1、蛋白质的提取和分离基础达标知识点一电泳、同工酶和蛋白质组学1电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷_的电极移动。 ()A相同 B相反 C相对 D相向2电泳实现样品中各种分子的分离是利用了 ()A各种分子带电性质的差异 B分子本身的大小不同C分子形状的不同 D以上都正确3下列关于同工酶的叙述正确的是 ()A同工酶是由多个亚基以共价键结合形成的复合物B同工酶对同一种底物有不同的专一性C同工酶是催化同一种反应，但结构不完全相同的同一种酶的多种形式D各种同工酶在电场电泳时，迁移速率相同4下列有关同工酶的概念，描述正确的是 ()A催化相同的化学反应，酶蛋白的分子结构、理化性质不同，电泳行为不同B
2、催化不同的化学反应C催化不同的化学反应，酶蛋白的分子结构、理化性质相同，电泳行为相同D催化相似的化学反应知识点二乳酸脱氢酶同工酶的提取和分离5在进行琼脂糖凝胶电泳前，用什么溶液溶解琼脂糖 ()A蒸馏水 B自来水C缓冲液 D蔗糖溶液6各种动物血清内乳酸脱氢酶同工酶的组成是不同的。可以通过比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶差异的大小来判断动物之间亲缘关系的远近。下列各种实验方法中，不能采用的是 ()A测乳酸脱氢酶同工酶的氨基酸序列B测控制乳酸脱氢酶同工酶合成的基因碱基序列C用电泳法比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶的电泳带D检测不同动物的乳酸脱氢酶同工酶的pH7透析法将蛋白质和其他小分子物质分离的原理是利用蛋
3、白质分子的 ()A水溶性 B不能透过半透膜的特性C胶体性 D带电性8右图表示对某蛋白质溶液进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果(类似于纸层析法分离色素)，下列相关叙述不正确的是()A蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电，电场中带电的蛋白质分子(或多肽)会向着与其所带电荷相反的电极移动B蛋白质在SDS聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速率完全取决于其所带净电荷多少C蛋白质在SDS聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速率基本取决于其相对分子质量大小D电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种，但也可能只有一种能力提升9下图是心脏、骨骼肌和脑中的乳酸脱氢酶同工酶的电泳图谱，据图分析下列说法中不正确的是 ()A3种器官中都含有5种乳酸脱
4、氢酶同工酶BLDH2在心脏中含量最高，在骨骼肌中含量最低C骨骼肌中含量最高的是LDH5，含量最低的LDH1D不同的器官同一种同工酶的含量不同，同一器官不同的同工酶含量差别不大10下列说法不正确的是 ()A在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变B缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成C电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内11蛋白质的分离与纯化是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述中，不正确的是 ()A根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B根据蛋白质分子所带电荷性质的差异
5、及分子大小等，可利用电泳法分离蛋白质C根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质D根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质12蛋白质各种特性的差异，可以用来分离不同种类的蛋白质。下列正确的是 ()A分子的形状、大小和溶解度B所带电荷的性质和多少C对其他分子的亲和力D以上三项都是13有关乳酸脱氢酶同工酶的描述中，正确的是 ()A它们的电泳行为相同B它们在人体各组织器官中的分布有显著差别C它们催化的化学反应不同D乳酸脱氢酶含有M亚基和H亚基，故有两种同工酶14电泳技术是在外电场作用下，利用分子携带的净电荷不同，把待测分子的混合物放在一定的介质(如琼脂糖凝胶)中进行分
6、离和分析的实验技术。利用电泳技术可以分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质和做亲子鉴定。下列图甲丁是电泳装置及相应电泳结果。请问答：(1)利用琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶时，需将提取的蛋白质样品加在图甲中的_(正极、负极)，理由是_。电泳过程中分子的迁移率除与本身所带净电荷的多少有关外，你认为还受什么因素的影响？(列出2种)_。(2)进行乳酸脱氢酶同工酶琼酯糖凝胶电泳时，当图乙中出现_的现象，即可停止电泳。(3)图丙是把含有21个氨基酸的多肽进行水解，得到的氨基酸混合物进行电泳的结果。故可推知该多肽由_种氨基酸组成。(4)图丁是通过提取某小孩和其母亲以及待测定4位男性的DNA，分别
7、由酶处理并扩增后，生成含有若干DNA片段的混合物，然后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱，该小孩真正生物学上的父亲是_，理由是_。15试回答下列“蛋白质的提取和分离实验”的有关问题：(1)为了提取和分离血红蛋白，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是_。(2)若要去除血清蛋白中的小分子杂质，采用图1装置。透析液是_，一段时间后，若向烧杯中加入双缩脲试剂，透析袋内溶液是否出现紫色？并说明判断的依据：_。(3)图2、图3分别表示电泳法分离蛋白质和纸层析法分离叶绿体中色素的结果。不同蛋白质得以分离是因为_；不同色素得以分离是因为_。条带c呈_色。个性拓展16请
8、回答下列有关问题：(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生_，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间内_表示。(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图：中的主要成分为_；中包含植酸酶等多种蛋白质。答案1B2D3C4A5C6D7B8B9D10D11A12D13B14(1)负极在碱性缓冲液中带负电荷的蛋白质在外加电场作用下会向正极移动电泳的电压、被测分子的大小、被测分子的形状、凝胶的种类密度等(2)溴酚蓝指示剂电泳到凝胶
9、底部(3)6(4)F2C和F2两者的DNA指纹图谱完全相同(2)乳酸脱氢酶同工酶提取液加样前，需与载体缓冲液混合，载体缓冲液中含有溴酚蓝指示剂，作为电泳进行程度的指示剂，当溴酚蓝指示剂电泳到凝胶底部意味着电泳结束。(3)图中电泳结果出现6条带，意味着含有6种氨基酸。(4)分析DNA指纹图谱可知，C和F2两者的DNA指纹图谱完全相同。15(1)防止红细胞吸水破裂(2)(磷酸)缓冲液出现紫色。双缩脲试剂可以透过半透膜，与袋内血清蛋白反应，生成紫色物质(3)不同蛋白质所带电荷性质、分子大小和形状不同，导致电泳时迁移速度不同不同色素在层析液中溶解度不同，导致层析时扩散速度不同黄绿16(1)菌斑植酸钠的分解速率(2)植酸和金属离子