1、2015-2016学年广东省佛山市高明一中高二（下）第一次月考生物试卷一、单选题（每小题3分，共18分）1以下有关DNA重组技术基本工具的说法中，正确的是（）A一种限制酶只能识别某种特定的核苷酸序列B质粒是基因工程中唯一的载体C载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接DDNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键2现将“细胞工程”中动、植物细胞培养技术列表比较如下，你认为哪一项目的比较有错误（）比较项目原 理培养基区别结 果培养目的植物组织培养细胞的全能性需加植物激素培育成植株快速繁殖，培育无病毒植株等动物细胞培养细胞的全能性需加动物血清培育成细胞获得细胞或细胞的产物等A原理
2、B培养基区别C结果D培养目的3科学家将控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡胚胎细胞的DNA中，发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，在每一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白；而且这些鸡蛋孵出的鸡，仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋，据此分析错误的是（）A这些鸡是转基因工程的产物B这种变异属于可遗传的变异C该过程运用了胚胎移植技术D该种变异属于定向变异4下列事实能体现细胞全能性的是（）A棉花根尖细胞经诱导形成幼苗B单细胞的DNA在体外大量扩增C动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体D胚胎干细胞经诱导培育成人体器官5人参皂甙干粉工厂化生产，下列哪种技术是必需的（）A杂交育种B植物组织培养C多倍体育种D单倍体育
3、种6下列实例与所利用的技术或原理不相符的是（）A转基因抗虫棉的培育需要利用植物组织培养技术B植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性C愈伤组织的形成和杂交瘤细胞的培养都与细胞分裂有关D植物原生质体融合和动物细胞融合利用了细胞膜的选择透过性二、简答题（共82分）7根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有_和_（2）质粒运载体用EcoR切割后产生的片段如图所示为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoR切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是_（3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即
4、_DNA连接酶和_DNA连接酶（4）反转录作用的模板是_，产物是_若要在体外获得大量反转录产物，常采用_技术（5）基因工程中除质粒外，_和_也可作为运载体（6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_8在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值如图所示是获得转基因莴苣的技术流程，请据图回答下列问题：（1）获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和_（2）过程需要的酶有_、_（3）重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp以外，还必须含有_、终止子和_，这样才能构成一个完整的基因表达载体（4）如果受体细胞C1是土壤
5、农杆菌，则将目的基因导入它的_，使目的基因进入受体细胞C2，并将其插入到受体细胞C2中_上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，形成转基因莴苣经过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达，在分子水平上可用_法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因莴苣培育成功（5）基因工程的应用除了以上之外还有很多，如用转基因动物作器官移植的供体，其主要优点是避免_反应9枯草杆菌产生的蛋白酶具有催化分解蛋白质的特性，但极易被氧化而失效1985年，美国的埃斯特尔将枯草杆菌蛋白酶分子中的第222位氨基酸替换后，虽然其水解活性有所下降，但抗氧化能力大大提高用这种水解酶作为洗涤剂的添加剂，可
6、以有效地除去血渍、奶渍等蛋白质污渍（1）改造枯草杆菌蛋白酶的生物技术是_（2）改造后的枯草杆菌中的控制合成蛋白酶的基因与原来相比，至少有_个碱基对发生变化（3）利用生物技术改造蛋白质，提高了蛋白质的稳定性，埃斯特尔所做的工作是对已知蛋白质进行_（4）若要获得新型蛋白质，需用到的生物工程有蛋白质工程、_和发酵工程（5）埃斯特尔获得新型的枯草杆菌蛋白酶的基本思路是什么？_10通过植物组织培养技术可以快速繁殖、生产药物及培育无病毒的植物等据图甲、表乙回答问题离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体植物体 图甲植物组织培养过程表乙：植物的花芽分别在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中的生长状况
7、A组B组C组D组E组吲哚乙酸03ppm3ppm0.03ppm0细胞分裂素00.2ppm0.002ppm1.0ppm0.2ppm花芽生长状况仍是组织切块形成愈伤组织愈伤组织分化出根愈伤组织分化出嫩芽稍生长（1）离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新的植物体的原因是_（2）用植物组织培养方法诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状体结构，若包裹上人造种皮，制成人工种子，可能解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题胚状体来源于离体的植物体细胞，其形成过程中要经过的生理变化大体上是图甲中_和_过程，在此过程中被培养的细胞始终受_的调节（“”中填序号）（3）应用植物组织培养技术培养茎尖
8、或根尖组织可获得无病毒植株，其原因是_（4）从表乙的实验结果可看出：吲哚乙酸和细胞分裂素是实验中的两种重要物质其中，新芽形成必需的条件是_；而在培养形成完整新个体过程中，对它们的调控关键是_11“白菜甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易储存等优点下图是“白菜甘蓝”培育过程示意图，请完成下列问题：（1）A、B细胞，在细胞融合之前已用_处理，除去了_；由A、B到细胞C的过程中，常用的化学方法是_融合完成的标志是_由杂种细胞D培育成“白菜甘蓝”植株，采用的技术手段是_（2）要制备“白菜甘蓝”的人工种子，要在d步骤选取具有生根发芽能力的_结构，包裹上人造种皮
9、即可（3）在d过程培养中，培养基的成分通常包括水、_、有机营养和_等，同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，另一个成功的关键是操作过程中必须保证_与过程b密切相关的具有单层膜结构的细胞器为_（4）若白菜细胞内有m条染色体，甘蓝细胞含n条染色体，则“白菜甘蓝”细胞内含_条染色体；若杂种细胞培育成为“白菜甘蓝”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于_倍体植株（5）如果形成D细胞的A、B细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是_12下图所示为用两栖动物的未受精卵所做的实验图解，据图回答下列问题：（1）蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需的_重新组合
10、的细胞相当于青蛙的_细胞，经过_和_形成组织和器官本实验结果说明_具有全能性（2）图中A过程采用的技术手段称为_技术为了获得肠上皮细胞，先剪取肠上皮组织剪碎后加入_处理，然后进行细胞培养获得上皮细胞（3）图中培养过程所用的营养液与植物组织培养基成分的主要不同是_（4）通过图示过程产生新个体的生殖方式是_，A过程中采用卵细胞作为受体细胞的优点有_13人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题（1）制备单克隆抗体过程中要用到_和_技术（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HC
11、G相当于_，注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了_和_ 等细胞以及_物质，此过程属于特异性免疫中的_免疫（3）细胞内DNA的合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的_成分具有筛选杂交瘤细胞的作用最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_（4）此过程生产的单克隆抗体可以与_特异性结合，从而诊断早孕（5）B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时，常用的不同于植物细胞融合的手
12、段是_，在动物细胞原代培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_此时，瓶壁上形成的细胞层数是_而在体外培养杂交瘤细胞时，瓶壁上形成的细胞层数是_2015-2016学年广东省佛山市高明一中高二（下）第一次月考生物试卷参考答案与试题解析一、单选题（每小题3分，共18分）1以下有关DNA重组技术基本工具的说法中，正确的是（）A一种限制酶只能识别某种特定的核苷酸序列B质粒是基因工程中唯一的载体C载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接DDNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键【考点】基因工程的原理及技术【分析】1、基因工程的工具：（1）
13、限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒2、作为运载体必须具备的条件：要具有限制酶的切割位点； 要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选能在宿主细胞中稳定存在并复制；是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来【解答】解：A、限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别某种特定的核苷酸序列，并在特定的位点之间进行切割，A正确；B、基因工程常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等，B错误；C、载体必须具
14、备的条件之一是具有限制酶切点，以便与外源基因连接，但不一定要有多个限制酶切点，C错误；D、DNA连接酶使黏性末端的脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键，D错误故选：A2现将“细胞工程”中动、植物细胞培养技术列表比较如下，你认为哪一项目的比较有错误（）比较项目原 理培养基区别结 果培养目的植物组织培养细胞的全能性需加植物激素培育成植株快速繁殖，培育无病毒植株等动物细胞培养细胞的全能性需加动物血清培育成细胞获得细胞或细胞的产物等A原理B培养基区别C结果D培养目的【考点】植物培养的条件及过程；动物细胞与组织培养过程【分析】植物组织培养与动物细胞培养的比较：植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞的增殖培
15、养基的物理性质固体液体（合成培养基）培养基的成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂、激素等葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等结果培育成新的植株或组织培育成细胞系或细胞株培养目的植株快速繁殖脱毒植株的培育人工种子生产药物、杀虫剂等转基因植物的培育蛋白质生物制品的生产皮肤移植材料的培育检测有毒物质生理、病理、药理学研究取材植物幼嫩的部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织其他条件均为无菌操作，需要适宜的温度、pH、O2 等条件【解答】解：A、植物组织培养过程中，利用了细胞的全能性的原理，而动物细胞培养利用了细胞增殖的原理，A错误；B、植物组织培养的培养基中需要加入植物激素
16、调节根、芽的分化，动物细胞培养过程中需加入动物血清，B正确；C、由于植物细胞具有全能性，因此通过组织培养可以获得完整植株，而动物细胞只是利用了细胞增殖的原理，因此只能培育成细胞系或细胞株，C正确；D、植物组织培养可以快速繁殖，培育无病毒植株等，而动物细胞培养可以获得细胞或细胞产物等，D正确故选：A3科学家将控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡胚胎细胞的DNA中，发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，在每一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白；而且这些鸡蛋孵出的鸡，仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋，据此分析错误的是（）A这些鸡是转基因工程的产物B这种变异属于可遗传的变异C该过程运用了胚胎移植技术D
17、该种变异属于定向变异【考点】基因工程的应用；胚胎移植【分析】采用基因工程技术，将一段控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡胚胎细胞的DNA中，发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，在每一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白；这些鸡蛋孵出的鸡，仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋，说明这种变异是可以遗传的【解答】解：A、由题意可知，这些鸡是DNA重组技术的产物，A正确；B、由题干信息“这些鸡蛋孵出的鸡，仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋”，说明该变异属于可遗传的变异，B正确；C、鸡是卵生动物，不需要进行胚胎移植，C错误；D、基因工程技术可以按照人们的意愿定向的改造生物的性状，D正确故选：C4下列事实能体现细胞全
18、能性的是（）A棉花根尖细胞经诱导形成幼苗B单细胞的DNA在体外大量扩增C动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体D胚胎干细胞经诱导培育成人体器官【考点】植物细胞的全能性及应用；动物细胞核具有全能性的原因及其应用【分析】细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能细胞具有全能性的原因是细胞含有该生物全部的遗传物质细胞全能性大小不同，一般植物细胞的全能性大于动物细胞，所以植物细胞比动物细胞更容易发育成完整个体，但动物细胞也能发育成完整个体，如小鼠体细胞经诱导培育成小鼠【解答】解：A、棉花根尖细胞经诱导形成幼苗体现了细胞的全能性，A正确；B、单细胞的DNA在体外大量扩增属于克隆，但没有形成新个体，
19、不能体现细胞的全能性，B错误；C、动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体，但没有形成新个体，不能体现细胞的全能性，C错误；D、胚胎干细胞在体外培养大量增殖的原理是细胞增殖，并没有形成新个体，不能体现细胞的全能性，D错误故选：A5人参皂甙干粉工厂化生产，下列哪种技术是必需的（）A杂交育种B植物组织培养C多倍体育种D单倍体育种【考点】植物培养的条件及过程【分析】植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产【解答】解：人参皂甙的工厂化生产过程：利用植物组织培养技术将外植体培育到愈伤组织，再进行植物细胞培养，进而获得
20、人参皂甙故选：B6下列实例与所利用的技术或原理不相符的是（）A转基因抗虫棉的培育需要利用植物组织培养技术B植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性C愈伤组织的形成和杂交瘤细胞的培养都与细胞分裂有关D植物原生质体融合和动物细胞融合利用了细胞膜的选择透过性【考点】细胞融合的概念及方法；植物培养的条件及过程；植物体细胞杂交的过程【分析】1、转基因抗虫棉的培育过程：在棉花的植株上提取叶肉细胞在苏云金杆菌上提取相应基因将提取基因导入植物叶肉细胞的DNA（利用基因重组技术）通过培养既培养出愈伤组织，进行再分化最后通过组织培养技术，得到含抗虫基因的棉花植株2、动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织
21、，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖过程：取动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养液中（原代培养）放入二氧化碳培养箱培养贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液转入培养液（传代培养）放入二氧化碳培养箱培养3、动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞【解答】解：A、转基因抗虫棉的培育需要利用植物组织培养技术，A正确；B、植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性，B正确；C、愈伤组织的形成和杂交瘤细胞的培养都与细胞分裂有关，C正确；D、植物原生质体融合和动物细胞融合利用了细胞膜的
22、流动性，D错误故选：D二、简答题（共82分）7根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有黏性末端和平末端（2）质粒运载体用EcoR切割后产生的片段如图所示为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoR切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同（3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶（4）反转录作用的模板是mRNA（或RNA），产物是cDNA（或DNA）若要在体外获得大量反转录产物，常采用PCR技术（5）
23、基因工程中除质粒外，噬菌体和动植物病毒也可作为运载体（6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱【考点】基因工程的原理及技术【分析】基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种DNA连接酶分为两类：EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶基因工程常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒【解答】解：（1）经限制性核酸内切酶切割后能形成两种
24、类型的末端，即平末端和黏性末端（2）为了便于相连，两种不同限制酶切割之后所产生的黏性末端必须相同（3）DNA连接酶分为两类：EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低（4）反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA，再合成双链DNA，利用PCR技术进行大量扩增（5）基因工程常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒（6）当受体细胞是细菌时，为了增大导入的成功率，常用Ca2+处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱故答案为：（
25、1）黏性末端 平末端（2）切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同（3）Ecoli T4（4）mRNA（或RNA） cDNA（或DNA） PCR（5）噬菌体 动植物病毒（6）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱8在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值如图所示是获得转基因莴苣的技术流程，请据图回答下列问题：（1）获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和（用逆转录等方法进行）人工合成（2）过程需要的酶有限制酶、DNA连接酶（3）重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp以外，还必须含有启动子、终止子和标记基因，这样才能构成一个完整的基
26、因表达载体（4）如果受体细胞C1是土壤农杆菌，则将目的基因导入它的Ti质粒上的TDNA，使目的基因进入受体细胞C2，并将其插入到受体细胞C2中染色体DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，形成转基因莴苣经过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达，在分子水平上可用抗原抗体杂交法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因莴苣培育成功（5）基因工程的应用除了以上之外还有很多，如用转基因动物作器官移植的供体，其主要优点是避免免疫排斥反应【考点】基因工程的原理及技术【分析】（1）获取目的基因的主要途径有从自然界已有的物种中分离和人工合成DNA在NaCl溶液中的溶解度随Na
27、Cl浓度的不同而不同当NaCl的浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低利用这一原理，可使溶解在NaCl溶液中的DNA析出DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的其他许多物质溶于酒精溶液利用这一原理，可以进一步提取含杂质较少的DNADNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色；DNA还有遇甲基绿溶液被染成蓝绿色的特性上述两种方法均可用于鉴定DNA的存在（2）过程为基因表达载体的构建过程，需要用到限制酶，切开特定的磷酸二酯键，形成粘性末端，DNA连接酶，连接磷酸二酯键（3）一个完整的基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因（4）农杆菌转化法利用的是农杆菌的转化作用，将目的基因整合到受体细胞的染色
28、体DNA上，进而使目的基因能够稳定遗传和表达检测目的基因是否成功表达可采用抗原抗体杂交法【解答】解：（1）目的基因的获取可采取直接分离获得也可采用人工合成方法，人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法 （2）提取目的基因需限制酶，将目的基因与运载体结合需DNA连接酶，故过程需要的酶有限制酶和DNA连接酶 （3）基因表达载体的构建包含：目的基因+启动子+终止子+标记基因 （4）将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，检则将目的基因导入它的Ti质粒上的TDNA，使目的基因进入受体细胞C2，并将其插入到受体细胞C2中染色体DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，形成转基因莴
29、苣检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原抗体杂交 （5）基因工程的应用除了以上之外还有很多，如用转基因动物作器官移植的供体，其主要优点是避免免疫排斥反应故选答案为：（1）（用逆转录等方法进行）人工合成（2）限制酶DNA连接酶（3）启动子 标记基因（4）Ti质粒上的TDNA染色体DNA抗原抗体杂交（5）免疫排斥9枯草杆菌产生的蛋白酶具有催化分解蛋白质的特性，但极易被氧化而失效1985年，美国的埃斯特尔将枯草杆菌蛋白酶分子中的第222位氨基酸替换后，虽然其水解活性有所下降，但抗氧化能力大大提高用这种水解酶作为洗涤剂的添加剂，可以有效地除去血渍、奶渍等蛋白
30、质污渍（1）改造枯草杆菌蛋白酶的生物技术是蛋白质工程（2）改造后的枯草杆菌中的控制合成蛋白酶的基因与原来相比，至少有1个碱基对发生变化（3）利用生物技术改造蛋白质，提高了蛋白质的稳定性，埃斯特尔所做的工作是对已知蛋白质进行少数氨基酸的替换（4）若要获得新型蛋白质，需用到的生物工程有蛋白质工程、基因工程和发酵工程（5）埃斯特尔获得新型的枯草杆菌蛋白酶的基本思路是什么？从预期的蛋白质功能出发，设计预期蛋白质的结构，推测应有的氨基酸的序列，推测出其基因中的脱氧核苷酸序列，然后对现有的基因进行改造或利用DNA合成仪合成出基因【考点】蛋白质工程【分析】蛋白质工程和基因工程的区别：目蛋白质工程基因工程区别
31、原理中心发展的逆推基因重组过程预期蛋白质供能设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列合成DNA表达出蛋白质获取目的基因构建基因表达载体将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定实质定向改造或生产人类所需蛋白质定向改造生物的遗传特性，一伙的人类所需的生物类型或生物产品（基因的异体表达）结果生产自然界没有的蛋白质生产自然界已有的蛋白质联系蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出的第二代基因工程，因为是对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，所以必须通过基因修饰或基因合成实现【解答】解：（1）改造枯草杆菌蛋白酶的生物技术是蛋白质工程（2）由于将枯草杆菌蛋白酶分子中的第222位氨基酸替
32、换，改造后的枯草杆菌中的控制合成蛋白酶的基因与原来相比，至少有1个碱基对发生变化（3）利用生物技术改造蛋白质，提高了蛋白质的稳定性，埃斯特尔所做的工作是对已知蛋白质进行少数氨基酸的替换（4）若要获得新型蛋白质，需用到的生物工程有蛋白质工程、基因工程和发酵工程（5）获得新型的枯草杆菌蛋白酶的基本思路是从预期的蛋白质功能出发，设计预期蛋白质的结构，推测应有的氨基酸的序列，推测出其基因中的脱氧核苷酸序列，然后对现有的基因进行改造或利用DNA合成仪合成出基因故答案为：（1）蛋白质工程（2）1（3）少数氨基酸的替换 （4）基因工程（5）从预期的蛋白质功能出发，设计预期蛋白质的结构，推测应有的氨基酸的序列
33、，推测出其基因中的脱氧核苷酸序列，然后对现有的基因进行改造或利用DNA合成仪合成出基因10通过植物组织培养技术可以快速繁殖、生产药物及培育无病毒的植物等据图甲、表乙回答问题离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体植物体 图甲植物组织培养过程表乙：植物的花芽分别在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中的生长状况A组B组C组D组E组吲哚乙酸03ppm3ppm0.03ppm0细胞分裂素00.2ppm0.002ppm1.0ppm0.2ppm花芽生长状况仍是组织切块形成愈伤组织愈伤组织分化出根愈伤组织分化出嫩芽稍生长（1）离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新的植物体的原因是植物细胞的全能性（2
34、）用植物组织培养方法诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状体结构，若包裹上人造种皮，制成人工种子，可能解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题胚状体来源于离体的植物体细胞，其形成过程中要经过的生理变化大体上是图甲中脱分化和再分化过程，在此过程中被培养的细胞始终受植物激素的调节（“”中填序号）（3）应用植物组织培养技术培养茎尖或根尖组织可获得无病毒植株，其原因是植物的茎尖或根尖很少被病毒感染，甚至无病毒（4）从表乙的实验结果可看出：吲哚乙酸和细胞分裂素是实验中的两种重要物质其中，新芽形成必需的条件是细胞分裂素的浓度大于吲哚乙酸的浓度；而在培养形成完整新个体过程中，对它们的调控关
35、键是调控好不同培养期的培养基中细胞分裂素与吲哚乙酸的浓度及其比例【考点】植物培养的条件及过程【分析】分析题图：图示表示植物组织培养过程，其原理是细胞的全能性，图中表示脱分化形成愈伤组织，表示再分化形成胚状体分析表格：图表表示植物的花芽分别在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中的生长状况，当细胞分裂素的浓度大于吲哚乙酸的浓度时，愈伤组织才能分化出嫩芽【解答】解：（1）离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新的植物体的原因是植物细胞的全能性（2）胚状体来源于离体的植物体细胞，其形成过程中要经过的生理变化大体上是图甲中脱分化和再分化过程，脱分化和再分化过程需要植物激素的调节（3）植物的茎尖或
36、根尖很少被病毒感染，甚至无病毒，因此应用植物组织培养技术培养茎尖或根尖组织可获得无病毒植株（4）在植物组织培养过程中，细胞分裂素和生长素起着重要的调节作用，当细胞分裂素高时，诱导丛芽的产生，当吲哚乙酸浓度高时，诱导根的产生，由此可见，对它们的调控的关键是适当控制好不同培养期的培养基中细胞分裂素和生长素的浓度及二者的比例故答案为：（1）植物细胞的全能性（2）脱分化再分化植物激素（3）植物的茎尖或根尖很少被病毒感染，甚至无病毒（4）细胞分裂素的浓度大于吲哚乙酸的浓度调控好不同培养期的培养基中细胞分裂素与吲哚乙酸的浓度及其比例11“白菜甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期
37、短、耐热性强和易储存等优点下图是“白菜甘蓝”培育过程示意图，请完成下列问题：（1）A、B细胞，在细胞融合之前已用纤维素酶和果胶酶处理，除去了细胞壁；由A、B到细胞C的过程中，常用的化学方法是聚乙二醇融合完成的标志是产生新的细胞壁由杂种细胞D培育成“白菜甘蓝”植株，采用的技术手段是植物组织培养（2）要制备“白菜甘蓝”的人工种子，要在d步骤选取具有生根发芽能力的胚状体结构，包裹上人造种皮即可（3）在d过程培养中，培养基的成分通常包括水、无机营养、有机营养和植物激素等，同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，另一个成功的关键是操作过程中必须保证无菌与过程b密切相关的具有单层膜结构的
38、细胞器为高尔基体（4）若白菜细胞内有m条染色体，甘蓝细胞含n条染色体，则“白菜甘蓝”细胞内含m+n条染色体；若杂种细胞培育成为“白菜甘蓝”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于单倍体植株（5）如果形成D细胞的A、B细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是用秋水仙素处理萌发的番茄种子或幼苗【考点】植物体细胞杂交的过程【分析】分析题图：图示为“白菜甘蓝”培育过程示意图，其中a表示诱导原生质体融合；b表示再生出新细胞壁的过程；c表示脱分化过程；d表示再分化过程【解答】解：（1）A、B等植物细胞，在细胞融合之前已用纤维素酶和果胶酶处理，除去了细胞壁，由A、B到细胞C的
39、过程中，常用的化学方法是聚乙二醇处理，融合完成的标志是产生新的细胞壁，由杂种细胞D培育成“白菜甘蓝”植株，采用的技术手段是植物组织培养（2）要制备“白菜甘蓝”的人工种子，要在d步骤选取具有生根发芽能力的胚状体结构，包裹上人造种皮即可（3）在d过程培养中，培养基的成分通常包括水、无机营养有机营养和植物激素等，同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，另一个成功的关键是操作过程中必须保证无菌与过程b再生细胞壁密切相关的具有单层膜结构的细胞器为高尔基体（4）若白菜细胞内有m条染色体，甘蓝细胞含n条染色体，则植物体细胞杂交得到的“白菜甘蓝”细胞内含m+n条染色体；配子不经过受精作用直接
40、发育而成的个体，无论含有几个染色体组，都叫做单倍体，故此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于单倍体（5）如果形成D细胞的A、B细胞都是番茄细胞，则C具有番茄细胞两倍的染色体那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是可以用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，可以使细胞中染色体数目增倍故答案为：（1）纤维素酶和果胶酶 细胞壁 聚乙二醇 产生新的细胞壁 植物组织培养 （2）胚状体（3）无机营养植物激素无菌 高尔基体（4）m+n单（5）用秋水仙素处理萌发的番茄种子或幼苗12下图所示为用两栖动物的未受精卵所做的实验图解，据图回答下列问题：（1）蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需的全部基因（全部遗传物质）重新组合
41、的细胞相当于青蛙的受精卵细胞，经过细胞分裂和细胞分化形成组织和器官本实验结果说明动物细胞核具有全能性（2）图中A过程采用的技术手段称为核移植技术为了获得肠上皮细胞，先剪取肠上皮组织剪碎后加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，然后进行细胞培养获得上皮细胞（3）图中培养过程所用的营养液与植物组织培养基成分的主要不同是前者必须含有动物血清、血浆等（4）通过图示过程产生新个体的生殖方式是无性繁殖，A过程中采用卵细胞作为受体细胞的优点有卵细胞体积大，易于操作；含有能促进细胞核全能性表达的物质；卵黄含量多，给重组细胞早期发育提供营养【考点】动物细胞核移植技术；动物细胞与组织培养过程【分析】分析题图：图示为用两栖动
42、物卵所做的实验图解，首先用紫外线照射破坏卵细胞核，得到去核卵细胞，用微吸管吸取肠上皮细胞的细胞核；其次采用显微注射法将细胞核注入去核卵细胞得到重组细胞；重组细胞进行胚胎发育形成蝌蚪，再变态发育形成青蛙【解答】解：（1）蝌蚪肠上皮细胞是由受精卵有丝分裂形成的，其细胞核中含有青蛙发育所需的全部基因（全部遗传物质）；重新组合的细胞相当于蛙的受精卵细胞，经过分裂和分化形成组织和器官本实验采用了核移植技术，这说明蝌蚪肠上皮细胞的细胞核具有全能性（2）图中A过程采用的技术手段称作核移植技术动物细胞培养过程中，分散细胞时利用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，然后进行细胞培养获得上皮细胞（3）动物细胞培养液与植物组织
43、培养基成分的主要不同是前者必须含有动物血清、血浆等（4）通过图示过程产生新个体所用技术手段为核移植，生殖方式是无性生殖 卵细胞体积大，易于操作；含有能促进细胞核全能性表达的物质；卵黄含量多，给重组细胞早期发育提供营养，因此常采用卵细胞作为受体细胞故答案为：（1）全部基因（全部遗传物质）受精卵细胞分裂细胞分化动物细胞核（2）核移植胰蛋白酶或胶原蛋白酶（3）前者必须含有动物血清、血浆等（4）无性繁殖 卵细胞体积大，易于操作；含有能促进细胞核全能性表达的物质；卵黄含量多，给重组细胞早期发育提供营养13人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于
44、早孕的诊断如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题（1）制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于抗原，注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了效应B细胞和记忆细胞 等细胞以及抗体物质，此过程属于特异性免疫中的体液免疫（3）细胞内DNA的合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加
45、的氨基嘌呤成分具有筛选杂交瘤细胞的作用最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是能无限增殖并分泌特异性抗体（4）此过程生产的单克隆抗体可以与人绒毛膜促性腺激素（或HCG）特异性结合，从而诊断早孕（5）B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时，常用的不同于植物细胞融合的手段是灭活的病毒，在动物细胞原代培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制此时，瓶壁上形成的细胞层数是一层而在体外培养杂交瘤细胞时，瓶壁上形成的细胞层数是多层【考点】动物细胞与组织培养过程；单克隆抗体的制备过程【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、
46、特异性强的抗体具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞第二次筛选：利用多孔板法和抗原抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞3、单克隆抗体的作用：作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”4、从机
47、体取出后立即培养的细胞为原代细胞原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到4050代，这部分细胞称为细胞株细胞株传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，这部分细胞称为细胞系【解答】解：（1）制备单克隆抗体的诱导过程有：正常小鼠免疫处理、动物细胞的融合、杂交瘤细胞的筛选与培养、专一抗体检验阳性细胞培养、单克隆抗体的提纯要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术（2）如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，给小鼠注射的HCG相当于注射抗原，使小鼠产生分泌抗HCG抗体相应的效应B淋巴细胞抗体
48、是参与体液免疫的免疫活性物质（3）氨基嘌呤可以阻断在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA因此配制的HAT培养基中添加氨基嘌呤的成分具有筛选杂交瘤细胞的作用杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体（4）抗体与抗原发生特异性结合人绒毛膜促性腺激素（或HCG）是抗原，可以与抗HCG单克隆抗体发生特异性结合（5）B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时，采用的不同于植物细胞融合的手段是用灭活的病毒诱导细胞融合细胞的接触抑制：细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖由于接触抑制，动物细胞培养时，瓶壁上只能形成的单层细胞而在体外培养杂交瘤细胞时，具有无限增值的特点，瓶壁上形成的细胞层数是多层故答案为：（1）动物细胞培养动物细胞融合（2）抗原效应B细胞 记忆细胞 抗体体液（3）氨基嘌呤能无限增殖并分泌特异性抗体（4）人绒毛膜促性腺激素（或HCG）（5）灭活的病毒 相互接触 接触抑制 一层 多层2016年10月5日