1、高考资源网（） 您身边的高考专家课题：细菌培养技术教学目的：1 通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配制，理解配制培养基的一般步骤和方法。2 了解灭菌的基本原理和实验中常用的灭菌方法。3 初步掌握细菌培养的基本技术。教学重点：1 配制培养基的一般步骤和方法。2 细菌培养的基本技术。教学过程：（一）基本原理 听课记录1、培养基应含有 ，还要有适宜的 。本实验所用的 培养基适于培养 和 。2、灭菌是指杀死一定环境中 的 、 、 _ 。培养基一般采用 灭菌法，接种环一般采用 灭菌法。其原理是 。3、整个操作过程要注意无菌（二）牛肉膏蛋白胨培养基的配制1、称量：用天平称取一定量的 、 、 和 。2、溶化：将称好
2、的 、 、 放入烧杯中加入100毫升 ，用玻璃棒 ，放到 上 。当 后加入 ，并继续 。注意：（1） （2） 。待琼脂完全溶化后， 。3、调节，用滴管逐滴滴入 ，并随时用 ，直到 为止。4、培养基的分装：培养基应趁热 到 中，培养基的高度约为 ，注意培养基不要粘在 ，以免引起 。5、加棉塞：目的是既能 ，又能 ，应使棉塞长度的 留在试管口内。6、包扎：每10支试管用线扎成一捆，在管口外包上 ，然后 ，外挂 ( ) 注明 、 、 。（三）高压蒸汽灭菌1、取出 ，向高压灭菌锅内加水，水面与 平齐为宜，2、将扎好的试管 放在 内，放回 ，注意物品不能放得 。3、加盖：将 插入 内，以对称方式 ，以防
3、漏汽。4、排出锅内的冷空气：接通电源加热，当锅内气压上升到 时， ，当锅内气压降到 时 ，再 ，以彻底排除锅内冷空气。5、当锅内气压上升到时 ，控制火力大小使压力保持在 分钟（温度保持在 ），切断电源。6、当气压降至 以后，打开 ， 以后（原因是 ）旋松 ，打开锅盖，取出试管。（四）搁置斜面：培养基冷却到 左右，搁在木棒上，使培养基的斜面长度不超过试管总长的 。（五）接种1、用 洗手，再用 。2、当 后，点燃酒精灯（原因是 ）。3、接种：用 夹住 ，管口 ，斜面 ，右手 ，但不要取下。右手拿 在 上 ，烧的部分是 ，特别是 部分。在 边（原理是 ）用 取下 ，同时烧 ，将接种环伸入 内，让环先
4、接触 ，使环 ，然后挑取 ，再伸到 的 部，由 向 画 。取出接种环再用火焰烧 ，在火焰上方将 ，目的是 。将接种环 ，目的是 。4、实验用的带菌培养基的处理方法是 。5、接种完毕后将 、 、 填写在标签上。五、培养：接种后的试管放入 培养。思考题1、 在高压蒸汽灭菌开始以前，将灭菌锅内的冷空气排尽的原因是 2、 灭菌完毕以后，如果压力未降到0就旋松锅盖上的紧固螺栓打开锅盖，会出现什么现象？ 3、 灭菌完毕以后，如果压力未降到0就打开排气阀，会出现什么现象？原理是。 接种操作为什么一定要在火焰旁进行？ 例题巩固（ ）1.配制培养基的正确步骤为称重 溶化 调PH值 分装 加棉塞 包扎A、 B、C
5、、 D、（ ）2.下列关于灭菌的说法中，错误的是 A、 灭菌是指杀死一定环境中所有微生物的细胞，不包括芽孢和孢子B、 对不同的生物材料，应当采用不同的灭菌方法C、 培养基一般采用高压蒸汽灭菌法D、 高压蒸汽灭菌法最终使菌体蛋白质凝固变性（ ）3.实验结束后，正确处理带菌的培养基的方法是A、 可以直接倒掉 B、 致病菌须经高压蒸汽灭菌后方可到掉，非致病菌可以直接倒掉C、 致病菌须经加热处理后方可到掉，非致病菌可以直接倒掉D、 致病菌须经高压蒸汽灭菌后方可到掉，非致病菌需经加热处理后倒掉（ ）4.在使用高压灭菌锅进行灭菌时，不正确的操作步骤是A、 装料要管口向上，摆放整齐，不能拥挤B、 在装料前，
6、要先向锅内加水C、 加盖时，以两两对称的方式，同时旋紧相同的两个紧固螺栓D、 排气阀只有当压力上升至98Kpa后再降至0时，才能打开（ ）5.细菌培养基常在121度压力锅中灭菌。如果只是在100度的温度下将细菌培养基灭菌，以下哪一种生物仍会存活？A、大肠杆菌 B、一种青霉C、枯草芽孢杆菌 D、沙门氏菌（ ）6.下面的资料表明在各种培养基中细菌的生长（S、C、M为简单培养基，U、V、X、Y、Z代表加入培养基的不同物质），问哪一种物质细菌不能合成？培养基生长状态S、C、M-S、C、M+V+Z-S、C、M+U+Y+S、C、M+Z+X-S、C、M+V+Y+S、C、M+U+X-S、C、M+Y+Z+A、U B、V C、Y D、Z7.搁置斜面时培养基温度不能 ，否则培养基会变成 。应趁热将试管放置成 形，使管内培养基形成的斜面长度不超过试管总长的 。8.微生物接种时各项操作必须在 条件下进行。因此必须在 边操作。接种环要在 上用灼烧法灭菌，双手用 消毒。9.接种后的试管要放入 箱中的 度下培养数天，即可见斜面上出现 。- 3 - 版权所有高考资源网