1、 基因 表达的细胞 表达产物 A 细菌抗虫蛋白基因 抗虫棉叶肉细胞 细菌抗虫蛋白 B 人酪氨酸酶基因 正常人皮肤细胞 人酪氨酸酶 C 动物胰岛素基因 大肠杆菌工程菌细胞动物胰岛素 D 兔血红蛋白基因 兔成熟红细胞 兔血红蛋白【答案】D【解析】抗虫棉叶肉细胞中存在细菌抗虫蛋白基因，细菌抗虫蛋白基因能够表达产生细菌抗虫蛋白；正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因，人酪氨酸酶基因能够表达产生人酪氨酸酶；大肠杆菌工程菌细胞存在动物胰岛素基因，动物胰岛素基因能够表达产生动物胰岛素；兔成熟红细胞中无细胞核，所以无兔血红蛋白基因不能表达产生兔血红蛋白。此题为容易题，识记理解类。（2009 天津卷）8（30 分）
2、水稻种子中 70的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。（1）磷元素除了形成植酸外，还可以出现在下列_分子或结构中（多选）。A.核糖 B.ATP C.核糖体 D.核膜（2）种植芦苇能有效抑制水华的发生，表明芦苇与引起水华的藻类关系是_。（3）植酸酶可降解植酸，在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的_ 利用率。（4）酵母菌中植酸的活性较高。下图是从不同类型酵母菌的发酵液中提取植酸酶的工艺流程。据图回答：植酸酶_（/）属于分泌蛋白。若植酸酶和的肽链组成不同，其差异体现在_。提纯的植酸酶需做活性条件测定。右图为测定
3、结果。图中的自变量可为_(答一种)；因变量可以通过测定_来表示。（5）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。据图回答：图中基因组文库_（小于/等于/大于）cDNA 文库。B 过程需要的酶是_；A、C 过程中_（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。目的基因和除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中_。和_为模板直接进行 PCR 扩增，该过程中所用酶的显著特点是_。（6）已获得的转植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病，下图为选育低植酸抗病水稻品种的过程。图中两对相对性形状分别由两对基因控制，并独立遗传。采用
4、上图育种过程，需从_代开始筛选，经筛选淘汰后，在选留的植株中低植酸抗病纯合体所占的比例是_。选留植株多代自交，经筛选可获得低植酸抗病性状稳定的品性。【解析】本题考查物质的元素组成、生物的种间关系、蛋白质、酶、基因工程、遗传定律的相关知识，涉及的知识点较多，综合性很强。（1）只有核糖中不含磷元素，ATP（磷酸基团）、核糖体（含 RNA）、核膜（含磷脂）中均含有磷元素。（2）芦苇能抑制水华的发生，表明芦苇与水华的藻类关系是竞争。（3）植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，而植酸酶可降解植酸，因此在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的 （2009 福建卷）32.（10
5、分）转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有 Pst、Sma、EcoR、Apa等四种限制酶切割位点。请回答：（1）构建含抗病基因的表达载体 A 时，应选用限制酶 ，对 进行切割。（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体 A 中含有 ，作为标记基因。（3）香蕉组织细胞具有 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 。（2009 重庆卷）31.（16 分）小鼠基因敲除技术获得 2007 年诺贝尔奖，该技术采用基因工程、细胞工程、杂交等手段使小鼠体内的某一基
6、因失去功能，以研究基因在生物个体发育和病理过程中的作用。例如现有基因型为 BB 的小鼠，要敲除基因 B，可先用体外合成的突变基因 b 取代正常基因 B，使 BB 细胞改变为 Bb 细胞，最终培育成为基因敲除小鼠。（1）基因敲除过程中外源基因是否导入受体细胞，可利用重组质粒上的 检测。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，则可能导致细胞内的 被激活，使小鼠细胞发生癌变。（2）通过基因敲除，得到一只 AABb 小鼠。假设棕毛基因 A、白毛基因 a、褐齿基因 B 和黄齿基因 b 均位于常染色体上，现要得到白毛黄齿新类型小鼠，用来与 AABb 小鼠杂交的纯合亲本的基因型是 ，杂交子代的基因型是 。让 F1代中双
7、杂合基因型的雌雄小鼠相互交配，子代中带有 b 基因个体的概率是 。不带 B 基因个体的概率是 。（3）在上述 F1代中只考虑齿色这对性状，假设这对性状的遗传属 X 染色体伴性遗传，则表现黄齿个体的性别是 ，这一代中具有这种性别的个体基因是 。（2009 江苏卷）34（7 分）苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt 毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（ramp 为抗氨苄青霉素基因），据图回答下列问题。（1）将图中的 DNA 用 Hind、BamH完全酶切后，反应管中有 种 DNA 片段。（2）图中表示 Hind与 BamH酶切、DNA 连接酶连接的过程，此过程可获得 种重组质
8、粒；如果换用 Bst l 与 BamH酶切，目的基因与质粒连接后可获得 种重组质粒。（3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的 。（4）图中的 Ti 质粒调控合成的 vir 蛋白，可以协助带有目的基因的 TDNA 导人植物细胞，并防止植物细胞中 对 TDNA 的降解。（5）已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞 。（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的 基因频率的增长速率。【解析】本题考查基因工程的相关知识。（1）由于上述两种酶形成的末端不一
9、样，所以被两种不同的限制酶切割之后所形成的片段有 AA、AB、BA、BB 四种切法形成的四种片段。（A 表示 Hind，B 表示 BamH）（2）同时被两种限制酶切割有两种不同的目的基因，即 AB 和 BA，所以重组质粒有两种。Bst l 与 BamH酶切割的末端一样，所以同时用这两种限制酶切割只能形成一种目的基因，所以只能形成一种重组质粒。（3）质粒要进行复制才能更多的表达出产物，所以重组之后要能复制。（4）酶具有专一性，对 TDNA 的降解酶为 DNA 水解酶。（5）生物的细胞表面的受体具有特异性，人类肠上皮细胞没有昆虫肠上皮细胞表面的特异受体。所以该毒素蛋白对人类的风险相对较小（6）自然
10、选择是普遍存在的，纯种种植自然选择会使害虫抗性基因频率快速增长。所以混合种植降低害虫的抗性基因频率的增长速率。（2009 上海卷）37.（9 分）人体细胞内含有抑制癌症发生的 P53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。（1）目的基因的获取方法通常包括_和_。（2）上图表示从正常人和患者体内获取的 P53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改编的碱基对，这种变异被称为_。（3）已知限制酶 E 识别序列为 CCGG,若用限制酶 E 分别完全切割正常人和患者的 P53基因部分区域（见上图），那么正常人的会被切成_个片段，而患者的则被切割成长度为_对
11、碱基和_对碱基的两种片段。（4）如果某人的 P53基因部分区域经限制酶 E 完全切割后，共出现 170、220、290 和 460 碱基对的四种片段，那么该人的基因型是_（以 P+表示正常基因，Pn表示异常基因）。【解析】本题主要考查基因工程相关知识。（1）目的基因的获取方法有直接分离和化学方法人工合成两种；（2）仔细对比正常人与患者的基因序列可知是 CG 碱基对变为了 TA 碱基对，这种变化属于基因突变；（3）正常人 P53基因终于两个限制酶 E 的识别序列，完全切割后可产生三个片段，患者 P53基因中有一个限制酶 E 的识别序列发生突变，且突变点位于识别位点内，这样患者就只有一个限制酶 E
12、 的识别序列，切割后产生两个片段，分别为 290+170=460 对碱基，220 对碱基；（4）正常人经限制酶 E 完全切割后产生三个片段，290 对碱基、170 对碱基和 220 对碱基，患者产生两个片段 460 对碱基和 220 对碱基，则该人的基因型应为 P+P-。细胞工程（2009 全国卷）4下列关于植物体细胞杂交或植物细胞质遗传的叙述，错误的是 A利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种 B不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程 C两个不同品种的紫茉莉杂交，正交、反交所得 F1的表现型一致 D两个不同品种的紫茉莉杂交，F1的遗传物质来自母本的多于来自父本的
13、（2009 浙江卷）1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A都需用2CO 培养箱 B都须用液体培养基 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 提取 病毒 RNA DNA A 基因A 基因 表达载体受体 细胞 A 蛋白小鼠皮下小鼠骨髓瘤细胞 效应 B 淋巴细胞 X 抗 A 蛋白的单克隆抗体（2009 山东卷）35.（8 分）（生物一现代生物科技专题）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为 RNA 病毒，该病毒表面的 A 蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：请回答：（1）过程代表的是 。（2）过程构建 A 基因表
14、过载体时，必须使用 和 两种工具酶。（3）过程采用的实验技术是 ，获得的 X 是 。（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。（2009 四川卷）30.（22 分）回答下列、两个小题。.将小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成一种特定的细胞（命名为 M 细胞），再将 M 细胞移植到糖尿病模型小鼠（胰岛细胞被特定药物破坏的小鼠）体内，然后小鼠的血糖浓度，结果如图所示（虚线表示正常小鼠的血糖浓度值）。请回答相关问题：（1）实验用的胚胎干细胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎
15、后一般用 酶将其分散成单个细胞。（2）根据实验结果可以判定 M 细胞已具有 细胞的功能。说明判定的理由 。（3）用胰岛素基因片段做探针，对小鼠胚胎干细胞和 M 细胞进行检测。请在下表的空格中填上检测结果（用“+”表示能检测到，用“-”表示不能检测到）。用探针检测细胞的 DNA 用探针检测细胞的 RNA 胚胎干细胞 M 细胞 胚胎干细胞 M 细胞 上述实验结果表明，胚胎干细胞通过 定向分化为 M 细胞。（4）若将 M 细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，重组细胞能否分化为其他类型细胞？，请说明理由 。1糖尿病的机制 由于胰岛 B 细胞受损导致无法合成胰岛素来降血糖，血糖浓度过高随尿排出，导致糖尿病
16、的产生。本题中通过曲线反应了未移植 M 细胞和移植 M 细胞下血糖浓度的变化，可见移植 M细胞血糖浓度降低，显然 M 细胞发挥了胰岛 B 细胞的功能 2细胞的全能性和基因表达的相关知识 第（4）小问中考查了动物细胞核具有全能性的原因，即细胞核含有该物种所特有的全套遗传物质；第（3）问中通过表格的形式要求学生补充实验的结果，首先学生要明确这里的 M细胞是通过小鼠的胚胎干细胞经过细胞增殖、分化而产生的，由于是通过有丝分裂增殖，所以 M 细胞和胚胎干细胞的 DNA 是一样的，然而细胞分化的实质为基因的选择性表达，追究到原因就是相同的 DNA 转录形成了不同的 RNA，进一步合成了不同的蛋白质，所以
17、M 细胞和胚胎干细胞中的 RNA 是不一样的，从而在进行 DNA 探针杂交试验时出现了如表格中显示的杂交结果。（2009 江苏卷）32（8 分）动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。（1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞 。（2）气室中充入 5C02：气体的主要作用是 。（3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的 ，以保证抗生素对肝脏无害。（4）有机物 X 有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物 X 是否具有解毒作用。材料用具：肝脏小块，
18、外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素（刺激淋巴细胞分裂）；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液（使染色体着色），有机物 X 溶液等。实验过程：在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取 4 等份，备用。利用甲、乙、丙、丁 4 组上图所示装置，按下表步骤操作（“”表示已完成的步骤）。甲 乙 丙 丁 步骤一：加人肝脏培养液 步骤二：加入有机物X溶液 步骤三：放置肝脏小块 上表中还需进行的操作是 。培养一段时间后，取 4 组装置中的等量培养液，分别添加到 4 份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察 ，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现
19、异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明 。【答案】（1）吸收氧气和营养物质、排出代谢废物（2）维持培养液适宜的 pH （3）种类和剂量（4）向乙（或丁）组装置中放置肝脏小块 染色体形态和数量 肝脏小块对有机物 X 具有解毒作用【解析】本题考查动物细胞培养的相关知识。（1）把肝脏切成小薄片，有利于肝脏细胞的呼 胚胎工程（2009 江苏卷）8下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是 A卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割 C胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点 D胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取 （2009 广
20、东卷）第 38 题（生物技术实践）和 39 题（现代生物科技专题）是选做题，考生只需作答其中一题。请根据下述材料，回答第 38 题或 39 题。材料：饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪、禽等动物由于缺乏有关酶，无法有效利用植酸，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排除后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成为目前重要的饲料添加剂之一。39.（10 分）现代生物科技专题（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的 ，然后改变植酸酶的 ，从而得到新的植酸酶。（2）培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲
21、料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是 。请简述获得转基因植株的完整过程。（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过 转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过 方法，从而一次得到多个转基因猪个体。（4）若这些转基因因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？【答案】（1）空间结构 氨基酸序列（2）农杆菌介导的转化法 外源植酸酶基因农杆菌大豆细胞大豆植株再生鉴定（3）显微注射法 胚胎分割移植（4）减少环境中磷的污染，但该基因可能扩散到环境中。【解析】本题考查了基因工程，蛋白质工程，胚胎工程，生态工程的基本技术，并且深入考察基础知识，对蛋白质改
22、造时，首先要知道蛋白质的结构，有氨基酸序列构成的一级结构和折叠组装成的空间结构。转基因技术有四个基本步骤，经常采用农杆菌介导法，因为农杆菌容易侵染植物细胞，重组质粒被导入受体细胞时，经常用到显微注射法，而胚胎分割移植能快速繁育优良种畜，基因工程能够使个体表现出人们所需要的性状，减少环境中磷的污染，但可能会随个体的杂交。扩散到环境中去，造成基因污染。（2009 辽宁、宁夏卷）41【生物选修 3 现代生物科技专题】（15 分）右图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分 化的示意图。请回答：（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至 _期的内细胞团或胎儿的_中分离得到 的一类细胞。（2）图中分化程度最低的干细胞是_。
23、在体外培养条件下，培养液中加入_因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。（3)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因_的结果。（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓的治疗的实质是将上图的_细胞移植到患者体内。（5）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的_，其原因是_。（6）若某药物可抑制肝肿瘤细胞 NDA 的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的_期。（7）在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用_细胞与骨髓细胞融合，经多交筛选最终得到能分泌_的杂交瘤细胞。【解析】（1）胚胎干细
24、胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，囊胚阶段细胞开始分化分为内细胞团和滋养层细胞。（2）图中分化程度最低的干细胞是胚胎干细胞，全能性最高，在体外培养条件下，该种干细胞可诱导分化形成不同类型的组织细胞，培养液中加入分化诱导因子。（3)细胞分化是细胞中基因选择性表达的结果。（4)骨髓是人体的造血组织，存在造血功能干细胞，骨髓的治疗的实质是将上图的造血干细胞移植到患者体内。（5）克隆某种哺乳动物需要供体提供细胞核，而成熟的红细胞没有细胞核，所以不能作为供体。（6）细胞周期包括分裂间期和分裂期，分裂间期完成 DNA 分子的复制和有关蛋白质的合成。（7）单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用 B
25、淋巴细胞与骨髓细胞融合，交筛选最终得到能分泌一种特异性抗体的杂交瘤细胞。（2009 海南卷）26.（18 分）（选修模块 3：现代生物科技专题）请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题：（1）精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶体内含有的 能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。（2）某动物排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于 卵母细胞阶段，当该细胞发育至减数第二次分裂 期时，才具备受精能力。若在卵黄膜和透明带之间看到两个极体，则表明 过程已完成。（3）动物的早期胚胎移植到同种且 与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。为了获得更多的早期胚胎，常用 激素对供体进行处理，其目的是获得更多的 ，经人工受精后可得到早期胚胎。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜 。（4）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到桑葚期或囊胚期阶段的早期胚胎进行 处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于 条件下。