1、专题12 生物技术实践1(2018全国卷)回答下列与酵母菌有关的问题：(1)分离培养酵母菌通常使用 麦芽汁琼脂 (填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基，该培养基应采用 高压蒸汽 灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后可观察到菌落，菌落的含义是 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体 。(2)酵母菌液体培养时，若通入氧气，可促进 菌体快速增殖 (填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)；若进行厌氧培养，可促进 乙醇产生 (填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。(3)制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是
2、 酵母菌分解葡萄糖会产生CO2，CO2使面包松软 。【解析】(1)牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛的细菌培养基；MS培养基是满足植物细胞的营养和生理需要的培养基；麦芽汁琼脂培养基通常用于酵母菌(真菌)的培养、鉴定及菌种保存。培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法。菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。(2)酵母菌为兼性厌氧型微生物，在有氧条件下进行有氧呼吸为酵母菌的快速繁殖提供能量，在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生乙醇。(3)面包松软是因为制作过程中，加入的酵母菌可以分解葡萄糖产生大量的CO2，CO2遇热膨胀，使得制作的面包松软多孔。2(2020江苏省南京师大附中高三期中)筛选淀粉分
3、解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，会出现以菌落为中心的透明圈(如图)，实验结果见下表。菌种菌落直径：C(mm)透明圈直径：H(mm)H/C细菌5.111.22.2细菌8.113.01.6(1)培养基一般含有 碳源、氮源、水、无机盐、生长因子 等成分，筛选淀粉分解菌时，培养基中应加入 碘液 作为鉴定试剂。(2)实验结果看，细菌和细菌能否将淀粉酶分泌至细胞外？细菌 能 (填“能”或“不能”，下同)，细菌 能 。(3)本实验中，H/C越大说明 淀粉分解菌分解淀粉的能力越强 。(4)若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是 稀释涂布平板法 。
4、(5)用平板培养细菌时一般需要将平板 倒置 (填“倒置”或“正置”)。有些使用后的培养基在丢弃前需要经过 灭菌 处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。【解析】(1)培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等成分；筛选淀粉分解菌时，培养基中应加入碘液作为鉴定淀粉的试剂；(2)由题图可知，菌落周围均出现了以菌落为中心的透明圈，说明细菌、均能将淀粉酶分泌至细胞外水解淀粉；(3)本实验中，H/C越大，说明淀粉分解菌分解淀粉的能力越强；(4)若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落计数，应采用的方法为稀释涂布平板法；(5)用平板培养细菌时，一般需要将平板倒置，防止水蒸气在培养皿盖上凝结倒流污染
5、培养皿；使用后的培养基在丢弃前需要经过灭菌处理防止污染环境。3(2020四川高三三模)2020年5月1日，新版北京市生活垃圾管理条例正式实施。为提高生活垃圾再利用和资源化的科技水平，科研小组欲筛选微生物对厨余垃圾中的菜帮菜叶、瓜果皮核进行处理。请分析下列问题：(1)为筛选出纤维素酶高产菌株，应到 富含纤维素 环境中取样。样液需用 液体 (“液体”或“固体”)培养基进行扩大培养，目的是 增加目的菌株的数量 。纤维素酶是一种复合酶，至少包含C1酶、Cx酶和 葡萄糖苷酶 。(2)鉴别纤维素分解菌时，需在培养基中添加 刚果红 作指示剂，可通过菌落周围透明圈大小选出高效分解纤维素的菌株，原理是 在含有纤
6、维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。透明圈越大，纤维素分解菌的分解能力越强 。(3)用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌，开始加热时，要打开排气阀，使水沸腾一段时间后再关闭排气阀，这样操作的目的是 排尽锅内冷空气 。【解析】(1)实验目的是要筛选出纤维素酶高产菌株，据此可知要找到目的菌需要到富含纤维素的环境中取样，取样后，为了增加目的菌株的数量，要将样品菌在液体培养基中进行选择培养。纤维素酶是一种复合酶，至少包含C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。(2)在含有纤维素的培养基中
7、加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。透明圈越大，纤维素分解菌的分解能力越强。故鉴别纤维素分解菌时，需在培养基中添加刚果红作指示剂，可通过菌落周围透明圈大小选出高效分解纤维素的菌株。(3)用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌，开始加热时，要打开排气阀，使水沸腾一段时间后再关闭排气阀，其目的是排尽锅内冷空气。4(2020甘肃省兰州一中高三期中)哺乳动物成熟的红细胞，在生命科学研究中有着广泛的应用。请回答下列有关问题：(1)从哺乳动物成熟的红细胞中提取血红蛋白时，首先要用相当于红细胞液体
8、体积五倍的 生理盐水 洗涤红细胞，直至 上清液不再呈现黄色 ，表明红细胞已经洗涤干净。然后用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂，释放出血红蛋白。(2)得到血红蛋白混合液之后，可先用离心法进行样品的处理及粗分离，再通过 凝胶色谱 法进一步纯化。使用该方法纯化时，首先分离得到大分子蛋白质的原因是 相对分子量较大的蛋白质不能进入凝胶内部的通道，移动速度较快 。(3)用凝胶电泳法测定蛋白质分子量时，需要在凝胶中加入SDS，目的是 掩盖不同蛋白质间的电荷差别 ，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。(4)若要分解血红蛋白，需要用到蛋白酶。固定化酶常用 化学结合或物理吸附 法，将酶进行固定化的优点是 方便回收和重复利用
9、 。【解析】(1)从哺乳动物成熟的红细胞中提取血红蛋白时，首先要用相当于红细胞液体体积五倍的生理盐水洗涤红细胞3次，直至上清液不再呈现黄色，然后用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂，释放出血红蛋白。(2)得到血红蛋白混合液之后，可先用离心法进行样品处理及粗分离，再通过凝胶色谱法进一步纯化。凝胶色谱法的原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢，因此先从色谱柱洗脱出来的是大分子蛋白质。(3)用凝胶电泳法测定蛋白质分子量时，需要在凝胶中加入SDS，目的是消除净电荷对迁移率的影响(或掩盖不同种蛋白间的电荷差别)，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。(4)固定化酶常用化学结合或物理吸附法，将酶进行固定化的优点是方便回收和重复利用。