1、高考资源网（） 您身边的高考专家专题22微生物的培养与应用考点1微生物的培养与应用1.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是( A )化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线消毒高压蒸汽灭菌巴氏消毒法A BC D解析：培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。2.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( C )可以用相同的培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用来计数活菌A
2、BC D解析：平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故错误。3.如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5，下列操作方法正确的是( D )A操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B划线操作须在火焰上进行C在5区域中才可以得到所需菌落D在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌解析：在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰旁进行。在
3、5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。4.(2013济南一模)白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子附着在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请回答下面的问题：(1)从自然菌样中筛选较理想生产用菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。白僵菌的菌样应从感病昆虫处采集。(2)分离白僵菌菌种的培养基属于选择培养基。在配制白僵菌培养基时加入蔗糖
4、、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于碳源营养物质。(3)白僵菌纯培养常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法(或稀释混合平板法)。(4)分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行灭菌处理，利用高温可以使微生物的蛋白质和核酸等物质发生变性。解析：选择培养基用于选择分离菌种。蔗糖属于微生物的碳源。微生物分离培养过程中，培养基、接种工具都要进行灭菌处理，其原理是高温使蛋白质、核酸变性而使细胞失去活性。考点2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数考点3分解纤维素的微生物的分离1.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( B )加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐 A B C D
5、解析：分离土壤中分解尿素的细菌，应该以尿素为唯一氮源，不用加硝酸盐来提供氮源；另外还要加葡萄糖提供碳源；加琼脂配制固体培养基，以利于分离、鉴定、计数等。2.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是( D )A涂布了一个平板，统计的菌落数是230B涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233解析：在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确
6、性，所以A、B不正确。C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，此时，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。3.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物：(1)在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；(2)在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；(3)在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。依次利用上述方法能从混杂的微生物群体中分离出( B )大肠杆菌霉菌放线菌圆褐固氮菌根瘤菌A、 B、C、 D、解析：利用(1)可以分离出圆褐固氮菌(自生固氮菌)，而不能分离出根瘤菌(共生)；利用(2)可以除去和而分离出，再用(
7、3)除去而分离出。4.下列有关刚果红染色法的叙述，不正确的是( C )A刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入B刚果红可以在菌落形成后加入C刚果红在菌落形成前倒平板时加入，加入的刚果红不需要灭菌D在菌落形成后加入刚果红时，刚果红不需要灭菌解析：从对两种筛选纤维素分解菌的方法进行比较分析入手，结合微生物培养过程无菌条件的控制方法来解答该题。刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，也可以在菌落形成后加入。若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红
8、，则所加刚果红要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影响纤维素分解菌菌落的形成；若在菌落形成后加入刚果红，则不需要灭菌。5.从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。 (1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境中采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从海滩等高盐环境中采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养。(3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。 获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法，获得图B效果的接种方法是平板划线法。(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行pH调整，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。解析：(1)嗜盐菌生活在高盐环境中，如：海滩等。(2)耐高温淀粉酶应存在于以淀粉为唯一碳源且在高温环境中生存的微生物体内。(3)从不同菌落之间的关系可以看出，A纯化微生物的接种方法是稀释涂布平板法，B纯化微生物的接种方法是平板划线法。(4)培养基配制时应先溶化，再调整pH，灭菌。- 3 - 版权所有高考资源网