1、专题1 基因工程12 基因工程的基本操作程序课堂巩固课后检测基础训练课 堂 巩 固一、选择题(每小题 4 分，共 20 分)1甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法错误的是()A甲方法可建立该细菌的基因组文库B乙方法可建立该细菌的 cDNA 文库C甲方法要以脱氧核苷酸为原料D乙方法需要逆转录酶参与C解析：甲图为利用限制性核酸内切酶将原有的 DNA 切断，可建立细菌的基因组文库，不需要以脱氧核苷酸为原料；乙图为通过逆转录得到目的基因，可建立细菌的部分基因文库，需要逆转录酶参与，并需要脱氧核苷酸为原料。2下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是()A基因枪法导入植物体细胞的
2、方法比较经济有效B显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法C大肠杆菌最常用的转化方法是使细胞的生理状态发生改变D农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法A解析：本题综合考查了将目的基因导入细胞的方法。不同生物目的基因导入的方法不同，每种方法都有利有弊。目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，该方法比较经济有效，还有基因枪法和花粉管通道法；目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法；大肠杆菌细胞最常用的转化方法就是用钙离子处理细胞，使细胞的生理状态发生改变，完成转化过程。3下列关于基因表达载体的构建描述错误的是()A基因表达载体的构建是基因工程的核心B基因表达载体的构建包括目的基因
3、、启动子、终止子、标记基因等部分C目的基因就是指编码蛋白质的结构基因D构建的基因表达载体都是相同的D解析：基因表达载体的构建是基因工程的第二步，也是基因工程的核心；一个基因表达载体的组成除目的基因外，还有启动子、终止子、标记基因等部分；由于受体细胞不同，基因表达载体的构建也会有差别。4目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是()检测受体细胞是否有目的基因检测受体细胞是否有致病基因检测目的基因是否转录检测目的基因是否翻译成蛋白质A B C DC解析：本题考查目的基因的检测与鉴定。目的基因的检测首先要检测转基因生物染色体的
4、 DNA 上是否插入了目的基因，方法是用 DNA分子杂交技术，使 DNA 探针与基因组 DNA 杂交；其次检测目的基因是否转录出了 mRNA，方法是用基因探针与 mRNA 杂交；最后检测目的基因是否翻译成了蛋白质，方法是用抗原抗体杂交。5将 ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒 pET28b 导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是()A每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个 adaD每个插入的 ada 至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子C解析：每个限制性核酸内切酶识别位点处只能插入一个 ada。二、非选
5、择题(共 30 分)6(15 分)如图是将乙肝表面抗原基因转移到烟草细胞内生产乙肝疫苗的示意图，请据图回答下列问题：(1)过程表示。为了使目的基因正常表达，其首端必须有启动子，它是识别和结合的部位。若限制酶切出了平末端，要选择(填“Ecoli DNA 连接酶”或“T4DNA 连接酶”)进行连接。(2)图中将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞的方法称为。它利用了载体 Ti 质粒中含有序列，可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体上。(3)要检测烟草细胞中乙肝表面抗原基因是否合成出乙肝表面抗原蛋白，采用的方法是。基因表达载体的构建RNA 聚合酶T4DNA 连接酶农杆菌转化法TDNA抗原抗体杂交法7(15 分
6、)下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：(1)在基因工程中，AB 为技术，利用的原理是，其中为过程。PCRDNA 双链复制变性(2)过程的目的是使 DNA 样品的键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过的作用来完成的。(3)过程所用的原料是，遵循的原则是。(4)目的基因导入绵羊受体细胞常用技术。氢解旋酶4 种脱氧核苷酸碱基互补配对显微注射(5)BD 为抗虫棉的培育过程，其中过程常用的方法是。要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需要进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程：。农杆菌转化法让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定转基因棉花的性状解析：(1)AB 为体外 DNA 复制，即 PCR 技术，与体内 DNA 复制原理相同。解旋方式不同，PCR 技术是用高温变性使其解旋。(2)94 时DNA 双链解旋，破坏的是两条链之间的氢键，而在细胞内 DNA 复制解旋时解旋酶起相同作用。(3)过程所用的原料为 4 种脱氧核苷酸，遵循的原则是碱基互补配对。(4)转基因动物培育中目的基因的导入常用显微注射技术。(5)将目的基因导入植物细胞常用的方法为农杆菌转化法，其优点是能将外源基因导入受体细胞的染色体 DNA 分子上；在个体水平上鉴定，即通过生物体所体现的性状来判断，抗虫棉应具有的性状为使吞食其叶子的害虫死亡。谢谢观赏！Thanks!