1、菊 花 的 组 织 培 养知识与技能1.了解植物组织培养的基本过程，掌握影响植物组织培养的因素。2.了解MS培养基的成分、配制方法。3.掌握外植体的消毒、接种、培养等方法。4.练习并制作植物组培苗的物理模型。过程与方法1.根据菊花植物组织培养的过程，掌握植物组织培养的一般方法及无菌操作的要求。2.学会分析组织培养过程的影响因素。情感态度与价值观激发学生学科学用科学的热情，培养学生求真务实的学习态度。教学重点植物组织培养过程中使用的无菌技术。教学难点植物组织培养过程中使用的无菌技术。教学工具1.演示实验及小组实验的操作器具2.多媒体课件课时安排2课时教学过程第一课时：基础知识教学引入：植物常见的
2、无性繁殖方式有：扦插、压条、嫁接，实际上我们利用植物的一块组织，甚至一个细胞，就能培养出完整的植株个体，所依赖的植物组织培养技术也是一种无性繁殖方式。运用这种技术，可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致；可以培育出大量脱毒的幼苗，提高作物的产量；可以实现花卉的连续生产， 从而不受开花季节的限制这项富有挑战性的工作，不仅会使你学到新的技术，还会带给你丰富的体验，宝贵的启迪。一、植物组织培养的原理与基本过程请同学们阅读教材P32-33内容，理解下列内容：1.找出细胞分化、愈伤组织、脱分化和再分化的概念；引导学生回顾细胞分化的概念、特点和根本原因。问题：这些高度分化的植物细胞能不能培养成一个
3、完整的植物体呢？学生思考回答讲述：高度分化的植物细胞在结构和功能上都比较专一，要培养成完整的植株并不容易，但在离体状态时，给予一定的条件还是可以发育成完整的植株，大家知道原因是什么吗？学生回答：植物细胞具有全能性讲述：同学们讲得很好，植物细胞虽已高度分化，但细胞内有该物种全套的遗传物质，具有发育成完整个体的潜能。学生阅读后回答：脱分化（又称去分化）：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。愈伤组织：植物组织或细胞离体培养一段时间后，会通过细胞有丝分裂，形成一种
4、新的组织，其细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。2.植物组织培养过程展示植物组织培养的流程图3.尝试为植物组织培养技术下定义：就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整植株的过程。二、影响植物组织培养的因素师生共同分析：1、外植体的选择2、营养条件：3、植物激素问题指导阅读：植物激素浓度的影响如何？植物激素使用先后顺序的影响如何？植物激素用量比例的影响如何？师生共同总结4.环境条件：pH、温度、光照等条件的影响5.无菌条件：三、实验操作学生阅读相关知识内容，了解实验操
5、作的基本知识。（一）制备MS固体培养基MS培养基含有20多种营养成分，实验室常使用4保存的配制好的培养基母液来制备。1.配制各种母液（MS培养基的配方参见附录3，P84）大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，铁盐浓缩100倍，有机物浓缩100倍。激素类常按1mgml的质量浓度单独配制成母液。2.配制培养基菊花组织培养常用培养基：12MS+NAA0.1mgL3.灭菌高压蒸汽灭菌，121，20分钟左右。（二）外植体消毒教师分析讲解：外植体先用流水冲洗大约20分钟，用无菌吸水纸吸干表面的水分，放入体积分数为70的酒精中摇动2-3次，持续6-7秒，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。取出后仍用吸水纸
6、吸干外植体表面水分，放入质量分数为0.1的升汞溶液中1-2分钟。取出后，在无菌水中清洗3次，用无菌纸吸干。（三）接种教师进行演示实验，分析讲解。然后学生分小组进行操作实验。（四）培养温度18 22；光照12小时每天。（五）移栽打开封口膜，让试管苗在培养间生长几日，这个过程叫炼苗。学生讨论移栽时注意事项教师分析，要关注温度和湿度。（六）栽培教学总结本节课主要学习了植物组织培养的基本过程，与学生一起回忆了细胞分化、愈伤组织、脱分化、再分化等基本概念。并学习了影响植物组织培养的各种因素。重点学习了菊花组织培养的实验操作过程，尤其是接种的演示实验，学生分小组练习接种过程，增强了学生的动手能力，同时加强
7、了学生对生物学是一门实验科学的认识。板书设计（一）植物组织培养的基本过程外植体脱分化 愈伤组织 再分化 根或芽 生长发育 植物个体（二） 影响植物组织培养的因素1.外植体2.培养条件3.植物激素4.环境条件5.无菌条件（三）实验操作步骤课堂反馈1.植物组织培养过程中由愈伤组织分化形成根或芽等器官的过程称为( C ) A. 脱分化 B. 去分化 C. 再分化 D. 脱分化或去分化2无菌技术是植物组织培养获得成功的关键 , 以下说法错误的是 ( D )A.由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差 ,对无菌操作的要求非常严格B.对培养基及器械用高压蒸汽灭菌C.对培养材料进行表面灭菌时一方面要考虑药剂的消毒效果 ,另一方面还要考虑植物材料的耐受能力D.对培养材料可用高压蒸汽灭菌 3要将菊花茎段细胞培养成完整的植株 , 需要 ( C ) 具有完整细胞核的细胞 离体状态 导入外源基因一定的营养物质和激素选用生长旺盛的嫩枝A. B. C. D. 课后作业练习制作植物组培苗的物理模型。