1、课时作业41基因工程时间：45分钟满分：100分一、选择题(每小题5分，共60分)1下列关于基因工程的叙述，正确的是()A基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因B细菌质粒是基因工程常用的运载体C通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种限制性内切酶处理运载体DNAD为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体解析：本题考查了基因工程的操作工具。基因工程是按照人们的愿望，把一种生物的基因复制出来，加以修饰改造，然后导入另一种生物的细胞里定向地改造生物的遗传性状。在实际操作中一般用同一种限制性核酸内切酶来处理含目的基因的DNA和运载体DNA，使它们产生相同的黏性末端
2、；不仅仅只有受精卵可以作为受体细胞，其他的体细胞也可充当受体细胞；目的基因是符合人们需要的基因，基因工程经常以抗生素的抗性基因作为标记基因。答案：B2在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是()A限制酶和DNA连接酶 B限制酶和水解酶C限制酶和运载体 DDNA连接酶和运载体解析：基因工程中的操作工具有3种，即“分子手术刀”、“分子缝合针”、“分子运输车”。在基因工程操作过程中，利用限制性核酸内切酶将DNA分子切开获取目的基因，同时用同一种限制性核酸内切酶将运载体切开，获得和目的基因相同的黏性末端；再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接起来。综合所给选项可知，A项正确。答案：A3下列有关基因工程
3、中限制性核酸内切酶的描述，错误的是()A一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B限制性核酸内切酶的活性受温度的影响C限制性核酸内切酶能识别和切割RNAD限制性内切酶可从原核生物中提取解析：本题考查基因工程的操作工具限制性核酸内切酶的作用和来源。限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离纯化，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且在特定的切点将磷酸二酯键断开；酶的活性是受温度、酸碱度等的影响。答案：C4下列关于基因表达载体的构建描述错误的是()A基因表达载体的构建是基因工程的核心B基因表达载体的构建包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分C目的基因就是指编码蛋白质的结构基因D构
4、建的基因表达载体都是相同的解析：本题综合考查了基因表达载体构建的基础知识，包括基因表达载体构建在基因工程中的地位、结构组成、不同生物的基因表达载体的不同等。基因表达载体的构建是基因工程的第二步，也是基因工程的核心；一个基因表达载体的组成除目的基因外还有启动子、终止子、标记基因等部分；由于受体细胞不同，基因表达载体的构建也会有差别，不可能千篇一律。答案：D5下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是()A基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效B显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法C大肠杆菌最常用的转化方法是：使细胞的生理状态发生改变D农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法解析：
5、本题综合考查了将目的基因导入细胞的方法。不同生物目的基因导入的方法不同，每种方法都有利有弊。目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，该方法比较经济有效，还有基因枪法和花粉管通道法；目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法；大肠杆菌细胞最常用的转化方法就是用钙离子处理细胞，使细胞的生理状态发生改变，完成转化过程。答案：A6下列关于基因工程的叙述，错误的是()A目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达解析：胰岛素原须在内质
6、网、高尔基体中加工后才有生物活性，大肠杆菌无内质网和高尔基体。载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞，但由于它和目的基因是相互独立的，并不能促进目的基因的表达。答案：D7目前人类利用基因工程的方法成功培育出转基因抗虫棉，以下说法正确的是()A苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达B抗虫基因导入棉花叶肉细胞后，可通过传粉、受精的方法，使抗虫性状遗传下去C标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因D转基因抗虫棉经过种植，棉铃虫不会产生抗性，这样可以有效消灭棉铃虫解析：苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后需用农杆菌转化法导入棉花的叶肉细胞，不能直接进入棉花的叶肉
7、细胞表达；棉花叶肉细胞不能进行减数分裂产生配子，故抗虫基因导入棉花叶肉细胞后，可以通过组织培养技术，使抗虫性状遗传下去；棉铃虫抗性的产生是基因突变的结果，但抗虫棉的自然选择会使棉铃虫的抗性基因频率升高。答案：C8下列有关基因工程技术的正确叙述是()ADNA重组技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体B所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达解析：本题考查基因工程的操作步骤和操作工具。基因操作的工具酶有限制酶、DNA连接酶，运载体是基因工程中的运输工具；一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列；目的基
8、因进入受体细胞后，受体细胞表现出特定的性状，才说明目的基因完成了表达，基因工程的结果是让目的基因完成表达，生产出目的基因的产物；选择受体细胞的重要条件就是能够快速繁殖。答案：C9转基因抗虫棉可以有效地用于棉铃虫的防治。在大田中种植转基因抗虫棉的同时，间隔种植少量非转基因的棉花或其他作物，供棉铃虫取食。这种做法的主要目的是()A维持棉田物种多样性B减缓棉铃虫抗性基因频率增加的速度C使食虫鸟有虫可食D维持棉田生态系统中的能量流动解析：转基因抗虫棉可以产生毒蛋白毒死棉铃虫，少数具有抗性基因的棉铃虫能够存活并繁殖后代，从而使抗性基因频率很快上升，间隔种植少量非转基因的棉花或其他作物，没有抗性的棉铃虫能
9、少量存活，以便减缓棉铃虫抗性基因频率增加的速度。在大田中种植棉花的主要目的是收获棉花，使能量流向棉花，而不是维持棉田物种多样性。答案：B10上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，以下与此有关的叙述正确的是()A“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物B“提高基因的表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因C只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中是纯合的D转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，故不能合成人白蛋白解析
10、：本题考查基因工程的应用。在生物的体细胞中含有一整套的基因，只是基因的选择性表达才使不同的细胞具有不同的功能。答案：D11利用细菌大量生产人类干扰素，下列叙述错误的是()A用适当的酶对运载体与人类干扰素基因进行切割与黏合B用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌C通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细菌D受体细菌内能合成人类干扰素说明目的基因完成了表达解析：检测重组DNA是否已导入了受体细菌需从分子水平进行检测，首先要检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，采用方法是DNA分子杂交技术。其次要检测目的基因是否转录出了mRNA，采用方法是DNA与mR
11、NA杂交，最后检测目的基因是否翻译成了蛋白质，检测方法是抗原抗体杂交。个体水平鉴定就是利用抗虫或抗病的接种实验确定是否具有抗性或抗性的程度。答案：C12基因工程与蛋白质工程的区别是()A基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作B基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以是天然不存在的蛋白质C基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平(或性状水平)操作D基因工程完全不同于蛋白质工程解析：蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。蛋白质工程是从分子水平对蛋白质进行改造设计，通过对相应的基因进行修饰加工甚至人工进行基因合成，从而对现有蛋白质进行改造，
12、或制造一种新的蛋白质以满足人类生产和生活需求。而基因工程只是将外源基因导入另一生物体内，并使之表达，体现人类所需的性状，或者获取所需的产品。因此，基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。答案：B二、非选择题(共40分)13(10分)(2014浙江杭州一检)盐害是导致全球水稻减产的重要原因之一，中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌法将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5个耐盐基因导入水稻，获得了一批耐盐转基因植株。请分析回答下列问题：(1)水稻耐盐性状由_个基因控制。(2)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的_处。(填“a”或“
13、b”)。耐盐基因的载体是_。(3)由导入耐盐基因的水稻细胞培养成植株需要利用_技术。(4)从个体水平上检测耐盐转基因水稻是否成功可采用什么方法？_ _。解析：水稻耐盐性状由CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5个耐盐基因控制。限制性内切酶作用于图中的a处，耐盐基因的载体是农杆菌的质粒。导入耐盐基因的水稻细胞通过植物的组织培养得到植株。从个体水平上检测耐盐转基因水稻是否成功可用一定浓度盐水浇灌水稻或将水稻移栽到盐碱地中。答案：(1)多(5)(2)a农杆菌的质粒(3)植物组织培养(4)用一定浓度盐水浇灌水稻(将水稻移栽到盐碱地中)14(15分)(2014南京模拟)下
14、图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列有关问题：(1)若限制酶的识别序列和切点是GATC，限制酶的识别序列和切点是GGATCC，那么在过程中，应用限制酶_切割质粒，用限制酶_切割抗虫基因。过程在_(体内/体外)进行。(2)将通过过程得到的大肠杆菌涂布在含有_的培养基上，能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入，该培养基从功能方面属于_培养基。(3)重组质粒导入大肠杆菌的目的是_。(4)过程所用技术称为_，从遗传学角度来看，根本原因是根细胞具有_。解析：由限制酶和限制酶的识别序列和切点可知，限制酶可以识别并切割限制酶的位点，而限制酶则不能识别并切割限制酶的位点。故质
15、粒用限制酶切割，保留四环素抗性基因，目的基因用限制酶(或限制酶和)切割。为构建基因表达载体的过程，该过程在体外进行。大肠杆菌导入重组质粒后，含有正常的四环素抗性基因，将其涂布在含有四环素的选择培养基上，它能够正常生长。将目的基因导入大肠杆菌后目的基因可在大肠杆菌体内大量复制。根细胞中含有发育成完整个体所需的全套遗传物质，故通过植物组织培养技术可将根细胞培养成一个完整植株。答案：(1)(和)体外(2)四环素选择(3)大量复制目的基因(抗虫基因)(4)植物组织培养发育成完整个体所需的全套遗传物质15(15分)(2014淮安调研)下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵
16、母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题：资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达【5AOX1和3AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子】。资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。资料3：限制酶酶切位点(1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上_、_限制酶识别序列，这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化
17、。(2)酶切获取HBsAg基因后，需用_将其连接到pPlC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取_。(3)步骤3中应选用限制酶_来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。(4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡那霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用_方法进行检测。(5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入_以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。(6)与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行_并分泌到细胞外，便于提取。解析：(1)
18、重组质粒上的目的基因若要表达，需目的基因的首尾含有启动子和终止子。而SnaB、Avr识别的序列在启动子与终止子之间，所以只有在目的基因两侧A和B位置分别接上这两种序列，并用SnaB、Avr这两种限制酶对质粒和目的基因同时切割，才会既各自出现相同的黏性末端，便于重组与表达，又可防止环化。(2)用DNA连接酶将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒，导入大肠杆菌体内，目的是利用大肠杆菌无性繁殖速度，短时间内可获取大量的重组质粒。(3)重组DNA的两侧分别是启动子和终止子，除Bgl外，其它限制酶会破坏含有启动子、终止子的目的基因。(4)用DNA分子杂交技术检测是否导入目的基因。(5)资料1显示，甲醇为该酵母菌的唯一碳源，同时诱导HBsAg基因表达。(6)酵母菌为真核生物，细胞内具有对分泌蛋白加工的内质网和高尔基体等细胞器，细菌等原核生物，不具有内质网和高尔基体等细胞器。答案：(1)SnaB Avr(2)DNA连接酶大量重组质粒(3)Bgl(4)DNA分子杂交(5)甲醇(6)加工(修饰)