1、1.4蛋白质工程的崛起基础巩固1蛋白质工程的基本流程是()蛋白质分子结构设计DNA合成预期蛋白质功能据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列A.B.C.D.答案C2蛋白质工程中需要直接进行操作的对象是()A.氨基酸结构B.蛋白质空间结构C.肽链结构D.基因结构解析蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求。其目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质结构进行分子设计,但因为基因决定蛋白质,因此对蛋白质的结构进行设计改造,归根到底,还需对相应的基因进行操作,按要求进行修饰加工改造,使之能
2、控制合成人类需要的蛋白质。对基因进行改造的优点:蛋白质是由基因控制合成的,对基因进行操作较容易,而且可以遗传。答案D3科学家将干扰素基因进行定点突变,导入大肠杆菌使之表达,使干扰素第十七位的半胱氨酸改变成丝氨酸,结果大大提高了干扰素的储存稳定性。该生物技术为()A.基因工程B.蛋白质工程C.基因突变D.细胞工程解析基因工程是通过对基因的操作,将符合人们需要的目的基因导入适宜的生物体内,使其高效表达,从中提取所需的蛋白质,或表现某种性状,蛋白质产品仍然为天然存在的蛋白质;而蛋白质工程却是对控制蛋白质合成的基因进行改造,从而实现对其编码的蛋白质的改造,所得到的已不是天然的蛋白质。题目的操作中涉及的
3、基因显然不再是原来的基因,其合成的干扰素也不是天然干扰素,而是经过改造的具有人类所需优点的蛋白质,因而整个过程利用的生物技术应为蛋白质工程。答案B4蛋白质工程在设计蛋白质结构时依据的是()A.基因功能B.蛋白质功能C.氨基酸序列D.mRNA密码子序列答案B5当前医学上,蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代治疗剂。基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是()A.都与天然产物完全相同B.都与天然产物不相同C.基因工程药物与天然产物相同,蛋白质工程药物与天然产物不相同D.基因工程药物与天然产物不相同,蛋白质工程药物与天然产物完全相同答案C6增加玉米细胞中赖氨酸含量最有效的途径是()A.
4、将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞B.切除玉米细胞中天冬氨酸激酶基因和二氢吡啶二羧酸合成酶基因C.修饰天冬氨酸激酶基因和二氢吡啶二羧酸合成酶基因的个别碱基D.将根瘤菌的固氮基因导入玉米细胞解析玉米中赖氨酸的含量比较低,原因是赖氨酸合成过程中的两种关键酶天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶,其活性受细胞内赖氨酸浓度的影响较大,当赖氨酸浓度达到一定量时,就会抑制这两种酶的活性。如果我们将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸,将二氢吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺变成异亮氨酸,就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍。通过改变有关基因的个别碱基,从而改变基因控制合
5、成的蛋白质(酶)的结构来达到目的,属于蛋白质工程。答案C7下列对物质的改造不属于蛋白质工程范畴的是()A.胰岛素的改造B.抗体的改造C.酶的改造D.性激素的改造解析性激素属于固醇,不是蛋白质。答案D8蛋白质工程又称第二代基因工程。下图为蛋白质工程流程图,图中A、B在遗传学上依次表示()A.转录和翻译B.翻译和转录C.复制和转录D.传递和表达答案A9下图是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图。据图回答下列问题。(1)获得A有两条途径:一是以A的mRNA为模板,在酶的催化下,合成互补的单链DNA,然后在的作用下合成双链DNA,从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质的序列,推测出相应
6、的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其DNA的序列,再通过化学方法合成所需基因。(2)利用PCR技术扩增DNA时,需要在反应体系中添加的有机物质有、4种脱氧核糖核苷酸和耐热性的DNA聚合酶,扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。(3)由A和载体B拼接形成的C通常称为。(4)在基因工程中,常用C处理D,其目的是。解析(1)以A的mRNA为模板,在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA,然后再以该单链DNA为模板,在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA;根据目标蛋白质的氨基酸序列可推测出相应的mRNA序列,然后根据碱基互补配对原则推测出其DNA的脱氧核苷酸序列,再通过化学方法利用DNA合成仪合成所
7、需基因。(2)利用PCR技术扩增目的基因时,需要提供目的基因作为模板,添加引物来引导子链的形成,添加4种脱氧核糖核苷酸(即dCTP、dATP、dGTP、dTTP)作为原料,需要耐热性的DNA聚合酶来催化子链的形成;扩增过程可在PCR扩增仪中完成。(3)目的基因A和载体B拼接形成的C通常称为重组DNA。(4)基因工程中,常用Ca2+处理细菌细胞,使之成为感受态细胞,有利于其吸收重组DNA分子,提高受体细胞的转化率。答案(1)逆转录DNA聚合酶氨基酸脱氧核苷酸(2)引物模板DNA(3)重组DNA(其他合理答案也可)(4)提高受体细胞的转化率(其他合理答案也可)能力提升1下列关于蛋白质工程的说法,正
8、确的是()A.蛋白质工程以基因工程为基础B.蛋白质工程就是酶工程的延伸C.蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造 D.蛋白质工程只能生产天然的蛋白质解析蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程是以基因工程为基础的,所以又称为第二代基因工程。蛋白质工程不仅能对现有蛋白质进行改造,而且可以制造新的蛋白质。答案A2下列不属于蛋白质工程的研究内容的是()A.分析蛋白质分子的精细结构B.对蛋白质进行有目的的改造C.分析氨基酸的化学成分D.按照人的意愿将天然蛋白质改造成新的
9、蛋白质解析蛋白质工程就是指根据蛋白质的精细结构和生物功能之间的关系,按照人的意愿改造蛋白质分子,形成自然界不存在的蛋白质分子。为了改造某种蛋白质分子,必须对其精细结构进行分析,但不包括对组成蛋白质的氨基酸的化学成分的分析。答案C3某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似,只是对热稳定性较差,进入人体后容易失效。现要将此酶开发成一种片剂,临床治疗食物的消化不良,最佳方案是()A.对此酶中的少数氨基酸进行替换,以改善其功能B.将此酶与人蛋白酶进行拼接,形成新的蛋白酶C.重新设计与创造一种全新的蛋白酶D.减少此酶在片剂中的含量解析要想使蛋白酶的热稳定性有所提高,就要改变蛋白质的
10、结构,此类问题一般是对蛋白质中的个别氨基酸进行替换。答案A4下列有关蛋白质工程的说法,正确的是()A.蛋白质工程无需构建基因表达载体B.通过蛋白质工程改造后的蛋白质有的仍是天然的蛋白质C.蛋白质工程需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶D.蛋白质工程只是中心法则的简单逆转解析蛋白质工程的基本流程:从预期的蛋白质功能出发,设计预期的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。这是蛋白质工程特有的途径,接下来按照基因工程的一般步骤进行。因此,基因工程技术利用的工具(限制酶、DNA连接酶、载体)以及操作流程也适用于蛋白质工程技术中,A项错误,C项正确;蛋白质工程生产的蛋白质是改
11、造后的蛋白质或者是新的蛋白质,B项错误。答案C5葡萄糖异构酶(GI)在工业上应用广泛,为提高其热稳定性,科学家对GI基因进行体外定点诱变,以脯氨酸(Pro138)替代Gly138,含突变体的重组质粒在大肠杆菌中表达,结果最适反应温度提高1012 。这属于()A.基因工程B.蛋白质工程C.发酵工程D.酶工程解析蛋白质工程的重点在于对已存在的蛋白质分子的改造。通常所说的酶工程是用工程菌生产酶制剂,而没有经过由酶的功能来设计酶的分子结构,然后由酶的分子结构来确定相应基因的碱基序列等步骤。因此,应选B。答案B6下列关于蛋白质工程和基因工程的比较,不合理的是()A.基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋
12、白质,而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质B.蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的,蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成C.当得到可以在-70 条件下保存半年的干扰素后,在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下,干扰素可以大量自我合成D.基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的解析基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质,而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质;蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的,蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成,这样产生的改变才能遗传下去;蛋白质不能自我合成;由于基因工程和蛋白质工程都是对基因
13、进行操作,因此,基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的。答案C7胰岛素可以用于治疗糖尿病,但是胰岛素被注射入人体后,会堆积在皮下,要经过较长时间才能进入血液,而进入血液的胰岛素又容易被分解,治疗效果受到影响。下图是用蛋白质工程设计的速效胰岛素的生产过程,请据图回答有关问题。(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键,图中构建新的胰岛素模型的主要依据是。(2)图中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是什么?(3)新的胰岛素基因与载体(质粒)结合过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。已知限制性核酸内切酶的识别序列和切点是GGATCC。请画出质粒被限制性核酸内切酶切割后所形成的黏性末端
14、:。DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?。(4)若将含有新的胰岛素基因的表达载体导入植物细胞中,最常用的方法是。(5)若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素,需用到的生物工程有、和发酵工程。答案(1)蛋白质(即新的胰岛素)的预期功能(2)根据新的胰岛素中氨基酸的序列,推测出相对应的脱氧核苷酸序列,然后利用DNA合成仪来合成新的胰岛素基因。(3)GCCTAG、GATCCG否(4)农杆菌转化法(5)蛋白质工程基因工程8黄曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中,它可以通过食物链进入动物体内并蓄积,引起癌变。某些微生物能表达AFB1解毒酶,将该酶添加在饲料中可以降解AFB1
15、,消除其毒性。请回答下列问题。(1)下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图。据图回答问题。含AFB1解毒酶基因的菌株总RNAcDNAAFB1解毒酶基因 酵母工程菌AFB1解毒酶在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株,经测定,甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶;乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶。过程应选择菌液的细胞提取总RNA,理由是。过程中,与引物结合的模板是。检测酵母工程菌是否合成了AFB1解毒酶,应采用法。(2)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是:从提高酶的活性出发,设计预期的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,找到相对应的序列。解析(1)因为甲菌液细胞中含解毒酶,说明解毒
16、酶基因在甲菌液细胞中可以表达,细胞中一定含有解毒酶基因转录出的mRNA。PCR扩增过程中,需要的模板是AFB1解毒酶基因的cDNA。基因工程的检测与鉴定阶段,在分子水平上需要进行三步检测,其中检测目的基因是否成功表达出蛋白质,所用方法是抗原抗体杂交法。(2)蛋白质工程的基本步骤是,从预期的蛋白质功能出发,设计预期蛋白质的结构,推测应有的氨基酸序列,找出相对应的脱氧核苷酸序列。答案(1)甲甲菌液细胞的AFB1解毒酶基因已转录生成mRNA,而在乙菌液细胞中该基因未转录AFB1解毒酶基因的cDNA抗原抗体杂交(2)脱氧核苷酸9(2015海南高考)在体内,人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽
17、链,此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原,进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段C后,产生A、B两条肽链,再经酶丙作用生成由51个氨基酸残基组成的胰岛素。目前,利用基因工程技术可大量生产胰岛素。回答下列问题。(1)人体内合成前胰岛素原的细胞是,合成胰高血糖素的细胞是。(2)可根据胰岛素原的氨基酸序列,设计并合成编码胰岛素原的序列,用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体,再经过细菌转化、筛选及鉴定,即可建立能稳定合成的基因工程菌。(3)用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时,培养液无抗原抗体反应,菌体有抗原抗体反应,则用该工程菌进行工业发酵时,应从中分离、纯化
18、胰岛素原。胰岛素原经酶处理便可转变为胰岛素。解析(1)激素由特异性的细胞合成,胰岛素(原)由胰岛B细胞合成,胰高血糖素由胰岛A细胞合成。(2)真核生物的目的基因可用人工合成的方法合成,可根据胰岛素原的氨基酸序列,设计并合成编码胰岛素原的DNA序列(即目的基因);合成的DNA序列经过修饰与质粒构建胰岛素原基因表达载体,导入细菌体内,经转化后筛选鉴定,最终得到能稳定合成胰岛素原的基因工程菌。(3)培养液无抗原抗体反应,菌体有抗原抗体反应,说明目的基因的表达产物存在于细胞内,没有分泌出来。因此利用该工程菌进行工业发酵时,目的基因的表达产物需要从菌体中分离和纯化。答案(1)胰岛B细胞胰岛A细胞(2)DNA胰岛素原(3)菌体