1、第2节 动物细胞工程 第1课时 动物细胞培养 第2章 细胞工程 课标内容要求1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织、分散成单个细胞后，在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。2简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。核心素养对接 1生命观念：运用稳态与平衡观，分析动物细胞培养的条件。2科学思维：采用归纳与概括、演绎与推理等方法，用文字和图示说明动物细胞培养的过程。3社会责任：对干细胞培养用于人类疾病治疗等社会热点问题进行科学评价。必备知识聚焦概念 NO.1一、动物细胞培养的概念从动物体中取出相关的组织，将它分散成_，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞
2、_的技术。单个细胞生长和增殖二、动物细胞培养的条件1营养条件(1)合成培养基：将细胞所需的营养物质按_严格配制而成。(2)天然成分：_等。(3)一般使用_培养基，即培养液。种类和所需量血清液体2无菌、无毒的环境(1)培养液和培养用具_处理。(2)_环境下操作。(3)培 养 液 定 期 更 换 的 目 的：清 除 代 谢 物，防 止_。灭菌无菌细胞代谢物积累对细胞自身造成危害3温度、pH 和渗透压(1)适宜的温度：哺乳动物多以_ 为宜。(2)适宜的 pH：多数细胞生存的适宜 pH 为_。(3)适宜的渗透压。4气体环境：95%空气和 5%CO2。(1)O2 的作用：_。(2)CO2 的主要作用：_
3、。(36.50.5)7.27.4细胞代谢所必需的维持培养液的pH三、动物细胞培养的过程基于动物细胞培养的过程，完成下面的问题：(1)过程的处理方法有：_。(2)过程为_培养，培养的动物细胞有两类：悬浮在_中生长增殖；_生长增殖。(3)进行过程时，悬浮培养的细胞直接用_收集；贴壁细胞需要使用_等处理，然后用_收集。(4)过程为_培养，进行过程的原因主要有：细胞密度过大、_积累、_缺乏和接触抑制等。机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处原代培养液贴附于某些基质表面离心法胰蛋白酶离心法传代有害代谢物营养物质理的方法四、干细胞培养及其应用1干细胞功能：在一定条件下，可以分化成_。2干细胞的存在：_、_和_
4、等多种组织和器官中。3干细胞的种类(1)胚胎干细胞（ES细胞）存在：_中功能：具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的_和_甚至_的潜能其他类型的细胞早期胚胎骨髓脐带血早期胚胎所有组织器官个体(2)成体干细胞存在：成体组织或器官，包括骨髓中的_、神经系统中的_和睾丸中的_功能：只能分化成_，不具有发育成_的能力(3)诱导多能干细胞（iPS细胞）来源：体外诱导_产生应用：分化形成各种功能细胞，用于治疗疾病应用优点：避免_造血干细胞神经干细胞精原干细胞特定的细胞或组织完整个体体细胞免疫排斥反应判断对错(正确的打“”，错误的打“”)1多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜 p
5、H为6.87.0。()提示：多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜 pH 为 7.27.4。2动物细胞培养要定期更换培养液，其目的是便于清除代谢物，防止代谢物积累对细胞自身造成伤害。()3动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。()提示：动物细胞培养技术的原理是细胞增殖。4制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理。()提示：应该用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。5培养动物细胞的第一代(即第一次细胞增殖)被称为原代培养。()提示：原代培养指动物组织经处理后的初次培养。6胚胎干细胞和成体干细胞都具有形成机体的所有组织和器官，甚至个体的潜能。()提示：成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特
6、定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。关键能力突破重难 NO.2核心点一 核心点二 动物细胞培养的过程1动物细胞培养过程2动物细胞培养过程中酶的处理(1)用酶“两次”处理的目的：第一次使用的目的是使组织细胞分散开；第二次使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，便于分散后继续培养。(2)使细胞分散开的原因：一是能保证细胞所需要的营养供应；二是能保证细胞内有害代谢物的及时排出。(3)不能用胃蛋白酶处理：由于大多数动物细胞培养的适宜 pH 为7.27.4，而胃蛋白酶发挥作用的最适 pH 为 2.0 左右，因此不能用胃蛋白酶使细胞分散开。3有关动物细胞培养知识点可归纳为 4 个“2”(1)培养材料为
7、“2”：即动物胚胎、幼龄动物的组织和器官。(2)培养过程为“2”：即原代培养、传代培养。(3)胰蛋白酶使用“2”次：即原代培养和传代培养中均使用，目的是使细胞分散开。(4)细胞生长特点有“2”个：即贴壁生长和接触抑制。1动物细胞培养过程中有接触抑制现象，这一现象说明了细胞膜具有什么功能？细胞膜接受信息后，细胞停止分裂又说明了什么？提示：细胞培养过程中的接触抑制说明了细胞膜能进行细胞间的信息交流。细胞膜接受信息后，细胞停止分裂，说明了细胞膜接受的信息能够传递到细胞核。2为什么动物细胞培养中有贴壁生长的特性？提示：动物细胞膜上有糖蛋白使细胞具有黏着性。3根据癌细胞的特点，思考一下培养的癌细胞有没有
8、接触抑制现象。提示：癌细胞细胞膜上糖蛋白减少，细胞的黏着性降低，在适宜的条件下可以无限增殖，因此培养的癌细胞无接触抑制现象，在培养瓶中能够生长成多层。1下图为肾脏上皮细胞培养过程示意图，下列叙述不正确的是()A甲乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中进行原代培养C丙和丁过程均会出现细胞贴壁和接触抑制现象D丁过程是传代培养的细胞，该过程体现了动物细胞的全能性甲 乙 丙 丁D 甲乙是组织细胞的分离，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分解细胞间蛋白质，制备细胞悬液，A 项正确；丙过程还未分瓶，属于原代培养，培养基中需要添加血清，B 项正确；在动物细胞培养过程中会出现细胞贴壁和
9、接触抑制的现象，C 项正确；丁过程已经分瓶培养，属于传代培养，丁过程并没有体现动物细胞的全能性，D 项错误。2如图所示是某动物细胞培养时，培养液中活细胞和死亡细胞密度统计结果，下列相关叙述错误的是()A实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞B培养液中应适当加入青霉素、链霉素，以避免杂菌污染C曲线 bc 段变化的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢物积累等D培养至第 6 d 时，新产生的细胞数等于死细胞数D 实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞，A 正确；培养液中应适当加入青霉素、链霉素等一定量的抗生素，以避免杂菌污染，B 正确；曲线 bc 段表示活细胞密度减少
10、，而此时间段内死细胞密度增加，产生这种变化的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢物积累等，C 正确；培养至第 6 d 时，活细胞数等于死细胞数，D 错误。动物细胞培养与植物组织培养的比较列表比较项目植物组织培养动物细胞培养 理论基础植物细胞的全能性细胞增殖不同点 前处理无菌、离体无菌；用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理项目植物组织培养动物细胞培养 取材植物较幼嫩的部位或花药等动物胚胎、幼龄动物的器官或组织 培养基性质固体液体 不同点培养基成分水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素等糖类、氨基酸、无机盐、维生素等项目植物组织培养动物细胞培养 不同点结果最终产生新个体，体现了细胞的全能性产生大量细胞，
11、不形成新个体 相同点都需人工条件下的无菌操作；都需要适宜的温度、pH 等条件；都进行有丝分裂，都不涉及减数分裂1动物细胞培养和植物组织培养的目的有什么不同？提示：动物细胞培养是为了获得大量的动物细胞或细胞产物；植物组织培养是为了获得新个体或细胞产物。2动物细胞培养和植物组织培养过程中细胞分裂的方式相同吗？提示：相同，都是有丝分裂。下列属于动物细胞培养与植物组织培养的区别的是()A动物细胞培养基与植物细胞培养基的成分有所不同B动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C动物细胞培养可发生遗传物质改变，而植物组织培养不能D植物组织培养和动物细胞培养都体现了细胞的全能性A 动物细胞培养所用的培养基与植物组织
12、培养所用的培养基的成分不同，如培养动物细胞的培养基需加入血清，而植物组织培养所用的培养基则不需加入血清；动物细胞培养与植物组织培养都需要在无菌、人工控制的条件下进行；动物细胞培养与植物组织培养过程中都可发生遗传物质的改变；植物组织培养最终能够形成完整的植物体，能体现植物细胞的全能性，动物细胞最终不能被培养成新的动物，不能体现动物细胞的全能性。应用创新提升素养 NO.3为了初步检测药物 X 和 Y 的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾(溶剂)的药物 X 或 Y，培养过程及结果如下所示。实验结果 组别细胞个数(个/孔)对照7.8106
13、药物 X6.7104 药物 Y5.3105本案例考查学生设计对照实验和对实验结果的交流讨论的能力。(1)对照组应加入的成分是什么？(科学探究)(2)根据实验结果，判断药物 X、药物 Y 有没有抗癌作用？如果有抗癌作用，哪一种药物抗癌效果更好？(科学探究)提示：(1)对照组中应加入等体积的二甲基亚矾(溶剂)。(2)药物 X、药物 Y 都有抗癌作用。药物 X 的抗癌效果更好。课堂小结知 识 网 络 构 建核 心 语 句 背 诵 1.动物细胞培养的培养基为液体培养基，含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素等成分，还要加入血清等天然成分。2.培养动物细胞的 CO2 培养箱中含有 95%的空气和 5%的 CO
14、2。3.原代培养和传代培养均需用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞。4.培养的动物细胞有贴壁生长和接触抑制现象。5.干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞。6.体细胞经体外诱导能够形成类似胚胎干细胞的诱导多能干细胞。课堂检测巩固素能 NO.41 3 5 2 4 1下列哪项条件不是动物细胞培养所需要的()A无菌、无毒的环境B充足的营养物质C适宜的温度和 pHD95%的空气和 5%的氧气D 二氧化碳培养箱的气体条件是 95%的空气和 5%的二氧化碳。2 1 3 4 5 2动物细胞培养过程的顺序是()原代培养 传代培养 胰蛋白酶处理组织，形成单个细胞，制成细胞悬液A B C DD 动物细胞培养是用动物胚胎或幼
15、龄动物器官通过胰蛋白酶处理制成细胞悬液，再通过原代培养和传代培养得到细胞株。3 1 2 4 5 3动植物体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是()A都需用 CO2 培养箱B都需用液体培养基C都要在无菌条件下进行D都可体现细胞的全能性C 植物组织培养不需要用 CO2 培养箱，用的是固体培养基。动物细胞培养是为了获得更多的动物细胞，不能体现细胞的全能性。4 1 2 3 5 4关于 iPS 细胞及应用的说法，正确的是()AiPS 细胞是从早期胚胎中获取的B造血干细胞是一种 iPS 细胞C采用不同的方法可将成纤维细胞诱导产生 iPS 细胞DiPS 细胞诱导基因突变可分化成各种组织细胞C iPS 细胞
16、是体细胞体外诱导产生的干细胞，诱导 iPS 细胞产生的方法有多种。iPS 细胞分化成各种组织细胞是基因选择性表达的过程。2 4 5 1 3 5某研究小组进行药物实验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题。(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。2 4 5 1 3(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是_。细胞培养应在含 5%CO2 的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_。(3
17、)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物实验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需要用_处理。(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_。2 4 5 1 3 解析 癌细胞具有无限增殖的特点，故相同培养条件下，肝肿瘤细胞数量多于正常肝细胞数量。动物细胞培养需提供无菌环境，如向培养液中加入适量的抗生素可防止细菌的污染；需提供一定的营养，如向培养基中加入适量血清，以便补充合成培养基中缺乏的物质；需提供一定的气体环境，如向恒温培养箱中加入 5%的 CO2，目的是维持培养液的 pH。答案(1)多(2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 维持培养液的 pH(3)停止 多 胰蛋白酶(4)抗生素点击右图进入 课 后 素 养 落 实 谢谢观看 THANK YOU!