1、第六章实验十一 DNA的粗提取与鉴定学习目标：1、掌握原理2、了解方法步骤重难点： 原理知识点归纳与结论一、实验原理 DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的_的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为_mol/L时，DNA的溶解度最_。利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中_的析出。 DNA不溶于_溶液，但是细胞中的某些物质可以溶于_溶液。利用这一原理，可以进一步提取出_的DNA。 DNA遇_（沸水浴）会染成蓝色，因此，_可以作为鉴定DNA的试剂。二、目的要求 初步掌握DNA的_和_的方法，观察提取出来的_物质。三、材料用具 鸡血细胞液（510mL）。 铁架台，铁环，镊子，三脚架，_，石棉
2、网，载玻片，_，滤纸，_，滴管，量筒（100 mL一个），烧杯（100 mL1个，50 mL、500 mL各两个），试管（20 mL2个），_，试管夹，纱布。 体积分数为_的酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却_h），蒸馏水，质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为_mol/L和_mol/L的氯化钠溶液，二苯胺试剂。四、方法步骤 实验前需要制备_。 1、提取鸡血细胞的细胞核物质 向盛有鸡血细胞液的烧杯中加入_20mL，同时用快速搅拌， 学习过程使血细胞加速。然后过滤，取其_液。 2、溶解细胞核内的DNA 将物质的量浓度为_mol/L的氯化钠溶液40mL加入到滤液中，混合均匀，使DN
3、A在溶液中呈_状态。 3、析出DNA的粘稠物 沿烧杯内壁缓缓加入_，同时用玻璃棒搅拌，这时烧杯中出现_色的丝状物。继续加入蒸馏水，当粘稠物不再_时停止加入蒸馏水（这时溶液中氯化纳的物质的量浓度相当于_mol/L）。 4、滤取含DNA的粘稠物 用漏斗过滤步骤3中的溶液，含_的粘稠物被留在纱布上。 5、将DNA的粘稠物再溶解 用钝头镊子将纱布上的_物夹至物质的量浓度为_mol/L的氯化钠溶液中，用玻璃棒搅拌，使粘稠物_溶解于溶液中。 6、过滤含有DNA的氯化钠溶液 用漏斗过滤步骤5中的溶液，取其溶液，_溶于溶液中。 7、提取含杂质较少的DNA 将_的、体积分数为95的酒精溶液5mL加入到含有DNA
4、的滤液中。搅拌后，溶液中会出现_的丝状物。这种丝状物的主要成分是_。这时丝状物成_色。 8、DNA的鉴定 取两支试管，各加入物质的量浓度为_mol/L的氯化钠溶液5mL，将_放入其中一支试管中，使其溶解。然后，向两支试管中各加入4mL的_试剂。混合均匀后，将试管置于水中加热5分钟。待试管冷却后，比较两支试管中溶液_的变化。五、结论 1、可以利用DNA溶于_溶液，在其物质的量浓度为_mol/L时溶解度最低的原理，来提取_。 2、溶解丝状物氯化钠溶液，遇二苯胺（沸水浴）变为_色，这说明丝状物是_物质。反馈训练一、选择题1、DNA粗提取步骤1中加入蒸馏水的目的是（ ）A、稀释溶液 B、是血细胞吸水胀
5、破 C、冲洗DNA D、溶解DNA2、DNA粗提取步骤3中加入蒸馏水的目的是（ ）A、稀释溶液 B、是血细胞吸水胀破 C、使DNA在低浓度氯化钠溶液中析出 D、溶解DNA3、氯化钠的物质的量的浓度为（ ）时，DNA的溶解度最低A、0.12mol/L B、0.13mol/L C、0.14mol/L D、0.15mol/L4、DNA不溶解于（ ）A、氯化钠溶液 B、氯化钾溶液 C、乙醇 D、氯化镁溶液5、鉴定DNA的试剂是（ ）A、斐林试剂 B、苏丹试剂 C、双脲试剂 D、二苯胺试剂6、在向溶解DNA的氯化钠溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（ ）A、加快溶解DNA的速度 B、加快溶解杂质的速度 C、
6、减少DNA的溶解度，加快DNA的析出 D、减少杂质的溶解度，加快DNA的析出7、DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成（ ）A、酸红色 B、红色 C、紫色 D、蓝色8、从细胞核中提取出DNA所用的提取液是（ ）A、氯化钠溶液 B、酒精 C、二苯胺 D柠檬酸钠9、提取含杂质较少的DNA所用的溶液是（ ）A、冷却的、酒精的体积分数为90的溶液 B、加热的、酒精的体积分数为95的溶液C、加热的、酒精的体积分数为90的溶液 D、冷却的、酒精的体积分数为95的溶液10、DNA的直径为（ ）A、201020m B、201010 m C、102020 m D、102010 m二、非选择题11、DNA遇_（沸水浴）会
7、染成色，因此，_可作为鉴定DNA试剂。12、在制备鸡血细胞的过程中，加入的抗凝剂是_。13、将制备好的鸡血细胞溶液510mL，注入到50mL的烧杯中，向烧杯中加入20mL蒸馏水的目的是_。14.“粗提取DNA的原理是_。进一步提取出含杂质较少的DNA的原理是：_。补充材料1、步骤7中：为什么要用冷却酒精？搅拌为什么要缓慢？ 因为DNA不溶于冷却酒精。而细胞中的其他物质可以溶解在酒精中，这样，析出的DNA丝状物中所含杂质就很少。（杂质部分大部分都溶解在冷酒精中了） 缓慢搅拌是为了使玻璃棒上缠绕更多的DNA的丝状物。2、盛放鸡血细胞液的容器，为什么用塑料容器？ 鸡血细胞破碎以后释放的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于细胞内DNA的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就会更少。因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程中DNA的损失。