1、固定化酶的制备和应用基础达标知识点一固定化酶及其制备1酶的固定方法主要有以下哪些 ()吸附法载体偶联法包埋法交联法A BC D2制备固定化乳糖酶时要用缓冲液配制凝胶单体，下列说法错误的是 ()A酶活性不受温度的影响B酶活性易受酸碱度的影响C缓冲液配制凝胶单体是保持溶液中pH的相对稳定D缓冲液配制凝胶单体可以保证实验过程中酶的活性3下列不属于固定化酶作用的特点的是 ()A有利于酶与产物分解B可以被反复利用C能自由出入依附的载体D一种固定化酶一般情况下不能催化一系列酶促反应4下列不属于固定化乳糖酶优越性的是 ()A对酸、碱耐受力增强，且热稳定性强B可以一直使用，缩短生产周期C使成本显著降低D有利于
2、酶的活性知识点二固定化酶的应用5研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸二酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与微生物降解相比，其作用不需要适宜的 ()A温度 BpH C水分 D营养6将鲜牛奶进行无菌操作的正确方法是 ()A将牛奶进行高压蒸汽灭菌B将牛奶进行加热煮沸灭菌C将牛奶在85 90 下巴氏灭菌D以上三种方法均可7乳糖酶是一种二糖酶，它的作用是 ()A能将所有的二糖分解B能将麦芽糖分解成两分子葡萄糖C能将动物体内糖原水解成葡萄糖D能将乳糖分解成半乳糖和葡萄糖8下列说法中，哪项不是在应用酶的过程中常遇见的问题 ()A酶与反应物混合
3、，产品难以提纯B酶在生物化学反应中往往难以回收C酶遇强酸、强碱、高温等条件易失活D酶作为催化剂，绝大多数是蛋白质能力提升9下列关于固定化酶中酶的说法，正确的是 ()A酶的种类多样，可催化一系列的酶促反应B酶被固定在不溶于水的载体上，可反复利用C酶作为催化剂，反应前后结构不改变，所以固定化酶可永远利用下去D固定化酶由于被固定在载体上，所以丧失了酶的高效性和专一性特点10目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列哪项属于应用中面临的实际问题 ()A酶通常对强酸、强碱、高温非常敏感，但对有机溶剂不敏感B酶的结构比较稳定，所以催化功能很高C酶直接用于生产时可能会混在产物中，影响产品的质量D直接用于生产中
4、的酶可以多次利用11关于固定化乳糖酶的溶解操作，正确的是 ()A将一定量的乳糖酶溶解在蒸馏水中B将一定量的乳糖酶溶解在56 mL 0.05 mol/L pH 7.3的磷酸缓冲液中C准确称取乳糖酶100 mg，然后将其溶解在Arc浓度为质量分数20%，交联剂Bis浓度为质量分数5%的溶液中D准确称取乳糖酶100 mg，然后将其溶解在56 mL 0.05 mol/L pH 7.3的磷酸缓冲液中，其中单体Arc浓度为质量分数20%，交联剂Bis浓度为质量分数5%(其中含Arc和Bis的磷酸缓冲液要过滤，除去不溶物)12固定化乳糖酶制备过程中与漂洗操作的相关叙述中，错误的是 ()A聚合反应形成的凝胶直
5、接用相应的缓冲液洗46次B用磷酸缓冲液冲洗，是为了维持酶的活性C用相应的缓冲液冲洗46次，是为了将表面残余的没有固定的酶冲洗干净D冲洗后的凝胶应放在0 4 保存备用，以保持酶的活性13回答下列有关固定化乳糖酶的制备和应用的问题。(1)制作固定化乳糖酶及检测牛奶中乳糖的分解步骤分别为：乳糖酶的溶解_；_固定化酶的回收。(2)在制备固定化乳糖酶的过程中，乳糖酶溶解时，用磷酸缓冲液的目的是_。(3)检测乳糖酶对牛奶的分解时，为了使实验现象更明显，可以适当_。(4)固定化乳糖酶的回收过程是_。(5)牛奶中乳糖检测的原理是_。14固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。东北农业大学科研人员利
6、用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果(注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量)，分析回答：(1)从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，甲图所示结果可以得出的结论是_。(2)乙图曲线表明浓度为_的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低的原因是_。(3)固定化酶的活力随使用次数的增多而下降，由丙图可知，固定化酯酶一般可重复使用_次，以后酶活力明显下降。(4)固定小麦酯酶不采用海藻酸钠直接包埋，同时用戊二醛作交联剂，这是因为_。个性拓展
7、15利用酶生产高果糖浆：用淀粉酶将玉米粉水解生成单糖，再用糖化酶处理产生95%97%的葡萄糖溶液。葡萄糖的甜度比蔗糖低得多，但利用葡萄糖异构酶将葡萄糖异构化转变成果糖，就可以解决这一问题。再通过淀粉酶、糖化酶和固定化葡萄糖异构酶，将玉米粉转化成含葡萄糖50%、果糖42%、其他糖8%的反应物，称为高果糖浆或果葡糖浆。它虽然是一种混合物，但甜度与蔗糖相当，比葡萄糖高出许多，因此，在饮料、食品生产中大量应用。现在，一些发达国家高果糖浆的年产量已达几百万吨，高果糖浆在许多饮料的制造中已经逐渐代替了蔗糖。(1)在生产高果糖浆的过程中，为了使葡萄糖异构酶反复使用，采用了什么技术？_。(2)在上述生产过程中
8、，若直接用固定化葡萄糖异构酶处理单糖，能得到高果糖浆吗？说明理由。_。(3)为使固定化葡萄糖异构酶发挥最大催化效果，在生产过程中需要注意什么？_。(4)如何测定葡萄糖异构酶的最适pH和最适温度？写出大致的实验设计思路。_。答案1A2A3C4B5D6C7D8D 9B10C11D 12A13(1)聚合漂洗鲜牛奶的处理加酶分解检测乳糖的分解(2)酶活性易受温度和酸碱度的影响，用缓冲液配制凝胶单体是为了保持溶液中pH的相对稳定，从而保证实验过程中酶的活性(3)减少底物牛奶的量或增加固定化酶的含量，或适当延长保温时间(4)实验完成后，用缓冲液反复洗涤固定化酶，再用体积分数为0.05%的双氧水洗涤，以防固
9、定化酶被微生物污染，然后于0 4 下保存(5)还原糖是指含有自由醛基或酮基的单糖及某些二糖如乳糖和麦芽糖等。在碱性溶液中还原糖能将二价铜离子还原，而糖本身可以氧化成各种羟酸14(1)固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强且应用范围较广(2)3%海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足(3)3(4)酶分子很小，很容易从包埋材料中漏出15(1)固定化酶技术(2)不能。葡萄糖异构酶具有专一性(3)控制生产过程中的温度和pH(4)配制浓度相同的酶溶液，设置一系列合理的温度(或pH)梯度，用一系列合理的温度(或pH)梯度下的酶溶液分别与等量葡萄糖混合，经过相同的时间后，测定果糖的生成量即可确定葡萄糖异构酶的最适温度(或pH)