1、专题2课题2(建议用时：30分钟)考点基本目标发展目标1.筛选菌株的原理与方法1,2,3,4,511,12,13，14,152.统计菌落数目的方法及设置对照6,7,83.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数9,10基本目标1下列属于菌落特征的是()菌落的形状菌落的大小菌落的多少隆起程度菌落颜色有无荚膜ABCDB解析不同种类的细菌所形成的菌落大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征，所以每种细菌在一定条件下所形成的菌落可以作为鉴定菌种的重要依据。单个细菌用肉眼是看不见的，故细菌的个体特征有无荚膜不能作为菌种鉴定的依据。2细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列
2、与此有关的说法正确的是()A乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B氮源不可能作为细菌的能源物质C琼脂是细菌生长和繁殖过程中不可缺少的一种物质D以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌D解析乳酸菌是异养生物，硝化细菌是自养生物，所利用的碳源物质是不同的，A项错误；有些物质既可作为氮源，又可作为细菌的能源物质，B项错误；琼脂不是细菌生长和繁殖必需的物质，是配制培养基的凝固剂，C项错误。3实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37 条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正
3、确的是()A链霉素能阻止结核杆菌的生长B链霉素对结核杆菌比对霍乱菌更有效C链霉素对结核杆菌比对伤寒菌更有效D链霉素可以用于治疗伤寒病人D解析从图中可以看见，这是含有链霉素的选择培养基，接种的三种细菌中，霍乱菌和结核杆菌都可以被杀灭，并且链霉素对结核杆菌杀灭的有效程度大于对霍乱菌，而伤寒菌正常生长不受影响，故链霉菌不能用于治疗伤寒病人。4下列有关微生物培养与应用的叙述，正确的是()A同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，所有碳源都能提供能量B用稀释涂布平板法统计样品中活菌数目，其结果往往比实际值低C要从多种细菌中分离出某种细菌，培养基要选用液体培养基D微生物不可缺少的微量有机物有氨基酸、维生素和蛋
4、白胨等B解析同一种物质可以既作碳源又作氮源，如牛肉膏，但自养微生物利用的无机碳源不提供能量，A项错误；用稀释涂布平板法统计样品中活菌数目，其结果往往比实际值低，B项正确；要从多种细菌中分离出某种细菌，培养基要选用固体培养基，C项错误；生长因子是微生物生长不可缺少的微量有机物，主要包括氨基酸、维生素、碱基等，蛋白胨不属于生长因子，D项错误。5农田土壤的表层，自生固氮菌的含量比较多，将由表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是()加抗生素不加抗生素加氮素不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖37 恒温箱培养2830 温度下培养ABCDC解析自生固氮菌是异养菌，
5、生长繁殖需要有机碳源；自生固氮菌能利用空气中的氮气，培养基中不加氮源也能生长繁殖，而不能固氮的菌不能生长繁殖；自生固氮菌的生长繁殖的适宜温度是2830 ；自生固氮菌对抗生素敏感，培养基中不能加抗生素。所以从土壤浸出液中分离出自生固氮菌对培养基的要求是不加抗生素、不加氮素、加葡萄糖、2830 恒温箱中培养。6若某一稀释度下，平板上生长的平均菌落数为80，涂布平板时所用的稀释液体积为0.1 mL，稀释液的稀释倍数为106，则每克样品中的活菌数约为()A8108B8107C8105D8106A解析每克样品中的活菌数(800.1)1068108。7用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释
6、倍数为106的培养基中得到以下几种统计结果，正确的是()A涂布了1个平板，统计的菌落数是230B涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C涂布了3个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D涂布了3个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233D解析在设计实验时，一定要至少涂布3个平板，作为重复组，才能增强实验结果的说服力与准确性，A、B项错误；C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地用3个平板的计数值求平均值。8用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为
7、了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验。对于对照组的要求不包括()A对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物B倒平板时，培养基的用量与实验组必须完全相同C所用培养基成分及pH大小与实验组保持一致D对照组和实验组均放在相同且适宜的条件下培养B解析进行倒平板时，对照组培养基用量的多少与实验组不一定绝对相同，且对实验结果无影响。9下列关于微生物的分离和培养的叙述中，正确的是()A进行微生物培养前，需对培养皿进行消毒处理B对细菌的分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法C获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染D用含刚果红的尿素培养基筛选鉴别出能分解尿素的菌株C解析进行微生物培养前需对培养皿进行灭菌处
8、理；对细菌的分离可用平板划线法和稀释涂布平板法，但对微生物的计数只能用稀释涂布平板法；尿素分解菌可以将尿素分解成氨，使酚红指示剂呈红色，因此用含酚红的尿素培养基能筛选出分解尿素的菌株。10下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，错误的是()A该实验需要设置空白对照组，以检验培养基是否受到杂菌污染B分解尿素的细菌产生脲酶，脲酶能分解尿素产生氢气和CO2C统计尿素分解菌的数目时，选择菌落数在30300以内的平板进行计数D该实验所用培养基应以尿素作为唯一氮源，并加有酚红指示剂鉴定尿素分解菌B解析分解尿素的细菌能产生脲酶，脲酶能分解尿素产生氨和CO2。发展目标11三个培养皿中分别加入1
9、0 mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36小时后，计算菌落数，结果如下表。下列选项中不正确的是()培养皿培养基成分菌落数琼脂、葡萄糖35琼脂、葡萄糖、生长因子250琼脂、生长因子0A该实验采用的是固体培养基B该实验采用稀释涂布平板法接种C和对照，说明大肠杆菌的生长不需生长因子D和的对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类C解析与对照，缺少生长因子，菌落数少于，说明大肠杆菌的生长需要生长因子。12下列有关培养基和菌种鉴定的叙述，不正确的是()A根据培养基的物理状态可将其分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基B可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C能在选择培养基上生长的不一
10、定是所筛选的目的细菌D在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌D解析在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌。13下表为土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课题使用的培养基配方，分析该配方，回答下面的问题：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g琼脂15.0 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL(1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是_。(2)按物理性质划分，该培养基属于_培养基，理由是培养基中含有_；该类培养基常用于微生物的_等。(3)由于_，所以该培养基只能用于能够合成
11、_的微生物的培养。用此培养基培养土壤浸出液能够从土壤中筛选出_的细菌。(4)在微生物学中，将_的培养基，称作选择培养基。解析根据培养基的配方，可以推断培养基的类型以及适于培养的微生物的代谢类型。含有琼脂、明胶等凝固剂的培养基为固体培养基；不含凝固剂的为液体培养基。不含碳源的培养基适于自养微生物的培养，不含氮源的培养基适于固氮微生物的培养等。固体培养基常用于菌种的纯化、分离、计数等；液体培养基常用于菌种的扩大培养和工业化生产。答案 (1)葡萄糖和尿素(2)固体琼脂纯化、分离、计数(3)培养基中只有尿素一种氮源脲酶分解尿素(4)允许特定种类的微生物生长，并能抑制或阻止其他种类微生物生长14从自然界
12、微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从合适的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。例如，培养噬盐菌的菌样应从_环境中采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在_条件下培养。(3)接种前要对培养基进行_处理。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。(4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是_，获得
13、图B效果的接种方法是_。一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_，应当怎样操作才可避免此种现象？_。(5)若探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是_，应该保持_(至少答两项)等不变。解析(1)筛选菌种应从适于目的菌种生长繁殖的环境中寻找，故培养噬盐菌应从高盐环境中采集。(2)富集培养时培养基及培养条件应能促进目的菌的生长繁殖。(3)微生物的分离及培养中必须保证无菌，包括培养基的灭菌和操作过程的灭菌等。(4)纯化培养中的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，前一种方法形成的菌落分布较均匀，后一种方法形成的菌落分布不均匀，先划线的部分菌落密集甚至相连，后划线的部分菌
14、落分布稀疏。(5)探究温度对酶活性的影响时，温度为自变量，酶活性为因变量，其他变量如底物和酶的用量、pH、反应时间等均为无关变量。答案 (1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温(3)高压蒸汽灭菌无菌(4)稀释涂布平板法平板划线法菌液浓度过高增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染严格无菌操作；或用接种环划下一区域前没有灼烧灭菌每划一个新区域前都要对接种环进行灼烧灭菌处理)(5)温度纤维素的量与浓度、反应时间、pH(至少答两项)15某研究小组按如图1所示过程从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌。请回答下列问题：图1ABCD图2(1)步骤是_。为了筛选目的菌，步骤的培养基中加入的唯一氮源为_，这种培养基属
15、于_(填“鉴别”或“选择”)培养基。(2)用平板划线法接种细菌时，不需用如图2中哪种器具？_(填字母)。在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，原因是_。(3)将接种后的培养基和作为对照的_培养基同时放入恒温培养箱中培养，为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入_指示剂，若指示剂变成_色，则说明该菌种能够分解尿素。解析图1所示过程为从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌，因此，图中是土壤取样，是样品稀释，是将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上。图2中A是接种环，B是酒精灯，C是涂布器，D是试管。答案(1)样品稀释(或系列稀释、梯度稀释)尿素选择(2)C避免温度过高的接种环把菌种杀死(3)一个未接种的酚红红