1、专题2过关检测(时间:60分钟,满分:100分)一、选择题(共25小题,每小题2分,共50分)1.将配制好的培养基进行灭菌,应用()。A.灼烧灭菌B.高压蒸汽灭菌C.干热灭菌D.煮沸灭菌解析:为保证各种成分的比例不受影响,配制好的培养基应用高压蒸汽灭菌。答案:B2.下面对发酵工程中灭菌的理解,不正确的是()。A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前解析:灭菌就是杀死各种微生物及其他生命形态(如芽孢),而不仅仅是消灭杂菌。答案:B3.下列有关微生物培养与应用的说法,正确的是()。A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B.接种前需对培养基、培养皿、接
2、种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D.分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源和碳源解析:天然培养基是成分不明确的培养基,并不是不需加工配制的培养基;实验者的双手需进行消毒处理;分离分解尿素的细菌时,尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源。答案:C4.下列关于微生物的培养和分离的叙述,不正确的是()。A.细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增B.噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖C.灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的所有微生物D.平板划线法可分散细菌得到单菌落解析:噬菌体营寄生生活,必须用活细胞培养,而不能用无生命形态的培
3、养基培养。答案:B5.检验培养基是否有杂菌污染的最有效的方法是()。A.将未接种的培养基放在实验桌上培养B.将未接种的培养基放在窗台上培养C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养解析:检验培养基有没有被杂菌污染,可选取未接种的培养基与接种样品的培养基同时在恒温箱中培养。如果在培养过程中未接种的培养基没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染;若未接种的培养基有菌落生长,说明培养基被杂菌污染。答案:C6.微生物与人类生产、生活密切相关,下列相关说法不合理的是()。A.土壤中的微生物能降解多种化合物,是大自然的清洁工B.生活中许多发酵产品需要微生物,如酿醋需要的关键细菌
4、是酵母菌C.可利用能分解纤维素的微生物分解秸秆,并将其产物转化为乙醇D.许多微生物也可导致人类患病解析:酵母菌是一种真菌。酿醋首先使用酵母菌发酵得到酒精,然后在有氧条件下用醋酸菌发酵得到食用醋。故选B。答案:B7.下列关于平菇(所需碳源为纤维素)培养的操作程序,正确的是()。A.配制牛肉膏蛋白胨培养基,接种,高压蒸汽灭菌,培养B.配制牛肉膏蛋白胨培养基,高压蒸汽灭菌,接种,培养C.配制棉子壳培养基,接种,高压蒸汽灭菌,培养D.配制棉子壳培养基,高压蒸汽灭菌,接种,培养解析:培养微生物的正确操作流程应该为:配制培养基灭菌接种培养,平菇的碳源为纤维素,所以富含纤维素的棉子壳适宜作平菇的培养基。答案
5、:D8.下列关于微生物培养和利用的叙述,不正确的是()。A.利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落C.以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D.用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加解析:稀释涂布平板法可以用于分离微生物以及对微生物进行计数;接种时要连续划线,这样可以获得单个菌落;大白菜腌制过程中开始时细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加,一般腌制10天后亚硝酸盐含量下降。答案:D9.梯度稀释过程中用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后,要用手指轻压移液管的橡皮头,吹吸三次,其目的是()。A.
6、增加试管内的溶氧量B.使菌液与水充分混匀C.使试管中菌液的浓度降低D.使细菌的形态结构发生改变解析:用手指轻压移液管上的橡皮头,其目的是使菌液和水充分混匀,减小下次稀释时的误差。答案:B10.下列有关平板划线操作的叙述,不正确的是()。A.将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红B.接种环在平板上划线位置是随机的C.在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰D.最后将平板倒置,放入恒温箱中培养解析:A、C、D均属于正确的无菌操作步骤。用接种环在培养基上划线时应把培养基划分成5个首尾相连的区域,划线位置不是随机的。答案:B11.下列有关微生物培养的叙述,不正确的是()。A.测定土壤样品中的细菌数
7、目,常用稀释涂布平板法进行菌落计数B.在对微生物进行培养前,需要对微生物和培养基进行灭菌C.酵母菌发酵过程产生的酒精,对其他微生物的生长有一定的抑制作用D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析:稀释涂布平板法可以分离微生物也可以进行计数;在对微生物进行培养前,需要对培养基进行灭菌,微生物不能灭菌;酵母菌发酵产生的酒精能抑制其他微生物的生长;利用特定培养基可以进行特定菌的分离,如用以尿素为唯一氮源的培养基分离能分解尿素的细菌。答案:B12.在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时,甲组实验用只含尿素作氮源的培养基,乙组实验用另加入硝酸盐的培养基,其他成分都相同,在相同条件下
8、操作、培养与观察,则乙组实验属于()。A.空白对照B.标准对照C.相互对照D.条件对照解析:甲、乙两组的自变量为是否仅以尿素作为培养基的氮源,因变量为是否特异性地分离出分解尿素的细菌,甲组为实验组,乙组虽然对培养基作了特殊的处理(另加入硝酸盐),但这种处理起对照作用,叫条件对照。答案:D13.在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养,可将自生固氮菌与其他细菌分开,对培养基的要求是()。加抗生素不加抗生素加氮素不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖A.B.C.D.解析:自生固氮菌是以N2为氮源、以土壤基质中的有机物为碳源和能源的细菌,所以要将其与其他细菌分开所用的特制培
9、养基不需另加氮源。所有细菌对抗生素都敏感,所以为了使自生固氮菌正常生活,不得加入抗生素。答案:C14.以下关于倒平板的操作,错误的是()。A.在火焰旁取下装有培养基的瓶塞B.倒平板前,让锥形瓶的瓶口迅速通过火焰C.倒平板时将培养皿的盖拿开,以方便将锥形瓶中的培养基倒入培养皿D.平板冷却凝固后要倒过来放置解析:为避免杂菌污染培养基,倒平板时用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝,右手将锥形瓶中的培养基(约1020 mL)迅速倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖。答案:C15.三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36小时后,计算菌落数,结果如下表。下列选项正确
10、的是()。培养皿培养基成分菌落数琼脂、葡萄糖35琼脂、葡萄糖、生长因子250琼脂、生长因子0A.该实验采用的是液体培养基B.该实验采用稀释涂布平板法接种C.和对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D.和对照,说明大肠杆菌的生长需要糖类解析:该实验采用的培养基都加入了琼脂作为凝固剂,是固体培养基;计数时应采用稀释涂布平板法接种微生物;和对照有两个自变量,无法分析生长因子和糖类是否是大肠杆菌生长所需的物质。答案:B16.以下关于菌种保藏的叙述,错误的是()。A.菌种保藏的目的是保持菌种的纯净B.固体斜面培养基可用于菌种的临时保藏C.菌种的长期保存一般采用甘油管藏D.由于甘油管藏菌种在-20 条件下
11、进行,因此对甘油可不必灭菌解析:接种前培养基都需灭菌。答案:D17.要从多种细菌中分离某种细菌,培养基要用()。A.固体培养基B.液体培养基C.加入青霉素的培养基D.加入高浓度食盐的培养基解析:固体培养基主要用于微生物分离、鉴定等。液体培养基用于工业生产。加入青霉素的选择培养基能抑制细菌、放线菌的生长,从而分离酵母菌和霉菌。加入高浓度食盐能抑制多种细菌的生长,可分离金黄色葡萄球菌。本题没有说明分离哪种细菌,故应用固体培养基,如在固体培养基上以划线方法接种,然后再分离出菌落。答案:A18.分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是()。加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝
12、酸盐A.B.C.D.解析:土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶,将尿素分解生成氨,利用尿素中的氮合成自身有机物;培养基中只加尿素作为唯一氮源,分解尿素的细菌能生长,其他微生物不能生长;分离微生物要用固体培养基;土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物,需要加葡萄糖作为碳源。答案:C19.下列对刚果红染色法的叙述,不正确的是()。A.可以先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应B.可以在倒平板时就加入刚果红C.既可以先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,也可以在倒平板时就加入刚果红D.可以将刚果红与培养基中的其他物质混合后再灭菌倒平板解析:刚果红染色法一般有两种:一种是先培养微生物长出菌落后,再加入刚果红
13、进行颜色反应;另一种是配制好培养基灭菌后,倒平板时加入灭菌处理的刚果红,再接种微生物培养,直至产生透明圈。答案:D20.微生物培养过程中,要十分重视无菌操作,现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染,请分析下列操作,错误的是()。煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢接种操作要在酒精灯火焰附近进行无菌繁殖脱毒苗时,植物的外植体要进行消毒家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌培养基要进行高压蒸汽灭菌加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A.B.C.D.解析:无菌操作包括消毒和灭菌。需进行消毒处理的有植物的外植体及操作人员的双手等,需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示剂或染色
14、剂)等。煮沸可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢,属于消毒;为防止空气中的杂菌污染,接种时要在酒精灯火焰附近进行;家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌,故不能灭菌;培养基常进行高压蒸汽灭菌。故操作错误。答案:D21.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时()。可以用固体培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用来计数活菌A.B.C.D.解析:平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基,故正确;平板划线法采用接种环进行操作,而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作,故错误;纯化时,要进行无菌操作,需要在火焰旁接种,避免空气中的微生物混入培养基,故正确;平板划线法一般用
15、于分离而不是计数,故错误。答案:C22.在细菌的连续培养过程中,要以一定速度不断添加新的培养基,同时以同样速度放出老的培养基。右图表示培养基的稀释率(培养基的更新速率)与培养容器中营养物质浓度、细菌代时(细菌数目增加一倍所需的时间)、细菌密度的关系。下列相关叙述不正确的是()。A.在稀释率很低的情况下,稀释率的增加会导致细菌密度增加B.稀释率从A到B的变化过程中,细菌生长速率不断提高C.稀释率超过B点后,营养物质浓度过高导致细菌死亡率增大,细菌密度降低D.为持续高效地获得发酵产品,应将稀释率控制在B点附近解析:稀释率超过B点,细菌密度降低,并不是由于营养物质浓度过高而使细菌死亡,营养物质浓度增
16、加不会造成细菌死亡。图中细菌密度减少是由稀释率过高造成的。答案:C23.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长;在培养基中加入质量分数为10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法不能从混杂的微生物群体中分别分离出()。A.固氮菌B.霉菌C.放线菌D.大肠杆菌解析:固氮微生物的生长不需要从培养基上获得氮源,可在缺乏氮源的培养基上正常生长;加入青霉素的培养基上不能生长细菌和放线菌,则可分离出霉菌和酵母菌;加入酚的培养基使细菌和霉菌不能正常生长,而不影响放线菌的生长。答案:D24.美国研
17、究人员通过对大肠杆菌进行基因改造,可以使它将植物纤维逐渐转化为生物燃料。这种细菌不仅能以传统生物能源技术中使用的蔗糖为原料,还能将广泛存在于植物纤维中的半纤维素分解合成为燃料物质。若要将这种大肠杆菌分离出来,应将它们接种在()。A.不含氮源的培养基上B.含有蛋白胨的固体培养基上C.只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上D.不含营养要素的培养基上解析:微生物生长繁殖所需的营养物质分为碳源、氮源、水和无机盐。要将能分解半纤维素的大肠杆菌分离出来应选用选择培养基。因此可以添加基因改造后大肠杆菌能利用而其他大肠杆菌不能利用的碳源来达到分离选择所需细菌的目的。答案:C25.下列对四种微生物的相关叙述,错
18、误的是()。A.CO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源,该生物所需的能源来自NH3的氧化B.CO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源,该生物所需的能源来自太阳能C.糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源,该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解D.葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源,但CO2一定不是酵母菌的碳源解析:乳酸菌不能固氮,因此N2不是其氮源,乳酸是乳酸菌的代谢产物。答案:C二、非选择题(共5小题,共50分)26.(14分)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病,炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状,对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。(1)细菌培养:采集疑似患者的样本
19、,分离培养,获得可疑菌落。(2)细菌鉴定:实验流程如下图所示。对配制的液体培养基等需采取灭菌;实验所用液体培养基的碳源为(填“无机碳”或“有机碳”)。挑选可疑菌落制片后,用观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后,35 培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是,对照组试管中应加入,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有。解析:对微生物的培养基一般采用高压蒸汽灭菌,以维持各成分比例及pH的稳定性
20、。液体培养基的浑浊度与微生物的密度呈正相关,由培养基的浑浊度可推断微生物的密度。答案:(每空2分)(2)高压蒸汽有机碳显微镜细菌大量繁殖等量生理盐水低吞噬细胞、浆细胞27.(10分)发酵法生产酒精后的废液(pH=4.3)含有大量有机物,可用于培养、获得白地霉菌体,生产高蛋白饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图如下:请据图分析回答问题。(1)实验过程中培养白地霉的培养基是。培养基定量分装前,先调节,分装后用棉塞封瓶口,最后处理。(2)图中过程称为,从甲到丁的培养过程是为了。白地霉的代谢类型为。(3)为确定菌体产量,图中操作之前,应先称量的质量。过滤后需反复烘干称量,直至。所得菌体干重等于。
21、解析:从题干可知,该实验是用发酵法产生酒精后的废液来培养白地霉,再分析题中的流程图可知废液上清液就是白地霉的培养液。制备培养液的几个要点:营养要均衡,pH要适宜,无菌。所以在分装前首先要调节pH,然后进行灭菌,杀死所有的微生物,冷却后接种。接种完成后要进行扩大培养以便获得更多的微生物菌体。用发酵法产生酒精后的废液含有大量的有机物,并且培养菌体的锥形瓶是开放的,可推知白地霉的代谢类型是异养需氧型。经过一段时间的培养要获得菌体的干重,可采用差值法,即先称滤纸的质量,再用滤纸过滤培养液,将得到的过滤物连同滤纸一起进行烘干,直至烘干物的质量不发生变化,此时的质量减去滤纸的质量即获得所培养微生物菌体的干
22、重。答案:(每空2分)(1)废液上清液pH灭菌(2)接种扩大培养异养需氧型(3)滤纸恒重(质量基本不变)恒重时的质量与滤纸质量之差(答案合理即可)28.(8分)某种一次性餐具不是传统塑料,而是用生物材料“玉米塑料”制成的,这种材料对环境没有任何污染。“玉米塑料”是上海同济大学任杰教授研制的可以代替传统塑料的化工塑料。“玉米塑料”的成分是一种高分子材料聚乳酸,其生产流程大致如下图。请根据生产流程图回答下列问题。(1)玉米浆发酵工程需要在环境条件下进行。(2)研究人员为了提高生产效率,需要获得纯正的乳酸菌。从土壤中提纯分离乳酸菌所用的培养基从功能上看属于培养基。接种乳酸菌最常用的是平板划线法和法。
23、(3)培养基配方中除了提供水、碳源、氮源和无机盐外,还要满足微生物对、以及氧气的要求。(4)为了判断培养基的制作是否合格,需要将接种乳酸菌的甲培养基和一个的乙培养基都放在恒温箱中培养,分别观察并记录结果。解析:(1)发酵过程中利用乳酸菌产生乳酸,故在无氧环境中进行。(2)获得特定菌的培养基是选择培养基,接种方法除平板划线法之外,还常用稀释涂布平板法。(3)微生物的培养基中有水、无机盐、碳源和氮源,另外还需要生长因子,还要满足微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。(4)培养基是不是污染需培养后看有无菌落生成,同时需要设置未接种微生物的培养基进行对照。答案:(1)无氧(2)选择稀释涂布平板(3
24、)pH特殊营养(4)未接种29.(10分)根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型,利用选择培养基和鉴别培养基,结合显微镜检,以及菌落特征,可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法、步骤,请根据各个步骤的条件,填写空格中的内容。首先配制一系列不同性质的固体培养基,然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。(1)用无氮培养基可筛选出。(2)用不含有机碳源的选择培养基可筛选出。(3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另外加入。(4)用加了较高浓度NaCl的培养基可选择出,或者根据菌落的颜色呈现色,将其挑取
25、单独培养。(5)利用伊红和美蓝培养基培养混合菌,菌落呈色并带有金属光泽的是,挑取该菌落单独培养。结合显微镜检和进一步用伊红和美蓝培养基鉴别培养来确定。(6)在无氧环境下培养混合菌,可以生长,加入一定浓度的乳酸,使培养基pH充分降低,可抑制的生长,利用菌落特征,结合显微镜检,选取生长优势的菌落,即可分离出。解析:圆褐固氮菌为固氮微生物,可以利用空气中的氮气,因而可以在不含氮源的培养基上生存。硝化细菌为自养型微生物,可以在不含有机碳源的培养基上生长。在培养基上加入青霉素,可抑制细菌、放线菌生长,从而可分离出酵母菌和霉菌。高浓度的食盐可抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长。伊红和美蓝与大
26、肠杆菌代谢产物结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽。乳酸菌产生的乳酸可抑制其他微生物的生长,但对自己的生长影响不大。答案:(每空1分)(1)圆褐固氮菌(2)硝化细菌(3)某种抗生素,如青霉素(4)金黄色葡萄球菌橘红(金黄)(5)深紫大肠杆菌(6)大肠杆菌、乳酸菌、酵母菌大肠杆菌和酵母菌乳酸菌30.(8分)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题。(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用法或法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释,用法接
27、种于固体培养基表面,在37 培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的。(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素。解析:(1)为了获得样本中致病菌单菌落,可用稀释涂布平板法或平板划线法将样本
28、接种到固体培养基表面,再经选择、鉴别等步骤获得。(2)欲让菌落均匀生长,布满平板,应将单菌落稀释后再用稀释涂布平板法将菌种接到培养基表面。(3)在长满菌落的平板上,含抗生素A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A敏感;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B不敏感;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明该致病菌对抗生素C的敏感性弱于对抗生素A的敏感性。含D滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,如不考虑其他杂菌污染的情况,此菌落很可能是抗生素D的耐药菌。(4)根据以上结果,选用抗生素A效果最好。答案:(1)平板划线稀释涂布平板(2)稀释涂布平板(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌(4)A9