1、1(2016湖北孝感模拟)下图是体外受精技术培育试管动物的大致流程，请回答下列问题：(1)精子的顶体内含有_能协助精子穿过卵母细胞的_。(2)体外培养受精卵时，除给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还提供_气体以维持_。(3)动物的早期胚胎需移植到同种且_与供体相同的动物体内，被移植的胚胎之所以能存活是因为受体对_。(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所利用的胚胎工程技术是_，胚胎移植前通过_技术可获得较多胚胎。导学号29520637解析：(1)精子的顶体内含有顶体酶，能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带，以完成受精作用。(2)体外培养受精卵时，除给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还要提供CO2气
2、体以维持培养液的pH相对稳定。(3)动物的早期胚胎需移植到同种且生理状态与供体相同的动物体内，被移植的胚胎之所以能存活是因为受体对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所利用的胚胎工程技术是早期胚胎培养，胚胎移植前通过胚胎分割技术可获得较多胚胎。答案：(1)顶体酶放射冠和透明带(2)CO2培养液的pH相对稳定(3)生理状态外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应(4)早期胚胎培养胚胎分割2.(2016湖北黄冈模拟)试管婴儿技术的突破意味着通过设计试管婴儿解决部分不孕不育问题的同时，部分肿瘤疾病、遗传性疾病的家族性遗传也将有望避免。(1)设计试管婴儿时为了提高受孕率，胚胎移植
3、时多采用多胚胎移植，因此需要用_处理，促进母亲排出更多的卵子。(2)胚胎发育的卵裂期在_(填“透明带”或“放射冠”)内进行。受精卵经72小时体外培养发育成由32细胞左右的桑椹胚，可用于胚胎移植，而胚胎移植属于胚胎工程的常用技术之一。胚胎工程是指对动物的早期胚胎或_所进行的多种显微操作和处理技术。还包括体外受精、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。(3)为了某些需要，需对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效最准确的方法是SRYPCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个_(填部位)细胞，提取DNA；然后用位于Y染色体上的性别决定基因(即SRY基因)的一段碱基作_，以_为模板进行PCR扩增；与SR
4、Y特异性探针出现阳性反应者，胚胎为_性。(4)设计试管婴儿、克隆人等都是引起人们广泛争论的问题。我国不反对治疗性克隆，即可利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病，在去除卵母细胞的细胞核时，可用微型吸管把位于_和_之间的第一极体一并吸出。导学号29520638解析：(1)用促性腺激素处理，可促进母亲排出更多的卵子。(2)胚胎发育的卵裂期在透明带内进行。胚胎工程是指对动物的早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，还包括体外受精、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。(3)用SRYPCR法对胚胎的性别进行鉴定时，从被测的囊胚中取出几个滋养层细胞，提取DNA；然后用位于Y染色体上的性别决定基因(即S
5、RY基因)的一段碱基作引物，以滋养层细胞的DNA为模板进行PCR扩增；SRY基因仅位于Y染色体的非同源区段，与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎为男性。(4)利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病，在去除卵母细胞的细胞核时，可用微型吸管把位于卵细胞膜和透明带之间的第一极体一并吸出。答案：(1)促性腺激素(2)透明带配子(3)滋养层引物滋养层细胞的DNA男(4)卵细胞膜透明带3(2016山西西安模拟)科学家将蜘蛛的相关基因导入山羊体内，创造出转基因山羊，使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白，利用这种蛛丝蛋白制造的蛛丝纤维具有很高的强度和伸缩性，可制成防弹背心、降落伞绳等。下面是生产原理图，请回答问题：
6、(1)在过程中用到的酶是_，在过程中用到的酶是_。(2)将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是_。如果导入的受体细胞为体细胞，则过程需要的技术操作是_，重组细胞才具有发育的全能性。(3)过程所用的胚胎工程技术是_，该过程所用培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和_等。(4)进行过程需要的技术操作是_，最佳时期是_。(5)进行过程时，需要对供、受体母羊进行选择，并_处理。导学号29520639解析：(1)由mRNA形成DNA是逆转录，需要逆转录酶。构建基因表达载体需要限制酶对目的基因和运载体进行切割，然后用DNA连接酶进行连接。(2)将构建好的基因表达载体导入动物受体细胞常用显微注射法
7、。如果是体细胞，则需要进行体细胞核移植。(3)由重组细胞到早期胚胎需要经过早期胚胎培养技术。在培养液中除了营养物质外还需要加入动物血清。(4)将胚胎形成2个相同的胚胎时需要采用胚胎分割技术，一般是将发育良好的桑椹胚或囊胚期的胚胎进行分割，进行分割时一定要将内细胞团进行均等分割。(5)进行胚胎移植时，一定要对供体和受体母羊用激素进行同期发情处理，使它们的生理状态相同。答案：(1)逆转录酶限制酶和DNA连接酶(2)显微注射法核移植(3)早期胚胎培养动物血清(4)胚胎分割桑椹胚或囊胚(5)用激素进行同期发情4(2016山东济南模拟)自然条件下，哺乳动物不发生孤雌生殖。云南农大科研团队曾把猪卵母细胞进
8、行人为的孤雌激活处理，使其发育成胚胎，移植到代孕母猪体内，获得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪，这种克隆猪不同于核移植获得的克隆猪。现将两种技术进行比较。(1)图中过程_(填序号)是获得核移植克隆猪的技术流程。(2)孤雌激活处理其实质是要激活卵母细胞_，使其发育成早期胚胎，得到克隆猪。(3)体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞，需要选择_期的卵母细胞，并用微型吸管吸出_。欲得到更多的卵母细胞，需用_处理良种母猪。(4)早期胚胎移植时，必需移植到同种_的其他雌性动物子宫中，才可能移植成功。(5)可以从良种不同的克隆猪中提取mRNA进行研究，也可通过_方法得到多种cDNA，并通过_技术扩增产物。导学
9、号29520640解析：(1)分析题图可知，为孤雌生殖克隆猪的步骤，而为核移植技术得到克隆猪的途径。(2)孤雌激活处理的目的是激活卵母细胞的增殖分化能力或激发卵母细胞的全能性，从而得到克隆猪。(3)体细胞核移植过程中用到的卵母细胞是培养到减数第二次分裂中期的卵母细胞，对此时的卵母细胞要用微型吸管吸出细胞核和第一极体；促性腺激素可以促进雌性个体超数排卵。(4)胚胎移植对受体的要求是同种的生理状态相同的雌性动物。(5)cDNA是以mRNA为模板，通过逆转录过程合成的；PCR技术可以扩增目的基因。答案：(1)(2)增殖分化(或细胞的全能性)(3)减数第二次分裂中细胞核和第一极体(缺一不可)促性腺激素
10、(4)生理状态相同(或同期发情处理)(5)反(逆)转录PCR5人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：(1)htPA基因与载体用_切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_技术。(2)为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其_。采集的精子需要经过_，才具备受精能力。(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是_。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的_。(4)若在转htPA基因母
11、羊的羊乳中检测到_，说明目的基因成功表达。导学号29520641解析：(1)用同种限制酶切割质粒和含有htPA基因的DNA片段可产生相同的黏性末端，便于构建基因表达载体；通常采用DNA分子杂交技术来检测目的基因是否已插入受体细胞DNA。(2)为获得更多的卵母细胞，通常对供体母羊注射促性腺激素使其超数排卵；采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力。(3)通常用显微注射法将重组表达载体导入动物的受精卵；为了获得母羊，移植前需要对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定；早期胚胎细胞具有全能性，可利用胚胎分割和胚胎移植技术获得多个转基因个体。(4)htPA基因的表达产物为人组织纤溶酶原激活物，若在转基因母羊的羊乳中检测到人组织纤溶酶原激活物，说明目的基因成功表达。答案：(1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶)DNA分子杂交(或核酸探针)(2)超数排卵获能(处理)(3)显微注射法性别鉴定全能性(4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物)