/CD3双特异性抗体拥有两种特异性抗原的结合位点，其不仅能与肿瘤细胞表面的表皮生长因子受体EGFR结合，也能与T细胞表面抗原CD3结合，从而拓展了抗EGFR单克隆抗体的临床应用范围。研究人员构建了含抗EGFR抗体基因和抗CD3抗体基因的表达载体，并转染Expi293细胞，该细胞可表达出双特
5、异性抗体。回答下列问题：(1)EGFR是一种跨膜糖蛋白受体，仅分布在正常上皮细胞和肿瘤细胞中，而不存于其他正常组织细胞中，其根本原因是_。(2)与普通抗体相比，抗EGFR单克隆抗体的优点是_，制备该种抗体的过程中，用到的不同于植物原生质体融合的诱导方法为_。(3)一个完整的基因表达载体除了含有目的基因、标记基因外，还应包含_，构建基因表达载体时用到的酶有_。(4)为进一步研究分离提纯的抗EGFR/CD3双特异性抗体的免疫效果，研究人员分别向等量的直肠癌细胞悬液中接种T细胞并添加不同抗体，置于37条件下培养24h，分别测定并计算活化的T细胞的比例及T细胞的杀伤率，实验结果如下图所示：本实验的结论
6、是_。综合分析可知，抗EGFR/CD3双特异性抗体的免疫机理是_。82021河南濮阳高三质检下图表示利用农杆菌转化法培育转基因植物的大致步骤：目的基因表达载体的构建构建表达载体的农杆菌转化农杆菌与植株共培养转化植株的筛选转化植株的鉴定。回答下列问题：(1)用农杆菌转化法培育转基因植物时，从狭义上讲将含目的基因的重组质粒转入农杆菌的过程_(填“属于”或“不属于”)转化，理由是_。(2)图中外植体是指_；外植体与土壤农杆菌共培养的目的是利用农杆菌中的Ti质粒上的TDNA可转移到受体细胞，并整合到_的特性；结合图示Ti质粒，筛选转化细胞的培养基中应加入_，能存活的受体细胞才有可能是转化细胞。(3)进
7、行分子特性鉴定的常用方法有DNA分子杂交实验和抗原抗体杂交实验，其原理依次是_、_。(4)利用农杆菌转化法突出的优点有_(至少答2点)。92021湖南宜昌二中高三考试科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发许多动物细胞的分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下面的问题：(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体，一般选用的是_和_融合。(2)有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。图中酶A是指_，酶B是指_。对已导入重组质粒的进行“检测”的原因是_；所指的细胞具有特点是_。102021四川达州模拟现代生物
8、工程技术推动了医药学、免疫学和生态学的发展，依据现代生物工程技术的相关知识和原理回答下列问题：(1)胚胎移植时，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生_反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。通过试管动物技术培养发育成的早期胚胎，再经过_可产生多个基因型相同的后代。(2)单克隆抗体的制备中，将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再用特定的_培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞后，还需进行_，经过多次筛选，就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。最后获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是_。(3)科学家将生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过_等方法，导入哺乳动物的受精卵中，
9、获得转基因动物，再利用_技术获得大量的转基因克隆动物作为乳腺生物反应器，以此来生产生长激素，用于治疗矮小症。112021辽宁大连普兰店高三考试近年来，我国死于狂犬病的人数有上升趋势。狂犬病病毒的核酸是RNA，机体感染病毒后产生的特异性IgC抗体，能消除狂犬病病毒，这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异性抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗，已取得良好效果。请根据上述材料，回答下列问题：(1)巴斯德利用固定毒株制成减毒活疫苗，预防狂犬病。制成减毒活疫苗需要用_培养，这是因为病毒的生活方式为_。(2)特异性抗体获取可用单克隆抗体制备。在制备克隆抗体的过程中，应用的动物细胞工程技术是_
10、。(3)下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：图中过程A从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是_细胞，该细胞能够产生_。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是_。图中过程B是细胞融合，该过程需要用灭活的_、聚乙二醇或电激等诱导。特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比，单克隆抗体具有_的优点。(4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有无菌、无毒、适宜的温度、适宜的pH值、营养物质和_。课后定时检测案431解析：花药离体培养所需条件要求更高，需用MS培养基，另外还需要适宜的pH、温度和光照，
11、而种子萌发需要适宜的温度、水分等，A错误；花粉培养形成的植株称为单倍体，B错误；在细胞分化过程中有多种激素起作用，其中起主要作用的是细胞分裂素和生长素，C错误；在该过程中，单个细胞最终培养成了植株，这体现了植物细胞的全能性，D正确。答案：D2解析：除去细胞壁的酶有纤维素酶和果胶酶；诱导植物原生质体融合不能用灭活的病毒；杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁；从愈伤组织形成“白菜甘蓝”植物体属于再分化过程。答案：C3解析：动物细胞在培养过程中有接触抑制现象，细胞在培养瓶中会贴壁生长，最终会形成一层细胞，相互接触后停止生长。克隆培养法培养的过程中，仅有极少数细胞的基因型会发生改变。二倍体细胞的传
12、代培养一般传至10代后就不易传下去了。恶性增殖细胞系的细胞具有不死性，可以进行传代培养。答案：A4解析：图中小鼠注射甲，产生能分泌特异性抗体的B淋巴细胞，则甲属于抗原，A正确；利用聚乙二醇(化学法)、灭活的病毒(生物法)和电激(物理法)可诱导细胞融合获得杂种细胞，B正确；用特定的选择培养基对乙筛选，融合具有同种核的细胞和未融合细胞均不能生长，只有杂交瘤细胞能生长，C错误；杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可制备单克隆抗体，D正确。答案：C5解析：用胰蛋白酶处理动物组织后，可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，A正确；少数细胞在连续培养50代后可
13、获得不死性，这是某些基因突变的结果，B错误；基因突变在高倍镜下是观察不到的，C错误；由于动物细胞的全能性受到限制，动物细胞融合形成的杂种细胞不能培育成动物，D错误。答案：A6解析：为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于选择培养基，从而筛选出由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞，图中筛选2含多次筛选得到能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，筛选所依据的基本原理是抗体抗原特异性结合，A错误；为了诱导小鼠甲产生特异性的B淋巴细胞，可以对其注射病毒A，B正确；利用灭活的病毒或聚乙二醇等作介导，融合B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，C正确；为了克隆阳性杂交瘤细胞，可
14、将其注射到小鼠腹腔内增殖并获得大量单抗，D正确。答案：A7解析： (1)EGFR是一种跨膜糖蛋白受体，仅分布在正常上皮细胞和肿瘤细胞中，而不存于其他正常组织细胞中，其根本原因是基因的选择性表达。(2)与普通抗体相比，抗EGFR单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高，并可能大量制备。制备该种抗体的过程中，用到的不同于植物原生质体融合的诱导方法为灭活的病毒。(3)一个完整的基因表达载体除了含有目的基因、标记基因外，还应包含启动子和终止子。构建基因表达载体时用到的酶有限制酶和DNA连接酶。(4)抗EGFR/CD3双特异性抗体能加速活化T细胞，增加T细胞的杀伤率，加速效果比单独使用单一抗体和两种抗体混合
15、更高；抗EGFR/CD3双特异性抗体的免疫机理是抗EGFR/CD3双特异性抗体与肿瘤细胞表面的表皮生长因子受体EGFR结合，同时与T细胞表面抗原CD3结合促进T细胞增殖分化为效应T细胞，加速效应T细胞裂解肿瘤细胞。答案：(1)基因的选择性表达(2)特异性强、灵敏度高，并可能大量制备灭活的病毒(3)启动子和终止子限制酶和DNA连接酶(4)抗EGFR/CD3双特异性抗体能加速活化T细胞，增加T细胞的杀伤率，加速效果比单独使用单一抗体和两种抗体混合更高抗EGFR/CD3双特异性抗体与肿瘤细胞表面的表皮生长因子受体EGFR结合，同时与T细胞表面抗原CD3结合促进T细胞增殖分化为效应T细胞，加速效应T细
16、胞裂解肿瘤细胞8解析：(1)用农杆菌转化法培育转基因植物时，将含目的基因的重组质粒转入农杆菌的过程不属于转化，理由是转化是指目的基因进入受体细胞内并表达的过程，农杆菌不是受体细胞。(2)植物组织培养中的外植体是指离体的植物组织或细胞；Ti质粒上的TDNA可将目的基因转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上；图示Ti质粒上含有抗四环素基因，所以在筛选转化细胞的培养基中应加入四环素，能存活的受体细胞才有可能是转化细胞。(3)DNA分子杂交的原理是碱基互补配对，抗原抗体杂交实验的原理是抗体与相应的抗原发生特异性免疫反应。(4)利用农杆菌转化法突出的优点有利用天然的转化载体系统，成功率高，效果好
17、；目的基因整合到受体细胞染色体的DNA上，遗传稳定性好。答案：(1)不属于转化是指目的基因进入受体细胞内并表达的过程，农杆菌不是受体细胞(2)离体的植物组织和细胞受体细胞染色体的DNA上四环素(3)碱基互补配对原则抗体与相应的抗原发生特异性免疫反应(4)利用天然的转化载体系统，成功率高，效果好；目的基因整合到受体细胞染色体的DNA上，遗传稳定性好9解析：(1)制备单克隆抗体选用的融合细胞一般为骨髓瘤细胞(不能产生抗体，但能无限增殖)与经过免疫的B淋巴细胞(能产生特异性抗体，但不能无限增殖)。(2)在基因工程中，获取目的基因和切割质粒时需要使用限制酶，然后在DNA连接酶的作用下形成重组质粒。基因
18、工程中，将目的基因导入受体细胞后，还需要进行目的基因的检测和鉴定，其目的是检测目的基因是否在受体细胞中成功表达。prG基因具有调控细胞无限增殖的功能，故成功导入prG基因的细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体。答案：(1)骨髓瘤细胞经过免疫的B淋巴细胞(2)限制酶DNA连接酶检测目的基因是否在受体细胞中进行表达既能无限增殖又能产生特异性抗体10解析：(1)胚胎移植时，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。通过试管动物技术培养发育成的早期胚胎，再经过胚胎分割和胚胎移植可产生多个基因型相同的后代。(2)单克隆抗体的制备中，应将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨
19、髓瘤细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞后，还需进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是：每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。(3)科学家将生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射技术等方法，导入到哺乳动物的受精卵中，获得转基因动物，再利用动物体细胞核移植技术获得大量的转基因克隆动物作为乳腺生物反应器，以此来生产生长激素。答案：(1)免疫排斥胚胎分割和胚胎移植(2)选择性克隆化培养和抗体检测每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体(3)显微注射技术动物体细胞核移植11解
20、析：(1)病毒营寄生生活，所以在体外必须用活细胞来培养。(2)在制备单克隆抗体的过程中，应用的动物细胞工程技术是动物细胞融合和动物细胞培养。(3)图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是已免疫的B(或浆)细胞，该细胞能够产生抗体，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射特定的物质是抗原。图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的病毒、聚乙二醇或电激等诱导。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、并可大量制备等优点。(4)动物细胞体外培养需要满足的条件有：无菌、无毒的环境：消毒、灭菌；添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以清除代谢废物；营养物质；适宜的温度和pH；一定的气体环境：95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2(维持培养液的pH)。答案：(1)活细胞寄生(2)动物细胞融合和动物细胞培养(3)已免疫的B淋巴(浆)抗体抗原(或狂犬病病毒)病毒(或仙台病毒)特异性强、灵敏度高、并可以大量制备(4)一定的气体环境
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