1、高考资源网（） 您身边的高考专家22.2动物细胞融合与单克隆抗体1阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。(重、难点)知识点一动物细胞融合1概念两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。2诱导原理和结果(1)诱导原理：细胞膜的流动性。(2)诱导结果：形成杂交细胞。3诱导因素聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。4意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。5动物细胞融合技术的应用(1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。(2)用于制备单克隆抗体。
2、1病毒在生物技术中的应用(1)灭活的病毒能作为诱导剂，不灭活的病毒不能作为诱导剂。(2)病毒在不同过程或操作中的“身份不同”。在免疫调节中病毒属于抗原，在基因工程中可作为载体，在细胞工程中可作为诱导剂。2植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性和植物细胞的全能性细胞膜的流动性步骤酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种体细胞，再经过植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合诱导方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、灭活病毒结果形成杂种植株形成杂种细胞3.生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源(1)转基因生物：目的基因来自外源生
3、物，绝大多数基因来自两个亲本。(2)杂种植株：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。(3)经细胞培养获得的动物细胞：遗传物质只来自一个亲本。(4)动物细胞融合形成的杂交细胞：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。(5)克隆动物：细胞核中的遗传物质来自供体动物，细胞质中的遗传物质来自提供卵母细胞的动物个体。1(2019山东荷泽期中改编)下列关于动物细胞融合的说法，正确的是()A动物细胞融合与植物原生质体融合的原理不同B动物细胞融合后形成的杂交细胞一般为双核细胞C常用的诱导动物细胞融合的因素或方法有聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射等D细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能解析：选D。动
4、物细胞融合与植物原生质体融合的原理相同，都为细胞膜的流动性，A错误；动物细胞融合后形成的具有两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞，B错误；紫外线照射常用来进行人工诱变，它不是诱导细胞融合的因素，诱导细胞融合的物理法有离心、振动、电激等，C错误；细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，D正确。2(2018江苏高考改编)右图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是()A若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去分化再诱导融合Ba细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现Cc细胞的形成与a、b细胞膜的流动性无关Dc细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因解析：选B。a、b如果为
5、植物细胞，则需要去细胞壁，但不需要去分化，A项错误；两细胞融合需要用物理或化学等方法使其融合，其融合过程体现了细胞膜具有一定的流动性，B项正确，C项错误；融合后的杂种细胞中的基因仍是选择性表达，不会表达全部的基因，D项错误。知识点二单克隆抗体.传统抗体的获得(1)方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体；从动物血清中分离所需抗体。(2)缺陷：产量低、纯度低、特异性差。2制备原理(1)B淋巴细胞特点：一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。(2)骨髓瘤细胞特点：能在体外大量增殖。(3)杂交瘤细胞特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞，既能无限增殖又能产生大量特定抗体。3单克隆抗体的
6、制备过程.单克隆抗体的优点及应用(1)优点：特异性强、灵敏度高、产量高。(2)应用作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。用于治疗疾病和运载药物。1浆细胞、骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞的比较细胞类型来源特点浆细胞由B淋巴细胞受抗原刺激后增殖分化而来能产生单一抗体，但不能无限增殖骨髓瘤细胞从骨髓肿瘤中提取能无限增殖，但不能产生抗体杂交瘤细胞浆细胞与骨髓瘤细胞融合而成既能产生抗体，又能无限增殖2.两次筛选的比较第一次筛选：由于细胞融合是随机的，因此细胞混合物中融合细胞将以多种形式出现，因此必须从中筛选出既能分泌抗体，同时又能大量增殖的杂交瘤细胞。第二次筛选：从杂交瘤细胞群中选出能产生专一抗体的特
7、异性杂交瘤细胞。3植物体细胞杂交和单克隆抗体制备的比较比较项目植物体细胞杂交(番茄马铃薯植株)单克隆抗体制备过程第1步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠的处理(注射特定抗原)第2步原生质体的融合(物、化法)动物细胞融合(物、化、生法)第3步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选和培养第4步杂种植株鉴定提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高)融合前处理酶解法除去细胞壁：纤维素酶、果胶酶注射特定抗原，免疫处理正常小鼠意义和用途克服远缘杂交不亲和的障碍；培育作物新品种制备单克隆抗体；有助于疾病的诊断、治疗、预防免疫调节(1)免疫类型：人体的免疫分为_和特异性免疫；特异性免疫又包括_和_。 (2)免疫过程体液
8、免疫：B淋巴细胞接受抗原刺激后增殖、分化，大部分分化为_细胞，产生抗体，小部分分化为_细胞。细胞免疫：T细胞接受抗原刺激后，分化形成_，然后与被抗原入侵的_细胞密切接触，使其裂解死亡。答案：(1)非特异性免疫体液免疫细胞免疫(2)浆记忆效应T细胞宿主1对于下面制备单克隆抗体过程示意图的叙述，不正确的是(多选)()A图中有两处明显错误B中两两融合的细胞有3种，筛选保留了1种C中杂交瘤细胞均能产生抗体D可以无限增殖并分泌相应抗体解析：选AC。图中的错误是用于提取B淋巴细胞的小鼠没有经过免疫，A错误；为第一次筛选，目的是筛选出杂交瘤细胞，B正确；杂交瘤细胞是由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的，但由脾
9、脏中提取的B淋巴细胞包括非免疫的B淋巴细胞和已免疫的浆细胞，因此，杂交瘤细胞不一定都能产生抗体，C错误；是经过两次筛选得到的杂交瘤细胞群，具有无限增殖和分泌相应抗体的特点，D正确。2在制备单克隆抗体X的过程中，如果用a表示骨髓瘤细胞，b表示产生X抗体的浆细胞，c为产生Y抗体的浆细胞，促进上述3种细胞两两融合后，对融合细胞进行了两次筛选，其目的分别为()A从aa、bb、cc、ab、ac、bc中选出ab、bc；从ab、bc中选出abB从aa、bb、cc、ab、ac、bc中选出ab、bb；从ab、bb中选出bbC从aa、bb、cc、ab、ac、bc中选出ab、ac；从ab、ac中选出abD从aa、b
10、b、cc、ab、ac、bc中选出ab、ac；从ab、ac中选出ac解析：选C。制备单克隆抗体的过程中有两次筛选，第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞(ab和ac)，第二次筛选的目的是筛选出能产生特定抗体X的杂交瘤细胞(ab)，故C正确。3(2019常州高二检测)核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如下图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述，正确的是()A免疫的B细胞及其互相融合细胞因全合成途径被A阻断而在HAT培养基上不能增殖B骨髓
11、瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖C杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径，所以能在HAT培养基上大量增殖DHAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体解析：选B。免疫的B细胞及其互相融合细胞均属于成熟细胞，不能增殖，A错误；骨髓瘤细胞及其互相融合细胞缺乏转化酶，又因HAT培养基中的物质A阻断了全合成途径，所以在HAT培养基上不能增殖，B正确；杂交瘤细胞因为可以进行补救合成途径，能够在HAT培养基上大量增殖，C错误；HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞能大量增殖，也能产生抗体，但不一定产生目标抗体，D错误。核心知识小结要点回眸 答题必备
12、动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。 动物细胞融合的主要用途是制备单克隆抗体。 杂交瘤细胞是由经免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成的，具有既能无限增殖又能产生特定抗体的能力。 单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高，并能大量制备。 单克隆抗体的主要用途有：作为诊断试剂、用于治疗疾病和运载药物。 拓宽教材1(选修3 P52图223改编)下图为动物细胞融合示意图，下列相关叙述不正确的是()A图中C为灭活的病毒，此外还可用物理或化学方法诱导细胞融合B图中过程发生了细胞膜的融合，体现了细胞膜
13、的选择透过性C图中过程表示有丝分裂D动物细胞融合技术可用于制备单克隆抗体解析：选B。图中C为灭活的病毒，此外还可用物理或化学方法诱导细胞融合，A正确；图中过程发生了细胞膜的融合，体现了细胞膜的流动性，B错误；图中过程表示有丝分裂，C正确；利用动物细胞融合技术可获得杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体，D正确。2(选修3 P55“思考与探究”改编)下图是制备乙肝病毒抗体的流程图。请回答下列问题：(1)图中细胞A为_，其与骨髓瘤细胞融合所依据的基本原理是_。(2)在图示流程中至少需要进行两次筛选，其中第一次筛选的目的是_；第二次筛选的目的是_。(3)制备得到的单克隆抗体可用于乙肝的免疫治疗，其所利用的免
14、疫学原理是_。(4)干扰素属于淋巴因子，可由效应T细胞产生，并以_的方式释放到细胞外。某同学联想到单克隆抗体的制备过程，提出用效应T细胞代替细胞A，从而获得单克隆干扰素的设想，你认为该方法是否可行？并说明理由。_。解析：(1)图中细胞A是从小鼠脾脏中获取的B淋巴细胞，其与骨髓瘤细胞融合所依据的基本原理是细胞膜(具有一定)的流动性。(2)在图示流程中至少需要进行两次筛选，其中第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。(3)因为抗原和抗体的特异性结合(或单克隆抗体与抗原结合的特异性强)，所以制备得到的单克隆抗体可用于乙肝的免疫治疗。(4)干扰素的化学本质是
15、糖蛋白，可由效应T细胞产生，并以胞吐的方式释放到细胞外。不能用效应T细胞代替细胞A，因为效应T细胞能与骨髓瘤细胞结合，使骨髓瘤细胞裂解。答案：(1)B淋巴细胞细胞膜(具有一定)的流动性(2)获得杂交瘤细胞获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞(3)抗原和抗体的特异性结合(或单克隆抗体与抗原结合的特异性强)(4)胞吐不可行，因为效应T细胞能与骨髓瘤细胞结合，使骨髓瘤细胞裂解精练好题3(2019上海宝山高二模拟)下图是两种生物细胞融合技术的示意图，下列关于该图的叙述中，正确的是()Aa过程必须除去细胞壁；b过程需要通过细胞识别B如果图中表示的是动物细胞融合或植物体细胞杂交，X均能形成杂种个体C若X是苹果梨
16、幼苗，则c过程是细胞分裂、分化的过程D细胞融合技术的缺点是不能克服远缘不亲和性答案：C4(2019南大附中月考)将人、鼠细胞悬液混合并诱导细胞融合(只考虑细胞两两融合)后，在HAT培养基上，同时含有T、H基因(独立遗传)的细胞才能存活和增殖。增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失，只残留一条或几条。对处于分裂中期的细胞进行镜检，结果如表所示。已知人、鼠细胞的基因型分别为ttHH和TThh，下列叙述正确的是(多选)()融合细胞细胞样编号残留人染色体1710、10、1717、XA.在HAT培养基上，融合细胞均能存活和增殖B可以确定的基因组成为TTTTHHhhhhC可以确定的相关基因组成相同D可以将H(
17、h)基因定位于人第17号染色体解析：选BD。在HAT培养基上，同时含有T、H基因(独立遗传)的细胞才能存活和增殖，融合细胞中若携带有H基因或T基因的染色体丢失，该融合细胞就不能在HAT培养基上存活和增殖，A错误；含有鼠的全部基因及人的第17号染色体上的基因，含有鼠的全部基因及人的第10号和第17号染色体上的基因，含有鼠的全部基因及人的第17号和X染色体上的基因，在细胞融合过程中鼠的染色体不丢失，都含有鼠的全部基因，即一定都含有TThh，而只含有人的第17号染色体上的基因，且可以在HAT培养基上存活，所以人的第17号染色体上一定携带H基因，故可以将H(h)基因定位于人第17号染色体，处于分裂中期
18、的细胞由于DNA在间期已完成复制，基因已加倍，故的基因组成为TTTTHHhhhh，B、D正确，C错误。5用单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”，下列对此描述不正确的是()A“瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成的B“弹头”是由放射性同位素、化学药物和细胞毒素等物质构成的C“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能D“生物导弹”是利用细胞工程制备出来的解析：选C。“弹头”中的药物不具有选择性。“生物导弹”中的“瞄准装置”是由专一识别特定肿瘤细胞的单克隆抗体构成的；“弹头”是由杀死肿瘤细胞的放射性同位素、化学药物和细胞毒素等物质构成的；“生物导弹”是利
19、用动物细胞融合、动物细胞培养等细胞工程技术制备出来的。6(2019江西临川二中期末)下图为动物细胞融合示意图，请据图回答下列问题：(1)图中灭活的仙台病毒的作用是_。(2)若仅考虑两两融合，则A细胞和B细胞融合后共有_三种类型。(3)由杂种细胞形成无性系1、2、3的方法，可以称为_。(4)此项技术最重要的应用是_。解析：(1)诱导细胞融合需要有促融剂，比如聚乙二醇、灭活的仙台病毒等。(2)若仅考虑两两融合，则A细胞和B细胞融合后共有AA、AB、BB三种类型。(3)无性繁殖可以称之为克隆。(4)细胞融合技术最重要的应用是制备单克隆抗体。 答案：(1)促进细胞融合(作为促融剂)(2)AA、AB、B
20、B(3)克隆(4)制备单克隆抗体7(2019天津河东区一模)下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。分析并回答下列问题：(注：碱性磷酸酶广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾等组织器官中)(1)制备单克隆抗体需要筛选，第二次筛选时，杂交瘤细胞还需进行_，最终筛选出_。(2)活化阿霉素能抑制细胞中的_和_过程。(3)在此治疗中，正确的方法是注射_。与传统的化疗相比，此治疗方法的优点是_。答案：(1)克隆化培养和抗体检测产生所需抗体的杂交瘤细胞(2)DNA的复制转录(3)阿霉素
21、和单克隆抗体(4)特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害一、单项选择题1(2019徐州高二检测)基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞，用灭活的病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞()AAAaaBAaBbCAabb DBBbb解析：选C。诱导融合处理后可能会出现3种两两融合的细胞，即同种细胞相互融合，基因型为AAaa和BBbb；不同种细胞相互融合，融合后的杂交细胞基因型为AaBb，C项基因型细胞不可能出现。2与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合的原理及其特有的诱导因子分别是()A细胞膜的流动性、离心B细胞膜的流动性、灭活的病毒C细胞的全能性、电激D细胞的全能性、灭活的病毒解析：选B。植物体
22、细胞杂交的原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全能性，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；动物细胞融合的常用诱导因子有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等，其中灭活的病毒是其特有的诱导因子，而聚乙二醇、电激均可用于诱导植物体细胞杂交。3(2019陕西黄陵中学高二月考)制备单克隆抗体时用单个的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，通过培养，形成细胞群。此过程中的细胞内部变化一定不涉及()ARNA聚合酶与结合位点结合B碱基互补配对C同源染色体配对D脱水缩合答案：C4(2019栖霞二中高二检测)下图中的供体DNA中含有无限增殖调控基因，该基因能激发动物细胞的分裂，图示是利用该基因制备新型单克隆抗体的过程，下
23、列相关叙述错误的是()A经酶A处理后与质粒具有相同的黏性末端B是已免疫的B淋巴细胞C既能无限增殖又能分泌特异性抗体D过程中的检测筛选的目的是得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞答案：D5(2019栖霞二中高二检测)下列在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是()A对植物的茎尖进行组织培养获得脱毒苗B将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，制备单克隆抗体C利用植物体细胞杂交技术培育“白菜甘蓝”D将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株答案：A6单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个用已免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，下图为其实验
24、流程图。下列相关的叙述不正确的是()Aa是骨髓瘤细胞，表示在选择培养基上进行培养B制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是它能分泌多种特异性抗体C过程如在体外培养，则需要无菌、无毒的环境，营养充足，温度、pH适宜等环境条件D诱导动物、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是聚乙二醇解析：选B。对于B淋巴细胞来说，每一种B淋巴细胞经特定抗原刺激后只能产生一种特异性抗体。根据单克隆抗体制备的流程判断：a是骨髓瘤细胞，b是杂交瘤细胞。是诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程。表示在选择培养基上进行培养，筛选出杂交瘤细胞。表示筛选出能产生专一特异性抗体的杂交瘤细胞。包括体外培养和注入小鼠腹腔内培养两种方法。选
25、择培养基只允许杂交瘤细胞生长、增殖，其他细胞不能生存。动物细胞培养需要具备的条件是：无菌、无毒的环境，营养充足，温度、pH适宜，充足的空气等。诱导细胞融合时常用聚乙二醇作诱导剂。7(2019天津一中高三上学期月考)“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述错误的是()A单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞B单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选的目的是筛选出针对目标抗原的抗体为阳性的杂交瘤细胞C基因工程中一般用同种限制酶切割运载体和含目的基因的DNA片段，酶切产物用DNA连接酶连接，获得的产物需经筛选后才能导入受体细胞D重组质粒上的
26、标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来解析：选C。制备单克隆抗体的过程中有两次筛选，第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，A、B正确；基因工程中一般用同种限制酶切割运载体和含目的基因的DNA片段，酶切产物用DNA连接酶连接，获得的产物直接导入受体细胞，不需要筛选，C错误；重组质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，D正确。8(2019上海松江区模拟)下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，下列有关叙述不正确的是()A图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体
27、胃癌抗体特异性结合的抗原B利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙C用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D对丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁答案：C二、多项选择题9下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较，描述正确的是 ()A动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同B只有植物体细胞杂交可跨越种属间的生殖隔离，突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能C利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为生产单克隆抗体开辟了新途径D目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交，
28、得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物，但它们的性状并不能全部得以体现解析：选CD。动物细胞融合的诱导方法有生物方法，如用灭活的病毒，而植物原生质体融合没有生物方法；两个植物物种间的体细胞杂交，得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物，但它们的性状并不一定都能得以体现，这是基因选择性表达的结果。10(2019徐州高二检测)将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞。其过程如图所示。下列有关叙述错误的是()A过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同B经形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体C过程不需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞D抗体的靶向作用使过程具有高度特
29、异性解析：选BC。过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同，都是细胞膜的流动性，A正确；经形成的杂交瘤细胞不一定都能产生特定抗体，B错误；过程需要采用抗体阳性检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，然后进行克隆化培养(包括体内培养和体外培养)，C错误；抗体的靶向作用使过程具有高度特异性，D正确。三、非选择题11(2019菏泽一中宏志班检测)下图是通过动物纤维母细胞等获得单克隆抗体的实验研究。据图回答下列相关问题：(1)过程类似于植物组织培养技术中的_过程，过程的实质是_。(2)A代表_物质，Y、Z细胞的名称分别是_、_。(3)过程诱导细胞融合的生物因素是_，细胞融合后还需要用_培养基筛选获得Z
30、细胞。(4)Z细胞还需经过_和_才能获得大量产生所需抗体的细胞。(5)经过上述过程获得的单克隆抗体的优点是_。答案：(1)脱分化基因的选择性表达(2)抗原(特定抗原)B淋巴细胞杂交瘤细胞(3)灭活的病毒选择(4)克隆化培养抗体检测(专一性抗体阳性检测)(5)特异性强、灵敏度高，并可大量制备12(2019陕西宝鸡金台区期中)已知细胞合成DNA分子有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA分子的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体，如图所示。请回答下
31、列问题：(1)生产单克隆抗体时，一般不直接利用B淋巴细胞，主要原因是_。(2)过程中，常用的与诱导植物细胞融合相同的诱导剂是_。(3)过程为_培养，培养箱中还需通入气体物质，其中通入CO2的目的是_。(4)过程表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠_内培养。体内培养与体外培养相比，其优点是_。(5)为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需在过程向培养液中加入_，理由是杂交瘤细胞可利用_途径合成DNA，从而在该培养液中增殖。解析：(1)B淋巴细胞不能无限增殖，故生产单克隆抗体时，一般不直接利用B淋巴细胞。(2)图中过程为动物细胞融合，其常用的与诱导植物细胞融合相同的诱导剂是聚乙二醇
32、。(3)过程为动物细胞培养，培养箱中还需通入气体，其中通入CO2的目的主要是维持培养液的pH。(4)过程表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠腹腔内培养。体内培养与体外培养相比，其优点是无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便。(5)根据题意，B淋巴细胞中含有D和S两条DNA复制途径，但其不能无限增殖；骨髓细胞只含有进行DNA复制的D途径，但氨基嘌呤能阻断D途径，故若将融合细胞置于含有氨基嘌呤的培养液中培养，骨髓瘤细胞自身融合的细胞和B淋巴细胞自身融合的细胞均不能增殖，只有杂交瘤细胞可利用淋巴细胞中的S途径合成DNA分子，实现分裂增殖。答案：(1)B淋巴细胞不能无限增殖(2
33、)聚乙二醇(3)动物细胞维持培养液的pH(4)腹腔无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便(5)氨基嘌呤淋巴细胞中的S13(2019广东汕头检测)新型的微生物蛋白农药是由微生物产生的一类蛋白质药物，能够激活农作物的防御系统，提高农作物抗病抗虫的能力。科研人员在某个真菌菌株上发现了激活蛋白AP45，并进行了相关研究(见下图)。请回答下列问题：(1)图中的是_；是_。(2)实验过程所设计的引物对，应与_能互补配对，但在_之间不应有能互补配对的核苷酸序列。(3)据图分析，该实验以_基因作为标记基因。(4)如果要利用抗原抗体杂交技术检测目的基因是否成功表达，则需要以_为抗原、制备出其单克隆抗体。(5)
34、以此类激活蛋白制成的微生物蛋白农药并不会直接杀死害虫或者病原生物，是一种环境友好型的产品，具有_等优点(要求一项)。答案：(1)RNA(或mRNA)构建目的基因表达载体(2)目的基因(或cDNA)两种引物(或引物自身的不同片段或引物与非目的基因，要求一项)(3)青霉素抗性(4)激活蛋白AP45(或目的蛋白)(5)不引起害虫或病原生物的抗药性(或易分解无残留或对人畜无害或其他合理答案)14(2019广西桂林、贺州期末联考)双功能抗体就是双特异性抗体，是一种非天然性抗体，结合抗原的两个臂具有不同的特异性，可以通过生物学方法制备。1983年Milstein等人将能分泌目的单克隆抗体的杂交瘤细胞(称之
35、为A细胞)与分泌另一种抗体的脾细胞(即B细胞)融合，形成可分泌两种亲代抗体和杂种抗体的杂交瘤细胞(AB细胞)，得到可预先设定的特异性的双功能抗体。分析并回答下列问题：(1)Milstein等利用A细胞和B细胞制备双功能抗体的过程中，使用了哪些动物细胞工程的技术手段_和_(写出两种)。在这个过程中，若融合最多考虑两两融合，总共应该有_种细胞存在，请参照题干表示方法用A、B字母表示这些细胞的具体类型_。(2)双功能抗体在癌症治疗中的作用类似于“生物导弹”，借助于双功能抗体一条臂与癌细胞表面抗原_，同时另一条臂将T细胞和NK细胞等杀伤细胞定向带到癌细胞所在位置。在生物体内T细胞攻击癌细胞属于_免疫。(3)生物学方法制备双功能抗体的缺点之一为不能对双功能抗体进行改造，限制了它的临床应用。使用_(工程技术)，可以对双功能抗体的结构进行设计改造，使其更加符合人类的需要，这种改造最终还必须通过对_分子的改造来完成。答案：(1)动物细胞融合动物细胞培养5AA，AB，BB，A，B(2)特异性结合细胞(3)蛋白质工程DNA高考资源网版权所有，侵权必究！