1、第46课时植物的组织培养技术及DNA和蛋白质技术1通过植物组织培养技术可以快速繁殖、生产药物及培育无病毒的植物等。据图甲、表乙回答问题：表乙：植物的花芽分别在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中的生长状况A组B组C组D组E组吲哚乙酸03 ppm3 ppm0.03 ppm0细胞分裂素00.2 ppm0.002 ppm1.0 ppm0.2 ppm花芽生长状况仍是组织切块形成愈伤组织愈伤组织分化出根愈伤组织分化出嫩芽稍生长(1)离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新的植物体的原因是_。(2)用植物组织培养方法诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状体结构，若包上人造种皮，制成人工种子，
2、可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。胚状体来源于离体的植物体细胞，其形成过程中要经过的生理变化大体上是图甲中_和_过程，在此过程中被培养的细胞始终受_的调节(内填序号)。(3)应用植物组织培养技术培养茎尖或根尖组织可获得无病毒植株，其原因是_。(4)从表乙的实验结果可看出：吲哚乙酸和细胞分裂素是实验中的两种重要物质。其中，新芽形成必需的条件是_；而在培养形成完整新个体的过程中，对它们的调控关键是_。2近十年来，PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图)，在很短的时间内，将DNA扩增几
3、百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)加热使DNA双链打开，这一步是打开_键，称为_，细胞中是在_的作用下使此键断裂的。(2)当温度降低时，引物与模板_端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个DNA分子，此过程中原料是_，遵循的原则是_。(3)PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的_和_。(4)PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为_、_、_三个步骤。如果下图为第一轮循环产物。请绘出以a链和b链为模板经过PCR扩增的产物。3下图为“DNA的粗提取与鉴定”的实验装置，请回答问题。
4、(1)实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中_含量较高。(2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水20 mL的目的是_，通过图B所示的步骤取得滤液，再在滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是_；图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是_。(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可滴加_溶液，结果丝状物被染成绿色。(4)a试管为对照组，b试管为实验组。a试管现象_；b试管现象_。在沸水中加热的目的是_，同时说明DNA对高温有较强的_。a试管在实验中的作用是_。b试管中溶液颜色的变化程度主要与_有关。4 2008年5月20日民政部等制订汶川大地震遇难人员遗体处理意见指出，无
5、法确认遇难者身份的，由公安部门提取可供DNA检验的检材以便事后身份辨认。事后的遗体辨认可借助于DNA杂交技术，即从遗体细胞与死者家属提供的死者生前生活用品中分别提取DNA，然后借助DNA杂交技术对遗体进行确认。据此回答：(1)为了确保辨认的准确性，需要克隆出较多的DNA样品。这需借助PCR技术。使用PCR技术的具体实验操作顺序是：按配方准备好各组分 离心使反应液集中在离心管底部设计好PCR仪的循环程序进行PCR反应。请写出图中方框的步骤：_，该步操作应特别注意的问题是_。A组B组C组遗体中的DNA碱基序列ACTGACGGTTGGCTTATCGAGCAATCGTGC家属提供的DNA碱基序列TGA
6、CTGCCAACCGAATAGCACGGTAAGACG(2)上表所示为分别从死者遗体和死者生前的生活用品中提取的三条相同染色体上的同一区段DNA单链的碱基序列，根据碱基互补配对情况进行判断，A、B、C三组DNA中不是同一人的是_。(3)为什么从死者体细胞与死者家属提供的其生前生活用品中分别提取的DNA可以完全互补配对？_。5对血红蛋白(Hb)的研究结果表明，血红蛋白实际上是由珠蛋白、原卟琳和二价铁离子(Fe2)所组成的结合蛋白质，由4条肽链各结合一个辅基即血红素，O2结合于Fe2上，血红蛋白与氧疏松结合形成氧合血红蛋白(HbO2)，这种氧合作用在氧分压高时容易进行，在氧分压低时易于解离。红细胞
7、结合和携带O2的过程并不影响Fe2，也就是说不会使之氧化为Fe3。Fe3无携带O2的能力。CO与Hb的亲和力大于O2，结合成HbCO后不能分离，致使Hb丧失运输O2和CO2的机能，这称为一氧化碳中毒即煤气中毒。(1)用凝胶色谱法分离血红蛋白时，待_接近色谱柱底端时，才用试管收集。血红蛋白因含_而呈现红色。(2)要使血红蛋白从红细胞中释放出来，可选用的方法是_。(3)红细胞具有运输氧的功能，是因为_。(4)亚硝酸盐为强氧化剂，进入人体后，可使血红蛋白失去运输氧的功能，导致人体组织缺氧，其可能的原因是_。6下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题：(1)图甲装置中，B是血红蛋白溶液
8、，则A是_；乙装置中，C溶液的作用是_。(2)图乙装置分离蛋白质的方法叫_，是根据_分离蛋白质的有效方法。(3)用乙装置分离血红蛋白时，待_时，用试管收集流出液，每5 mL收集一管，连续收集。7下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问题：(1)选用的材料合适与否是能否成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用_期的花粉可提高成功率。选择花粉时，一般要通过_来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是_。(2)上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中_。(3)胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规
9、则，是一种高度_的薄壁细胞，胚状体与_发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根。(4)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌。培养基，培养皿，接种环，花蕾，实验操作者的双手，三角锥形瓶。_(填编号)需要灭菌，_(填编号)需要消毒。(5)试管苗移栽到土壤前，通常要进行壮苗处理，应如何壮苗？_。答案 1(1)植物细胞具有全能性(2)脱分化再分化植物激素(3)植物的茎尖或根尖很少被病毒感染，甚至无病毒(4)细胞分裂素的浓度大于吲哚乙酸的浓度适当调控好不同培养时期的培养基中细胞分裂素与吲哚乙酸的浓度和它们的比例2(1)氢解旋解旋酶(2)3四种脱氧核苷酸碱
10、基互补配对原则(3)温度酸碱度(4)变性复性延伸如图3(1)DNA(2)使血细胞吸水涨破，释放DNA使滤液中的DNA溶于浓盐溶液使DNA析出(3)甲基绿(4)溶液不变蓝溶液变蓝加快颜色反应速度耐受性对照加入DNA(丝状物)的多少4(1)用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分PCR实验使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸汽灭菌(2)B、C(3)人体所有体细胞均由一个受精卵有丝分裂产生，其细胞核中均含有相同的遗传物质5(1)红色区带血红素(2)将红细胞置于蒸馏水中，加40%体积的甲苯，搅拌使之破裂并释放血红蛋白(3)红细胞中的血红蛋白与氧在氧分压高时容易结合，在氧分压低时又容易分离(4)亚硝酸盐可使血细胞中Fe2血红蛋白氧化成Fe3血红蛋白6(1)磷酸缓冲液洗脱血红蛋白(2)凝胶色谱法相对分子质量的大小(3)红色的蛋白质接近色谱柱底端7(1)单核镜检(显微镜观察)醋酸洋红(2)激素的种类及其浓度配比(3)液泡化正常受精卵(或受精卵)(4)(5)将试管苗移栽到经消毒过的培养基中生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中