1、生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定1实验原理可溶性糖中的还原糖(葡萄糖、果糖)与斐林试剂作用生成砖红色沉淀;脂肪被苏丹溶液或苏丹溶液染成橘黄色或红色;蛋白质与双缩脲试剂发生作用,能产生紫色反应。2材料用具做可溶性还原糖的鉴定实验,应选择含糖量高,颜色为白色或近于白色的植物组织,以苹果、梨为最好,使实验效果明显;做脂肪的鉴定实验,应该选择富含脂肪含量高的种子,以花生种子为最好,实验前需浸泡34 h;做蛋白质的鉴定实验,可用浸泡12 d的黄豆种子(或用豆浆),或用蛋清(必须稀释10倍后再使用)。3实验试剂由质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶
2、液刚配制而成的斐林试剂;苏丹或苏丹溶液;双缩脲试剂。4实验过程可溶性糖的鉴定: 注意:蛋白质的鉴定在试剂使用上与还原糖鉴定不同的是,先加入质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液,造碱性环境,观察颜色变化后再加入34滴质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液,而不是混合使用。讨论:(1)用斐林试剂鉴定可溶性糖(还原糖)时,溶液的颜色变化为什么是浅蓝色棕色砖红色(沉淀)?(提示:棕色为浅蓝色与砖红色的混合色)(2)鉴定可溶性还原糖试验中,苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜的颜色反应最明显的是哪一种?(提示:经试验比较,颜色反应的明显程度,依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜)在实验1生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成,但两者有如下三点不同:(1)溶液浓度不同。斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.05 g/mL;双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1 g/mL,CuSO4的浓度为0.01 g/mL。(2)使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液;双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。(3)使用方法不同。斐林试剂使用时,先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,而后立即使用。双缩脲试剂使用时,先加入NaOH溶液,然后再加入CuSO4溶液。