1、L单元生物工程及技术目录L单元生物工程及技术1L1 传统发酵技术与发酵工程的应用1L2 微生物的类型、营养和代谢1L3 微生物的培养与应用1L4 酶的应用2L5 DNA的粗提取及蛋白质提取技术2L6 植物有效成分的提取2L7 基因工程与蛋白质工程2L8 植物细胞工程与植物的组织培养技术2L9 动物细胞工程与单克隆抗体2L10 胚胎工程3L11 生物技术的安全性和伦理问题3L12 生态工程3L13 生物工程及技术综合3 L1 传统发酵技术与发酵工程的应用【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】19亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酸重氮化后,再与-萘胺反
2、应生成的溶液呈( )A紫红色蓝色砖红色橘红色【答案】【知识点】L1 传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】A解析：在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合生成紫红色复合物，A正确。【典型总结】本题是考查泡菜中亚硝酸盐含量测定的原理，亚硝酸盐含量测定的原理是在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合生成紫红色复合物，根据颜色的深浅与标准比色卡比色估算出亚硝酸盐的含量。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】18腐乳味道鲜美，易于消化、吸收，是因为其内主要含有的营养成分是
3、（ ）A无机盐、水、维生素 BNaCl、水、蛋白质 C多肽、氨基酸、甘油和脂肪酸 D蛋白质、脂肪、NaCl、水【答案】【知识点】L1 传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】C解析：豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪，都是大分子有机化合物，难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。C正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】17下列关于果醋的制作，错误的是( )A果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一种好氧菌，所以在制作过程中需通氧气
4、B醋酸菌是一种嗜温菌，温度要求较高，一般在50 左右 C醋酸菌能将果酒变成果醋D当氧气、糖源充足时，醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸【答案】【知识点】L1 传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】B解析：醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一种好氧菌，所以在制作过程中需适时通氧气，A正确；醋酸菌是一种嗜温菌，温度要求较高，一般在30-35左右，B错；醋酸菌能在氧气充足，糖源不足的条件下将果酒变成果醋，C正确；当氧气、糖源充足时，醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸，D正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】2.制果醋时，要适时通过充气口进行充气是因为（ ）A.
5、醋酸菌是好氧菌，将酒精变成醋酸时需要氧气的参与 B.酵母菌进行酒精发酵时需要氧气C.通气可防止发酵液霉变 D.防止发酵时产生的二氧化碳气体过多而引起发酵瓶的爆裂【答案】【知识点】C4 细胞呼吸L1 传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】A解析：醋酸菌属于好氧菌，将酒精变成醋酸时需要O2的参与，所以要适时通过充气口进行充气，故A正确；酵母菌酒精发酵是利用的酵母菌无氧呼吸，故B错误；充气是为了保证醋酸菌有充足的氧气进行有氧发酵，故C错误；酒精发酵过程中由于产生二氧化碳要设置出气口，而醋酸发酵过程中不产生气体，故D错误。L2 微生物的类型、营养和代谢【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高
6、三上学期第二次月考（201410）】14.甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是A甲、乙、丙都是异养微生物B甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物C甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物D甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物【答案】【知识点】L2 微生物的类型、营养和代谢【答案解析】D解析：从表中所列的三种培养基成分着手，培养基I 中缺少氮源，培养基中缺少有机碳，培养基中营养成分最全由题意中所给的情况分析，只有甲能在培养基I 中生长，
7、而乙、丙不能说明甲能自行固氮；乙能在中生长，说明乙可自行合成有机碳，是一种自养微生物；而丙只能在中生长，说明它既不能固氮也不能自行合成有机物。由此可知甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物，D正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】4微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（ ）A细菌的大小、形状、颜色 B菌落的大小、形状、颜色 C有无鞭毛 D培养基的不同【答案】【知识点】L2 微生物的类型、营养和代谢【答案解析】B解析：肉眼观察不到细菌的大小、形状、颜色，A错；鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是菌落形态，如
8、菌落的大小、形态、颜色，B正确；肉眼无法观察到细菌的鞭毛，C错；培养基不同不是鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据，D错。【思路点拨】鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是菌落形态，金黄色葡萄球菌为圆形光滑较小菌落，直径一般只有1mm左右，白色或金黄色而枯草杆菌的菌落表面为不规则隆起，菌落较大，直径有5mm左右，表面粗糙，白色或略带一些暗黄色。L3 微生物的培养与应用【生物卷（解析）2015届江西省师大附中高三10月月考（201410）】29下面是弗来明对青霉素的早期研究过程。发现问题：在培养细菌的器具中发现一种青霉菌，在这种青霉菌的周围有没有其它细菌生存。为什么会产生这种现象？提出假设：
9、 。设计实验：用培养液培养青霉菌后，考察这种液体对细菌增殖的影响。实验结果：培养液使细菌的增殖停止。结论：下面几项最适合作为该实验假设的是（ ）A青霉菌与细菌之间是共生关系 B青霉菌污染了细菌生存的环境C青霉菌产生了对人体有益的物质 D青霉菌能产生抑制细菌增殖的物质【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】D解析：弗莱明在培养细菌的器具中发现一种青霉菌，在这种青霉菌的周围没有其他细菌生存，因此，他提出的问题应该是：青霉菌产生的处为什么没有细菌？作出假设是对提出问题的回答，弗莱明针对青霉菌处没有细菌的事实作出的假设应该是：青霉菌能产生抑制细菌增殖的物质。D正确。【生物卷（解析）201
10、5届江苏省盐城中学高三10月月考（201410）】18. 下列有关微生物培养的说法，正确的是A制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板B分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一碳源C配置培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性D在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】B解析：制备固体培养基的操作顺序应为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；配置培养不同微生物的培养基时PH应有所不同；在以尿素为唯一尿源的培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌。【思路点拨】根据微生物培养分离的实验进行分析。【生物卷（解
11、析）2015届甘肃省兰州一中高三9月月考（201409）】39、 生物选修1：生物技术实验 （每空2分，共16分） 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 分解成 。（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。 （3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基：（注：“+”表示有，“”表示无）据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用
12、于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 。【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】（1）纤维二糖 葡萄糖（2）红色 透明圈 （3）不能 液体培养基不能分离单菌落 不能 乙培养基中没有纤维素，不能形成CR纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定为纤维素分解菌 解析：葡萄糖苷酶的作用是将纤维二糖分解成葡萄糖；CR可与纤维素形成红色复合物，纤维素被纤维素分解菌分解后不会与CR形成红色复合物，因而该菌落分布的位置为透明的；培养基甲中没有加琼脂，可知为液体培养基，液体培养基不能分离单菌落，不能用于分离和鉴别纤维素分解菌；培养
13、基乙中没有纤维素，不能用于分离鉴别纤维素分解菌。【思路点拨】根据纤维素分解菌的培养与分离进行分析。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】47（每空2分，共14分）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起，圆褐固氮菌属于固氮细菌。请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：主要步骤：制备两种培养基：一种是_培养基，另一种_的培养基。分别分成两份，依次标上A，A的B，B，备用。分别向A、B培养基中接种_。接种后，放在恒温箱中培养34天。分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A、B培养基中。接
14、种后，把A、B培养基放入恒温箱中培养34天。回答问题：在步骤中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有 、。第两个步骤的目的是。【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】（1）无氮 加青霉素 混合菌（2）培养基高压蒸气灭菌接种环在酒精灯火焰上灭菌接种过程在酒精灯火焰附近进行获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌解析：（1）将微生物进行分离一般采用选择培养基。选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。根据
15、这一原理可将两种微生物分离开来。（2）在微生物培养过程中的灭菌措施有：培养基和培养皿的高压蒸气灭菌、金属用具的灼烧灭菌、接种过程在酒精灯火焰附近进行等。为获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌，可以用选择培养基重复进行选择培养。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】16通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微牛物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10酚可以抑制细菌和霉菌。利用下述方法不能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ） A大肠杆菌 B霉菌 C放线菌 D固氮细菌【答案】【知识
16、点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】A解析：大肠杆菌需要氮源、青霉素抑制大肠杆菌生长、酚也抑制细菌的生长；霉菌是真菌，在培养基中加入青霉素后，青霉素可以抑制细菌和放线菌，但是不抑制真菌，所以加入青霉素的培养基可以选择出霉菌；培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌，所以可以筛选放线菌；固氮菌的氮源氮气，在培养基中不需要氮源，所以缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，但是固氮细菌可以生长。A符合题意。 【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】15农田土壤的表层，自生固氮菌的含量比较多，将用表层土制成的稀泥浆，接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌
17、与其它细菌分开，对培养的要求是（ ）加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不加葡萄糖 37恒温箱培养 28 -30温度下培养A B C D【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】C解析：自生固氮菌是异养菌，生长繁殖需要有机碳源；自生固氮菌能利用空气中的氮气，培养基中不加氮源，固氮菌能生长繁殖，不能固氮的菌不能生长繁殖，；自生固氮菌的生长繁殖的最适宜温度是2830；自生固氮菌对青霉素敏感，培养基中不能加青霉素所以如果从土壤浸出液中分离出自生固氮菌对培养基的要求是不加抗生素、不加氮素、加葡萄糖、2830恒温箱中培养。C正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高
18、三上学期第二次月考（201410）】13能排除培养基是否有杂菌污染的方法是（ ）A.将未接种的培养基放在实验桌上培养 B.将未接种的培养基放在窗台上培养 C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养 D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】C解析：实验桌旁本身就有许多微生物，没法判断培养基上的菌落是来自培养基本身还是来自培养环境，A错；窗台上周围含有微生物，无法判断培养基上的菌落是来自培养基本身还是来自培养环境，B错；将未接种的培养基放在恒温箱中培养，一段时间后若有菌落说明培养基被污染，若无菌落说明培养基没有被污染，C正确；培养基已经接种微生物，无法判
19、断培养基上的菌落是来自培养基本身还是来接种的微生物，D错。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】11下列叙述错误的是（ ）培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素 培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性培养细菌时需将PH调至中性或微碱性 培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】B解析：维生素是乳酸菌生长繁殖所必须的，在体内又不能合成，因此要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素，A正确；霉菌生长所需要的PH是酸性，培养霉菌时应将PH调至酸性，在碱性情况下不易繁殖，甚至会导致霉菌死亡，培养霉菌时应将PH调至酸性，C
20、错；细菌生长繁殖所需要的PH是中性或微碱性，所以培养细菌时需将PH调至中性或微碱性，C正确；厌氧微生物在有氧时无氧呼吸受抑制，因此培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件，D正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】10.涂布平板操作需要用到（ ）A.接种环、滴管、酒精灯 B.接种环、移液管、酒精灯 C.涂布器、移液管、酒精灯 D.涂布器、接种环、酒精灯【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】C解析：涂布平板时，需要移液管将菌液进行一系列梯度的稀释；需要用酒精灯对涂布器进行灼烧灭菌；进行涂布时，需要用涂布器将菌液涂布均匀，该操作要在酒精
21、灯的火焰旁进行。C正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】9有关倒平板的操作错误的是（ ）将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D等待平板冷却凝固后需要倒过来放置【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】C解析：将过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，防止培养皿被污染，A正确；使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰，对锥形瓶的口径处进行灼烧灭菌，防止空气中的杂菌污染，B正确；倒平板时不能把培养皿盖完全打开并放到桌面上，这样会污染培养皿中的培养基，C错；倒平板后冷却需要倒过来放置，
22、防止皿盖上的水珠滴落到培养基上，D正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】8.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是【生物卷(解析)2015届江苏省扬州中学高三10月质量检测（201410）】32、（ 9分）固定化酶技术运用工业化生产前，需要获得酶的有关参数。如右图：曲线表示某种酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比；曲线是将该种酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到酶的热稳定性数据。请回答下列问题：（1）与普通酶制剂相比，固定化酶在生产中的优点是 。（2）曲线中，35和80的数据点是在 时测得
23、的。通过本实验，你对酶的最适温度的认识是 。该种酶固定化后运用于生产，最佳温度范围是 。（3）研究发现有甲、乙两种物质能降低该种酶的催化效率，该酶催化的底物浓度变化会改变甲物质对酶的影响，而不会改变乙物质对酶的影响。下图是降低酶活性的两种机制模型，符合甲、乙物质对酶影响的模型分别是 、 。（4）在酶的活性不受抑制时，起始反应速率与底物浓度的关系如下图所示。请在答题卡的指定位置画出加入甲物质时，起始反应速率与底物浓度之间的关系曲线。【答案】【知识点】L4 酶的应用【答案解析】（1）可反复使用（2）80 既能使酶具有高的催化活性，又能维持较长时间 6070（3）A B（4）曲线如下图（1）与普通酶
24、制剂相比，固定化酶的优点是：可以反复使用。（2）由于曲线是将该种酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，而酶的最适温度为80，因此曲线中数据均为80下的数据；结合曲线可知，酶的最适温度可以认为是既能使酶具有高的催化活性，又能维持较长时间的温度；该酶的最适温度范围是6070。（3）观察两个模型可知，图A中抑制剂和底物都可以和酶结合，因此底物浓度的变化，可以影响酶的催化效率；图B中抑制剂与酶结合后，酶的结构发生改变，不能和底物结合，因此底物浓度升高，也不能影响酶的催化效率。故甲乙分别对应图A和图B中模型。（4）根据甲模型，加入抑制剂甲后，起始反应速率变小，但是随着底物
25、浓度的增加，起始反应速率加快，但不能超过不加抑制剂时的起始反应速率。A. 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B. 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C. 待培养基冷却至50左右时进行倒平板 D. 待平板冷却凝固约510min后将平板倒过来放置【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】A解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错；将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，B正确；待培养基冷却至50左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，C正确；待平板冷却凝固约510min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿低在上，D正确。【思路点
26、拨】用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行，其中制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】7.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌、酒精消毒、火焰灼烧灭菌的几种不同的处理，这些方法可依次用于杀死哪些部位的杂菌（ ）A.接种环、手、培养基B.高压锅、手、接种环C.培养基、手、接种环D.接种环、培养基、手【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】C解析：高压蒸汽气灭菌通常用于培养
27、基的灭菌；用酒精擦拭双手是消毒的一种方法；火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环、接种环等金属用具。C正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】6细菌培养基通常在121压力锅中灭菌。如果只有在100的温度下将细菌培养基灭菌，以下哪一种生物仍会存活？（ ）A大肠杆菌 B一种青霉菌 C枯草芽孢杆菌 D鼠伤寒沙门氏菌【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】C解析：芽孢杆菌能形成芽孢（内生孢子），对外界有害因子的抵抗力强，大肠杆菌、青霉菌、鼠伤寒沙门氏菌不能形成芽孢，在100的温度下可以灭活；枯草芽孢杆菌能形成芽孢，抵
28、抗高温的能力强，在100的温度下仍可能存活。C正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】5下列有关平板划线接种法的操作错误的是 （ ）A将接种环放在火焰上灼烧 B将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C蘸取菌液和划线要在火焰旁进行 D划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连【答案】【知识点】L3 微生物的培养与应用【答案解析】D解析：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，A正确；接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，B正确；蘸取菌液和划线要在火焰
29、旁进行，防止空气中的杂菌，C正确；划线时要避免最后一区的划线与第一区线连 因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，D错。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】3. 发酵工程的第一个重要工作是选种优良的单一纯种。消灭杂菌，获得纯种的方法不包括（）A根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基 B根据微生物缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子C根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸 D根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗菌素【答案】【知识点】L3
30、 微生物的培养与应用【答案解析】C解析：根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基可以选择微生物种类，能获得纯种，所以A正确；在培养基中增减不同的生长因子作用也是选择微生物，所以B正确；抗生素也可对生物起选择作用，抗生素杀菌，但对真核生物无效果，所以D正确；根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸，核酸就是DNA和RNA，它不会直接影响到微生物自身的遗传组成，即使被微生物利用，也是被分解为核苷酸后利用，所以培养基中加入不同比例的核酸（DNA、RNA），不会对微生物起选择作用，C错误。L4 酶的应用【生物卷（解析）2015届江苏省盐城中学高三10月月考（201410）】19
31、. 在DNA的粗提取和鉴定实验中，以下操作步骤错误的是A将鸡血细胞置于蒸馏水中并用玻棒快速搅拌释放出DNA等核物质B在DNA析出和再溶解过程中要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C在用酒精析出DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却 D鉴定DNA时，需要将甲基绿试剂加入到含DNA溶液中并进行水浴加热【答案】【知识点】L5 DNA的粗提取及蛋白质提取技术【答案解析】DL5 DNA的粗提取及蛋白质提取技术L6 植物有效成分的提取【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】46.（每空1分，共1分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降
32、钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：（1）Klenow酶是一种_酶，合成的双链DNA有_个碱基对。（2）获得的双链DNA经EcoR（识别序列和切割位点-GAATTC-）和BamH（识别序列和切割位点-GGATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验
33、证。大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它_,_,_。设计EcoR和BamH双酶切的目的是_。要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_。（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_。（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是_。【答案】【知识点】L7 基因工程与蛋白质工程【答案解析】(1)DNA聚合酶126(2)繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少保证目的基因和载体定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接)标记基因(3)合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象(4)蛋白质工程解析：本题从预期蛋白质功能出发，通
34、过改造基因，合成所需蛋白质，所以应用的现代生物工程技术为蛋白质工程。(1)由题干可知，由单链DNA合成双链DNA需要酶，相当于DNA复制，所以Klenow酶是一种DNA聚合酶，合成双链DNA碱基对数为(7218)72126。(2)选用原核生物作为受体细胞是因为其为单细胞，繁殖快，遗传物质相对较少。用两种酶切割目的基因是为了防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接。(3)最初重组质粒未发现完全正确的基因序列，可能是合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】38在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中
35、，下列操作错误的是（ ）A用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C将重组DNA分子导入烟草原生质体 D用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞【答案】【知识点】L7 基因工程与蛋白质工程【答案解析】A解析：限制性核酸内切酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，而烟草花叶病毒的核酸是核糖核苷酸，A错；构建基因表达载体时，需要用限制酶切割得到抗除草剂基因和切开载体，再用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA，B正确；基因表达载体构建好之后，需要将重组DNA分子导入受体细胞（烟草原生质体），C正确；基因工程的最后一步是目的基因的检测和鉴定，可以用含有除草剂的培养基筛
36、选转基因烟草细胞，D正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】37下列叙述符合基因工程概念的是（ ）AB淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上【答案】【知识点】L7 基因工程与蛋白质工程【答案解析】B解析：B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，这属于细胞工程的范畴，A错；将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，符合基因工程概念，B
37、正确；用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株，属于诱变育种，不符合基因工程概念，C错；基因工程是按照人们的意愿，对生物进行的定向改造，而自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上不符合基因工程的概念，D错。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】21. 有关基因工程的叙述正确的是 （ ）A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料【答案】【知识点】L7 基因工程与蛋白质工程【答案解析】D解析：基因工程又叫DNA重
38、组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。限制性内切酶在获得目的基因和基因表达载体的构建时都要用到；重组质粒的形成在细胞外完成的；质粒有的可作运载体，天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。所以A、B、C不正确。蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料，通过逆转录人式合成目的基因，故D正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】20人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的
39、主要作用是( )A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B.有利于对目的基因是否导入进行检测 C.增加质粒分子的分子量 D.便于与外源基因连接【答案】【知识点】L7 基因工程与蛋白质工程【答案解析】B解析：抗性基因的作用是帅选重组子，A错；抗性基因是标记基因，有利于对目的基因是否导入进行检测，B正确；细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，其作用不是增加质粒分子的分子量，C错；质粒上含有限制酶切割位点时，便于与外源基因连接，D错。L7 基因工程与蛋白质工程【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】49.（每空1分,共11分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑
40、腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题：（1）过程所需的酶是 。（2）过程后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 。原生质体经过 再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 植株的根尖，通过 、 、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比
41、较染色体的形态和数目。（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株14进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株14中一定是杂种植株的有 ， ， 。（6）对杂种植株进行 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。【答案】【知识点】L8 植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】（1）纤维素酶和果胶酶 （2）叶绿体 （3）保持原生质体完整性 （4）双亲（或花椰菜和黑芥）解离漂洗 （5）1、2、4 （6）黑腐病菌解析：（1）表示去除植物细胞壁获得原生质体的过程，需要用纤维素酶和果胶酶处理细胞。（2）由于要培
42、养的是抗黑腐病的花椰菜，所以需要供体含有黑腐病抗性基因，供体是由光照培养的黑芥苗提供的，所以供体一定含有叶绿体。（3）原生质体培养液中加入甘露醇可以保持一定的渗透压，防止原生质体吸水涨破，这样可以保持原生质体的完整性。（4）要分析再生植株染色体变异类型，需要观察再生植株与双亲的染色体差异，观察染色体需要经过解离、漂洗、染色和制片几个过程。（5）再生植株1、2、4同时含有花椰菜和黑芥的基因组，所以一定是杂种植株，而植株3只含黑芥的基因组，所以其一定不是杂种植株。（6）黑腐病菌的抗性基因进入到杂种植物体内，杂种植株能抗黑腐病，所以对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，是筛选杂种植株的方法。【生物卷（解析
43、）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】44.为获得纯和高蔓抗病番茄植株，采用了下图所示的方法：图中两对相对性状独立遗传。据图分析，不正确的是( )A、过程的自交代数越多，纯合高蔓抗病植株的比例越高 B、过程可以任取一植株的适宜花药作培养材料C、过程包括脱分化和再分化两个过程 D、图中筛选过程不改变抗病基因频率【答案】【知识点】G4 杂交育种与诱变育种L8 植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】D解析：表示连续自交过程，这样可以提高高蔓抗病植株的纯合度，A正确；由于F1植株的基因型都相同，所以过程可以任取一植株的适宜花药作培养材料，B正确；是植物组织培养获得
44、转基因植株的过程，包括脱分化和再分化过程两个阶段，C正确；筛选纯合高蔓抗病植株的过程实质就是定向改变基因频率的过程，即使抗病基因频率升高，D错。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】41.在细胞工程中，需要利用细胞的全能性，下列细胞中全能性最高的是（ ） A.胡萝卜的韧皮部 B.水稻的花粉 C.绵羊的乳腺 D.大白鼠的受精卵【答案】【知识点】L8 植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】D解析：细胞的全能性最高的是受精卵细胞，其次是生殖细胞，最差的是体细胞胡萝卜韧皮部细胞属于体细胞，水稻的花粉细胞属于生殖细胞，大白鼠的受精卵全能性高于生殖细胞和
45、胡萝卜韧皮部细胞绵羊的乳腺细胞全能性受到限制。D正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】40.下列属于植物细胞工程实际应用的是：（ ） 制造人工种子 培育抗盐植物 制作“生物导弹” 培育单倍体 生产脱毒植株A. B. C. D.【答案】【知识点】L8 植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】C解析：通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，故正确；利用基因工程获得含抗盐基因的重组细胞，经过植物组织培养获得抗盐植物，故正确； “生物导弹”由单克隆抗体和放射性同位素、化学药物或细胞毒素组成，涉及的技术
46、是动物细胞融合和动物细胞培养，故错误；利用花粉离体培养技术培育单倍体幼苗，故正确；利用分生区（如茎尖）细胞进行组织培养，形成脱毒苗，故正确。【思路点拨】植物细胞工程技术的应用：（1）植物繁殖的新途径：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子；（2）作物新品种的培育：培育单倍体、突变体的利用；（3）细胞产物的工厂化生产。培育抗盐植物是基因工程的应用；制作“生物导弹”是动物细胞工程的应用。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】39在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的是（ ）A利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株 B利用花药离体培养得到单倍体植株
47、 C利用基因工程培育抗寒的番茄植株 D利用细胞工程培育“番茄马铃薯”杂种植株【答案】【知识点】L8 植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】A解析：利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株，原理是染色体变异，A正确；花药离体培养得到单倍体，由配子发育形成个体，体现植物细胞的全能性，B错误；通过基因工程的方法获取含抗寒基因的重组细胞，经过植物组织培养获得抗寒的番茄植株，C错误；植物体细胞杂交形成“番茄-马铃薯”杂种细胞，经过植物组织培养形成杂种植株，故D错。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】30. 以下四种生物工程技术中培育出的新个体
48、，只有一个亲本遗传性状的是 ( ) A植物组织培养 B细胞融合 C动物胚胎移植 D细胞核移植【答案】【知识点】L8 植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】A解析：植物组织培养是高度分化的植物细胞、组织、器官离体培养技术，是无性生殖，A正确；细胞融合含有两细胞的全部遗传物质，B错误；动物胚胎移植中的胚胎是由精子和卵细胞结合成发育而成的，经动物胚胎移植培育出的新个体的遗传物质来自于两个亲本，C错误；经细胞核移植形成的重组细胞，细胞核是来自于供体细胞，细胞质来自于受体细胞，重组细胞中的遗传物质来自于两个亲本，所以培育培育出的新个体具有两个亲本的遗传性状，D错误。【生物卷（解析）2015届安徽省
49、黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】28.在植物组织培养过程中，愈伤组织的形成和形态发生是十分关键的一步。而这除需要必备的营养和一些刺激因素外，还需要有起诱导作用的物质，它是 ( )A铜、锌等微量元素 B细胞分裂素和生长素 C蔗糖和葡萄糖 D维生素和氨基酸【答案】【知识点】L8 植物细胞工程与植物的组织培养技术【答案解析】B解析：在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽。生长素用量与细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。B正确。【生物卷（解析）2015届
50、陕西省西安一中高三上学期二模考试（201410）】25图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp、BamH、Mbo、Sma4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。下列分析中正确的是A. 若用限制酶Sma完全切割图1中DNA片段，能产生2个黏性末端B. 若单纯为了获取目的基因，也可以选择限制酶MspC. 若需将目的基因D导入图2中的质粒，应选择的限制酶是BamHD. 为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，培养基上需添加抗生素A和抗生素B【答案】【知识点】L7 基因
51、工程与蛋白质工程【答案解析】C解析：限制酶Sma的识别序列为CCCGGG，用限制酶Sma完全切割图1中DNA片段，能产生2个平末端，而不是黏性末端，A错；限制酶Msp的识别序列是CCGG，在目的基因上，用该限制酶切割目的基因会破坏末端基因，所以为了获取目的基因，不能选择限制酶Msp，而应选择限制酶BamH，B错；限制酶Msp和Sma切割会破坏目的基因，用限制酶Mbo切割会将质粒上的两个标记基因都破坏，但在目的基因两侧和质粒上都含有限制酶BamH的识别序列，所以将目的基因D导入图2中的质粒，应选择的限制酶是BamH，C正确；用限制酶BamH切割破坏了抗生素A抗性基因，但没有破环抗生素B抗性基因，
52、因此含有重组质粒的大肠杆菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A，所以为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，培养基上需分别添加抗生素B和抗生素A，D错。L8 植物细胞工程与植物的组织培养技术【生物卷（解析）2015届江苏省盐城中学高三10月月考（201410）】25下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述正确的是A图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙C用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能增殖，未融合细胞均不能增殖D丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁【答案】【知识点】L9 动物细胞
53、工程与单克隆抗体【答案解析】ABD解析：乙细胞中两两融合的有三种：B淋巴细胞与B淋巴融合的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞的融合，杂交瘤细胞，其中B淋巴细胞与B淋巴融合的细胞不能增殖，未融合细胞有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，其中骨髓瘤细胞能增殖。【思路点拨】根据单克隆抗体的制备原理及过程分析，了解相关细胞的特点。第II卷 非选择题 (共65分)三非选择题：本部分包括7小题，共65分。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】48（每空1分，共10分）克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录
54、水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答：（1）图中重组细胞的细胞核来自 细胞，早期胚胎移入受体子宫后继续发育，经桑椹胚、囊胚和 胚最终发育为克隆猪。（2）在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2 cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2 mRNA的分子数，从而反映出Bcl-2基因的转录水平。图中X表示 过程。从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成 用于PCR扩增，PCR扩增过程第一轮循环的模板是 在PCR过程中利用技术可检测出cDNA中Bcl-2 cDNA的分子数。()该过程所涉及的现
55、代生物技术有、 和 。（）目前使用的供体细胞一般都选择传代10代以内的细胞，原因是；【答案】【知识点】L7 基因工程与蛋白质工程L9 动物细胞工程与单克隆抗体L10 胚胎工程【答案解析】（1）体 原肠 （2）反转录 引物 Bcl-2 cDNA（3）动物细胞培养、核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植 （4）10代以内的细胞保持正常的二倍体核型解析：（1）图中卵母细胞是受体细胞，良种猪的体细胞是供体细胞提供细胞核，形成重组细胞；早期胚胎发育经过桑椹胚、囊胚和原肠胚，最终形成克隆猪。（2）mRNAcDNA的过程表示反转录过程。PCR技术获取目的基因的前提是已知Bcl-2基因或者Bcl-2mRNA的核苷
56、酸，以便合成引物；条件包括模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶，根据题中流程图，第一轮循环的模板式cDNA。（3）据图分析，涉及的现代生物技术有动物细胞培养、核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植。（4）供体细胞一般都选择传代10代以内的细胞，原因是传代10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，10代之后，细胞发生遗传物质改变的概率增加，到50代后，细胞发生突变形成的癌细胞。物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】45.下列关于细胞工程的叙述，错误的是( )A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞的细胞壁和将动物
57、组织分散成单个细胞均需酶处理C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同【答案】【知识点】L8 植物细胞工程与植物的组织培养技术L9 动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】D解析：电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合，体现细胞膜的流动性，A正确；纤维素酶或者果胶酶去除植物细胞的细胞壁，用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶处理，将动物组织分散成单个细胞，B正确；小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合形成的杂交瘤细胞，即能无限繁殖，又能产生特异性抗体，C正确；甲染色体数目2M，乙为2N，体细胞杂种染色体数
58、目为2M+2N，甲乙两品种杂交后代的染色体数目为M+N，故D错【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】43.细胞工程技术是一门综合科学技术，下列哪项技术不属于细胞工程？（ ） A.有性杂交 B.体细胞杂交 C.组织培养 D.细胞核移植【答案】【知识点】L9 动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】A解析：有性杂交是利用基因重组的原理进行的杂家育种的方法，不属于细胞工程技术，A正确；体细胞杂交属于植物细胞工程中的技术，B错；组织培养也属于植物细胞工程中的技术，C错；细胞核移植属于动物细胞工程中的技术手段，D错。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中
59、高三上学期第二次月考（201410）】29.动物细胞培养的特点是 ( )细胞贴壁 有丝分裂 分散生长 接触抑制 减数分裂 原代培养一般传代110代 A B C D【答案】【知识点】L9 动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】A解析：动物细胞培养过程是有丝分裂、细胞增殖过程，存在贴壁生长、接触抑制的特点。原代培养到10代左右，再传代培养，所以A选项正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】27.下列过程中，没有发生膜融合的是 ( )A植物体细胞杂交 B受精过程 C氧进入细胞中的线粒体 D效应B细胞产生抗体【答案】【知识点】L9 动物细胞工程与单克隆抗
60、体【答案解析】C解析：植物体细胞杂交两种原生质体融合，体现了细胞膜等膜的融合， A不符合题意；有性杂交的精子与卵细胞融合形成受精卵，体现细胞膜的流动性，B不符合题意；氧进入到线粒体内只是物质出入生物膜的物质运输过程，没有发生膜融合，C符合题意；效应B细胞合成和分泌抗体的过程，是以出芽方式形成具膜小泡移到另一膜上，与该膜融合后成为该膜的一部分，D不符合题意。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】26.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，所用的B淋巴细胞是来自( )A骨髓的B淋巴细胞 B脾脏的能产生抗体的
61、B淋巴细胞 C胸腺的B淋巴细胞 D脾脏经过筛选的，能产生单一抗体的B淋巴细胞【答案】【知识点】L9 动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】B解析：杂交瘤细胞培养需要的B细胞是经过免疫的能产生抗体的效应B淋巴细胞，B正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】25.关于动物细胞培养的错误叙述是 ( )A用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织 B将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液 D动物细胞培养只能传50代左右。所培育的细胞会衰老死亡【答案】【知识点】L9 动物细胞工程
62、与单克隆抗体【答案解析】D解析：胚胎或幼龄动物的器官或组织细胞增殖能力强，故A正确。先用胰蛋白酶分解动物细胞直接蛋白质，使之分散容易培养，故B正确。在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液继续培养，否则细胞会因为接触抑制停止增殖，故C正确；动物细胞培养只能传50代左右，部分细胞可能会出现变异变成不死性细胞，D错。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】24.离体的植物组织或细胞在适当培养条件下发育成完整的植株，离体动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体，原因是( )A动物细胞内没有成套的遗传物质 B动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限
63、制，分化潜能变弱 C动物细胞的细胞核太小 D动物细胞的全能性低于植物细胞【答案】【知识点】L9 动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】B解析：动物细胞的全能性随分化而受限变弱，只能通过核移植实现克隆动物的目的；动物体细胞克隆：将供体体细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合，借助于卵细胞的发育能力，经培养发育成胚胎进而形成个体的技术。B正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】23.一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件 ( )无毒的环境 无菌的环境 合成培养基需加血浆 温度与动物体温相近 需要02，不需要 C02 C02能调培养液pH A
64、B C D【答案】【知识点】L9 动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】D解析：动物细胞培养需要无毒环境，故正确；动物细胞培养需要无菌环境，故正确；用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质故正确；动物细胞培养需要适宜的温度和PH，其中温度要与动物体温相近，故正确；动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，故错误；5%的CO2能调培养液pH，故正确。【典型总结】动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：消毒、灭菌添加一定量的抗生素定期更换培养液，以清除代谢废物；（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元
65、素等，还需加入血清、血浆等天然物质；（3）温度和PH；（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】22下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是 ( )ADNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接 BRNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录C一种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因 D胰蛋白酶能作用于离体的动物组织，使其分散成单个细胞【答案】【知识点】L7 基因工程与蛋白质工程L9 动物细胞工程与单克隆抗体【答案解析】C解析：DNA连接酶能使双
66、链DNA片段的不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接，A正确；RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息转录成信使RNA，B正确；一种DNA限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并从特定部位切开，C错；胰蛋白酶能分解细胞间的物质，使其分散成单个细胞，D正确。L9 动物细胞工程与单克隆抗体【生物卷(解析)2015届江苏省扬州中学高三10月质量检测（201410）】33、人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白
67、蛋白就成为可能。大致过程如下：a将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成重组细胞；b取出重组细胞的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞；c电脉冲刺激重组细胞促使其形成早期胚胎；d将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。请回答下列问题：（1）重组细胞和中_(/)实现了基因的重组。（2）在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是_。（3）实验过程b利用的技术是_，胚胎工程操作中最后环节是_。（4）若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型_(相同/不同)，理由是_，此项技术称为_。（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞(ES细
68、胞)，培养如下：早期胚胎内细胞团胚胎干细胞。在培养过程中，必须用_处理内细胞团，使之分散成单个细胞。（6）哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及_等物质。【答案】【知识点】L10 胚胎工程【答案解析】(1)(2)雌性转基因牛进入泌乳期后，可以从其乳汁中获得血清白蛋白 (3)核移植胚胎移植 (4)相同它们来自同一个受精卵胚胎分割(5)胰蛋白酶 (6)动物血清（1）重组细胞实现了基因的重组。（2）选择雌性奶牛胚胎的是因为雌性转基因牛进入泌乳期后，可以从其乳汁中获得血清白蛋白。（3）过程b利用了细胞核移植的技术，胚胎移植是胚胎工程操作中的
69、最后环节，该环节能否成功，与供体和受体的生理状态有关（4）早期胚胎分离成的若干胚胎细胞发育成的小牛基因型是相同的，因为这些胚胎干细胞都是同一个受精卵经过有丝分裂得到的，此项技术称为胚胎分割在对囊胚阶段的胚胎进行操作时，需要特别注意的问题是将内细胞均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育（5）从早期胚胎中获取胚胎干细胞后，必须用胰蛋白酶处理内细胞团，使之分散成单个细胞将ES细胞培养在饲养层细胞上或添加抑制因子的培养液中，能够维持ES细胞不分化的状态在培养液中加入分化诱导因子（或牛磺酸、丁酰环腺苷酸等），可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化（6）哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐
70、和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等物质【典型总结】根据题意和图示分析可知：a过程是基因工程，b过程是细胞核移植；d过程是胚胎移植图示为乳腺生物反应器的培育过程，首先构建基因表达载体，即将血清白蛋白基因与质粒连接形成重组质粒，其次将目的基因导入雌性奶牛胚胎细胞中形成重组细胞；利用核移植技术将胚胎细胞核移植到去核卵细胞，形成重组细胞；进行早期胚胎培养和胚胎移植，最终得到转基因克隆牛该过程使用到了基因工程、细胞工程、胚胎工程【生物卷（解析）2015届江苏省盐城中学高三10月月考（201410）】20. 下列有关胚胎工程及其应用的叙述中，错误的是 A体外受精和胚胎发育的研究为
71、胚胎工程提供了理论基础 B胚胎移植技术可在畜牧业生产中加速育种进程C桑葚胚、囊胚是进行胚胎分割的最佳时期D促进动物超数排卵的激素主要是垂体产生的促性腺激素【答案】【知识点】L10 胚胎工程【答案解析】A解析：体内受精和胚胎发育的研究为胚胎工程提供了理论基础【思路点拨】注意体内受精与体外受精的不同。二、多选题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】42.胚胎干细胞是从时期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。它在基础生物学、畜牧
72、学和医学上都具有十分重要的应用价值。下列关于其说法不正确的是（ ） A.用于治疗人类的某些顽症 B.可用于培育人造组织器官 C.是研究体外分化的理想材料 D.可利用它通过有性生殖繁殖后代【答案】【知识点】L10 胚胎工程【答案解析】D解析：可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、心衰竭、成骨不良，A正确；培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题，B正确； ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态；在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分
73、化和细胞凋亡机理提供了有效的手段，C正确；胚胎干细胞属于体细胞，利用它繁育后代的过程应属无性生殖，D错。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】35老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的一淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降某些基因的突变会导致一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是（ ）A胚胎移植技术 B胚胎干细胞技术 C单克隆抗体技术 D基因治疗技术【答案】【知识点】L10 胚胎工程【答案解析】A解析：胚胎移植是为了获得优良个体，不能用于治疗疾病，A错误；胚胎干细胞技术能提供和修复受损伤的神经元，B正确；
74、单克隆抗体技术能降低淀粉样蛋白体的含量，定向改善免疫能力，C正确；基因治疗技术能导入正常的基因，治疗老年痴呆症，D正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】34下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述错误的是（ ）A对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理 B人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎分割C利用胚胎分剖技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎 D一次给受体母羊植入多个胚胎可增加双胞胎和多胞胎的比例【答案】【知识点】L10 胚胎工程【答案解析】B解析：在进行胚胎移植时需要对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理，使它们属于相同的生理状态，
75、A正确；胚胎分割应该取形态正常、发育良好的桑椹胚或囊胚进行，B错误；胚胎分割技术属于无性繁殖技术，可以保持亲本的优良性状，C正确；胚胎移植可提高优良种畜的繁殖率，D正确。【典型总结】1、胚胎移植过程两次用到促性腺激素：一次是进行同期发情处理；一次是促进超数排卵；2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术；3、特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一；4、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）
76、】33.精子获能所利用的化学物质可以是 ( )A一定浓度的肝素 B一定浓度的ATP C一定浓度的葡萄糖 D一定浓度的血清【答案】【知识点】L10 胚胎工程【答案解析】A解析：对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法对于啮齿动物、家兔和猪等动物的精子，一般采用培养法，即将取自附睾的精子，放入人工配置的获能液中，培养一段时间后，精子就可获能；对于牛、羊等家畜的精子常采用化学法，即将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液。A正确。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】32.下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是 ( )A受孕母畜体内的早期胚
77、胎能够移植 B受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态C超数排卵技术要使用一定的激素 D试管婴儿的受精及胚胎发育过程在试管内完成【答案】【知识点】L10 胚胎工程【答案解析】D解析：一般胚胎移植选择桑椹胚和囊胚时期，因此受孕母畜体内的早期胚胎处于游离状态，能够移植，A正确；供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境，因此受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态，B正确；超数排卵技术要使用一定量的促性腺激素注射供体母牛，C正确；试管婴儿的受精及早期胚胎发育过程在试管内完成，但是发育到桑椹胚或囊胚时要移植到母体的子宫中进一步发育，D错误。【生物卷（解析）2015届安徽省黄山
78、市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】31. 下列能正确表示高等动物胚胎发育顺序的是（ ）A受精卵卵裂原肠胚囊胚组织器官分化幼体 B卵卵裂原肠胚组织器官分化幼体 C受精卵桑椹胚原肠胚幼体 D受精卵桑椹胚囊胚原肠胚幼体【答案】【知识点】L10 胚胎工程【答案解析】D解析：高等动物胚胎发育为：受精卵首先通过卵裂形成32个细胞的桑椹胚，桑椹胚细胞再增殖分化形成具有囊胚腔的囊胚，囊胚继续分化形成具有三个胚层分化的原肠胚，然后出现组织器官的分化，最后形成幼体。D正确。L10 胚胎工程【生物卷（解析）2015届安徽省黄山市屯溪一中高三上学期第二次月考（201410）】36下列关于转基因植物的叙述
79、，正确的是（ ）A转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中 B转抗虫基因的植物不会导致昆虫群体抗性基因频率增加C动物的生长激素基因转入植物后不能表达 D如转基因植物的外源基因于自然界，则不存在安全性问题【答案】【知识点】L11 生物技术的安全性和伦理问题【答案解析】A解析：转入到油菜的基因，可以通过花粉传入环境中，A正确；由于植物与害虫间是相互选择的，转抗虫基因植物可使昆虫群体抗性基因频率增加，B错误；由于不同生物共用一套遗传密码，所以动物生长素基因转入植物后也能表达，C错误；转基因技术的安全性问题，要通过验证才能得到证实，D错误。【生物卷（解析）2015届陕西省西安一中高三上学期二模
80、考试（201410）】31.（8分）日前，英国研究人员利用最新的3D打印技术，“打印”出了活体胚胎干细胞。实验证明，这些干细胞仍保持着人体胚胎干细胞的正常分化能力。科学家使用活体卵子及皮肤成纤维细胞，在实验室已成功克隆出了数个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的胚胎干细胞。请回答：（1）自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或_ 中分离出来的一类细胞。（2）上述过程中要应用到的动物细胞工程技术有_ 、_ 。胚胎干细胞在形态 上表现为体积小，细胞核大，_ 明显；在功能上具有_ 。（3）将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变，在分子水平上需要采用_ _ 技术。（4）若选用囊胚进行胚胎
81、分割，要注意对其_ 做到均等分割。（5）胚胎移植是否成功，与供体和受体的生理状况有关。大量的研究已经证明，为胚胎在受体内存活提供可能的生理基础是_ 。【答案】【知识点】L9 动物细胞工程与单克隆抗体L10 胚胎工程【答案解析】（1）原始性腺 （2）动物细胞培养 （体）细胞核移植 核仁 发育的全能性 （3）DNA分子杂交（基因探针） （4）内细胞团（5）受体与子宫内的供体胚胎基本不发生免疫排斥反应解析：（1）胚胎干细胞的来源是哺乳动物的早期胚胎或原始性腺。（2）科学家使用活体卵子及皮肤成纤维细胞，利用（体）细胞核移植形成重组细胞，再利用动物细胞培养克隆出数个人体胚胎。胚胎干细胞在形态上表现为体积
82、小，细胞核大，核仁明显；在功能上具有发育的全能性。（3）要检测基因突变，属于分子水平上，需要采用DNA分子杂交（基因探针）技术，通过观察杂交带来检测。（4）若选用囊胚进行胚胎分割，要注意对其内细胞团均等分割，因为内细胞团将来发育成胎儿的各种组织和器官，若分割不均，可能影响分割后胚胎的发育。（5）胚胎移植时，为胚胎在受体内存活提供可能的生理基础是受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应。胞代谢 （2）父亲 减数第二次分裂后期姐妹染色单体没有分离 31. （8分）（1）原始性腺 （2）动物细胞培养 （体）细胞核移植 核仁 发育的全能性 （3）DNA分子杂交（基因探针） （4）内细胞团（5）受体与子宫内的供体胚胎基本不发生免疫排斥反应L11 生物技术的安全性和伦理问题L12 生态工程L13 生物工程及技术综合