1、单元测试二十一 微生物的培养与应用(满分：100分 时间：90分钟)一、选择题（每小题2分，共50分）1. 下列对菌落的表述不正确的是A. 每个菌落都是由多种细菌大量繁殖而成B. 各种霉菌在面包上生长形成的不同颜色的斑块即为菌落C. 噬菌体能使固体培养基上的细菌裂解，菌落变得透明D. 细菌和真菌在培养基上形成的菌落形态不同2. 将谷氨酸棒状杆菌接种到四个相同的培养基中，放在以下条件下培养，其中菌落形成最快的是 3. 若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起，要将它们分离可采用的培养基是A加食盐的培养基和蛋白胨培养基B伊红美蓝培养基和无氮培养基C斜面培养基和液体培养基 D加青霉素培养基和伊红美蓝培养基4
2、. 生物正常生长离不开生长因子。下列有关生长因子的叙述中，错误的是A生长因子是微生物正常生长必需的微量有机物B生长因子是微生物体内酶和核酸的重要组成成分C生长因子是微生物生命活动的主要能源物质D微生物体内往往缺乏合成生长因子的酶或合成力有限5. 某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R，比较理想的方法是采用()A天然培养基B稀释涂布平板法C利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基D用显微镜直接观察、寻找，再培养6. 稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是 A操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养
3、基表面C不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理7. 培养基、培养皿、接种环、实验操作员的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线灭菌高压蒸汽灭菌巴氏消毒法A B C D8.微生物的接种技术最常用的有平板划线法 稀释涂布平板法 斜面接种 穿刺接种A. B. C. D.9. 下列是对四种微生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是微生物种类乳酸菌根瘤菌硝化细菌衣藻A能源糖类光能NH3光能B碳源糖类CO2CO2CO2C氮源NO3N2NH3NO3D代谢类型异样厌氧型自养需养型自养需养型自养需养型10
4、. 将大肠杆菌菌种从菌种试管接种到另一支试管的操作下列说法有误的一项是A.整个接种过程都要在酒精灯的火焰附近进行B.接种环放在酒精灯火焰上灼烧之后即可伸入菌种试管挑取少许菌种C.菌种试管口和待接种的试管口接种前后都要通过酒精灯火焰2至3次D.带菌的接种环应在培养基斜面上由底部向上轻轻划“S”型曲线11. 下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中，错误的是A.操作顺序为配制培养基、调节pH、分装、灭菌、包扎、搁置斜面B.琼脂在制备固体培养基时，可作为凝固剂C.将培养基冷却至50左右时进行搁置斜面D.将培养基趁热分装到试管中，培养基的高度约为试管高度的1512. 细菌培养过程中分别采用了高压蒸气
5、、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 A接种环、手、培养基 B高压锅、手、接种环C培养基、手、接种环 D接种环、手、高压锅13. 有关平板划线操作正确的是（ ）A使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后无需通过火焰，马上塞上棉塞即可C将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D最后将平板倒置，放人恒温培养箱中培养14. 通常用来作为菌种鉴定的重要依据是A.菌落的特征 B.细菌的形态 C.细菌体积 D.细菌结构15. 用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 A未接种的选择培养基 B未接种的
6、牛肉膏蛋白胨培养基C接种了的选择培养基 D接种了的牛肉膏蛋白胨培养基16. 请选出下列正确的取样培养操作步骤土壤取样 称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中吸取0.1ml进行平板涂布 依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A B C D 17.(2011揭阳模拟)下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是()A微生物培养前，需对培养基进行消毒B测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源18.关于灭菌和消毒的理解不正确的是()A灭菌是指杀灭环境中一切微生物
7、的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌实质是相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等19.产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A一个细菌，液体培养基 B许多细菌，液体培养基C一个细菌，固体培养基 D许多细菌，固体培养基20.消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理()皮肤饮用水牛奶注射器培养皿接种环培养基果汁酱油手术刀A BC D以上全部21.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()A以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B以尿素为唯
8、一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂22.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是()A氮源物质为该微生物提供必要的氮素B碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D水是该微生物的营养要素之一23.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是()A计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D计算、称量、灭菌、溶化、倒平板24.如右图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方
9、法正确的是()A操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B划线操作须在火焰上进行C在5区域中才可以得到所需菌落D在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌25.在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出()A乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌B固氮细菌、大肠杆菌、放线菌C固氮细菌、霉菌、放线菌D固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌二、简答题1. 利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景。某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行了如下实验。 (1)
10、实验步骤： 配制以 为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是 。 将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现 。 将接种针用 法灭菌后，从中的培养基上挑取一定量细菌，接种入 （固体、半固体、液体）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖。配制与相同的培养基，并加入少量碘液，使培养基呈蓝紫色。用 法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上。培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现 现象的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。 (2)上述所有倒平板和接种操作，都应在超净台上
11、附近进行。(3)上述实验步骤中，从用途看，所用培养基属于 培养基，所用培养基属于 培养基。2. 下表是某微生物培养基成分。请据此回答： （1）培养基中营养成分共有_类。 （2）该培养基可培养的微生物类型是_。 （3）若不慎将过量NaCl加入培养基中，如果不想浪费此培养基，可再加入_，用于培养_。（4）若除去成分，加入（CH2O），该培养基可用于培养_。（5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后、分装前，要进行的是_。（6）表中各成分含量确定的原则是_。（7）若该培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是_。3. 有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解
12、原油的菌株。回答问题：（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为惟一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。4. 乙醇等绿色能源的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：（1）玉米秸秆预处理后，因该选用_酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。（2）从以下哪些
13、微生物中可以提取上述酶？_（多选）A酿制果醋的醋酸菌 B生长在腐木上的霉菌C制作酸奶的乳酸菌 D生产味精的谷氨酸棒状杆菌E反刍动物瘤胃中生存的某些微生物（3）若从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为_（按功能分），培养基中的碳源为_ 。（4）发酵阶段需要的菌种是_，生产酒精是要控制的必要条件是_ 。5.某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取1 g，置于经过灭菌处理的_(填“固体”或“液体”)培养基中，28振荡培养。(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行_处理。之后，将菌液涂布
14、接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，30条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈_状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计_作为空白对照。(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是_，则说明此种菌能够_。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用_法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。答案一、单选题1. A2. B3. B4. C5. C6. C7. A8. B9. C10. B11. A12. C 13. D 14. A15. D16. C17.【解析】微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用
15、菌落计数法而一般不用活菌计数；分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落数在30300间的平板进行计数；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源。【答案】A18.【解析】灭菌是指杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。【答案】A19.【解析】菌落是一个或几个细菌的子细胞群体，在固体培养基上肉眼可见，是作为菌种鉴定的重要依据，若是多种细菌形成的菌落则不是标准菌落。【答案】C20.【解析】消毒指用比较温和的方法杀死微生物的营养细胞，适用于那些不耐高温的液体。如牛奶、果汁、酱油，这样可以使其中的营养成分不被破坏。另外对要求不是很严格的皮肤、饮用水也用消毒的方法处理。
16、而对于严格要求的接种环、手术刀等必须进行灭菌处理。【答案】A21.【解析】在以尿素为唯一氮源的培养基中，不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长，而分解尿素的细菌能利用尿素作氮源，将尿素分解为氨，使pH升高。若培养基中加入酚红指示剂，指示剂将变红。此培养基既属于选择培养基，又属于鉴别培养基。【答案】A22.【解析】该微生物以CO2为唯一碳源，但CO2不能为微生物提供能量，不属于能源物质。【答案】B23.【解析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，应先根据需要计算各成分用量，然后称量、溶化、灭菌、倒平板。【答案】C24.【解析】本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是
17、在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。【答案】D25.【解析】综合分析可知选择培养基依次选择的是：固氮细菌、霉菌和放线菌。【答案】C二、简答题1. (1)淀粉 琼脂菌落 灼烧 液体 稀释涂布平板（涂布分离） 浅色范围大（较大透明圈）(2)酒精灯火焰 (3)选择 鉴别2. （1）三；（2）自养型微生物；（3）含碳有机物/金黄色葡萄球菌；（4）固氮微生物；（5）调整pH；（6）依微生物的生长需要来确定；（7）琼脂(或凝固剂)。3. （1）原油 选择 （2）平板划线法 稀释涂布平板法（3）强 （4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰4. 5.【解析】(1)因为后面要进行涂布，所以应该用液体培养基来培养。(2)减小培养液菌体浓度一般用稀释方法。由于题目要求选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，所以培养基就应只以淀粉为碳源。倒置可以减少培养基受污染，为排除其他因素影响，需要设置未接种的空白的培养基作对照组。(3)淀粉被水解，培养基会出现透明圈的现象。用平板划线法来培养，可进一步纯化菌种。【答案】(1)液体(2)系列稀释(或“梯度稀释”)淀粉倒置未接种的空白培养基(或“接种等量无菌水的培养基”)(3)出现透明圈分泌淀粉酶使淀粉发生水解平板划线