1、巴斯德 法国，微生物学家失败的原因：发酵物中混入了杂菌 了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。一.课题目标无菌技术的操作。二.课题重难点1.何为培养基？3.各种培养基的具体配方不同，但其基本成分都相同，都包括哪些营养成分？自主学习:2.按照物理形态、化学成分、用途分，培养基的种类有哪些？基础知识(一)培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。(一)培养基1.概念：2.类型及应用：液体培养基固体培养基据物理性质分天然培养基合成培养基据化学成分分选择培养基鉴别培养基据用途分2.类型及应用：(一)培养基常用于工业生产用于微生物的分离、鉴定、计数
2、加琼脂常用于工业生产常用于分类、鉴定培养、分离出特定微生物鉴别不同种类的微生物在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成。液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长练习 下列有关培养基的叙述正确的是（）A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类：固体培养基和液体培养基C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌A要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（）A.固体培养基 B.液体培养基 C.加入青霉素的培养基 D.加入
3、高浓度食盐的培养基 A练习碳源氮源无机盐水(一)培养基3.营养要素还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、碱基)牛肉膏蛋白胨培养基配方牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl 5.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000ml。配方中的各成分为微生物提供了哪些营养？(一)培养基3.营养要素：碳源、氮源、磷酸盐和维生素氮源和维生素无机盐H、O对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源。即有些化合物作为营养要素成分时并非单一方面的作用。并非所有微生物都需添加特殊营养物质选择培养基 应用 加入青霉素加
4、入高浓度食盐不加氮源不加含碳有机物的无碳培养基分离酵母菌、霉菌等真菌分离金黄色葡萄球菌分离固氮菌分离自养型微生物下列叙述错误的是（）A.培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素 B.培养霉菌时需将培养基中的pH调至碱性 C.培养细菌时需将pH调至中性或微碱性 D.培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件 B练习1、何为无菌技术？无菌技术包括哪些方面？2、消毒和灭菌的区别？3、常用的消毒方法有哪些？4、常用的灭菌方法有哪些？自主学习：(二)无菌技术1.获得纯净培养物的关键：防止外来杂菌的入侵2.无菌技术包括：对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行
5、灭菌；为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品接触。(二)无菌技术P15思考题 练习 下列操作与无菌技术无关的是（）A.接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦拭双手B.接种前用火焰烧灼接种针C.培养基在50 左右时搁置斜面D.在酒精灯火焰旁边完成C消毒 使用较为温和的物理或化学方法，杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。3.消毒与灭菌灭菌 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭(1)定义 1、煮沸消毒法:100煮沸5-6min，日常生活中广泛应
6、用 2、巴氏消毒法：70-75 煮30min或80煮15min，牛奶、啤酒等不宜进行高温消毒的 3、化学药剂消毒法:75%酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液等 4、紫外线消毒法：用于接种室空气消毒 (2)消毒的方法：3.消毒与灭菌1、灼烧灭菌：用于微生物接种工具，如：接种环、接种针或其他金属用具等，及接种过程中试管口或锥形瓶口的灭菌 (3)灭菌的方法：3.消毒与灭菌2、干热灭菌：160-170 下加热1-2h。用于玻璃器皿、金属用具等能耐高温、需保持干燥的物品。3、高压蒸气灭菌：100kPa、121 下维持 15-30min.广泛用于培养基及多种器材、物品。(3)灭菌的方法：3.消毒与灭菌P16
7、请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手 答：（1）（2）需要灭菌；（3）需要消毒。练习 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（）A.接种针、手、培养基B.高压锅、手、接种针C.培养基、手、接种针D.培养基、手、高压锅C变形题 培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是（）化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线消毒高压蒸汽灭菌巴氏消毒法A.B.C.D.A练习 外科手术器械和罐头食品的处理，要以能够杀死什么为标准（）A.球菌B.杆菌C.弧菌D.芽孢D练习 微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（）A.细菌的大小、形状、颜色B.菌落的大小、形状、颜色C.有无鞭毛D.培养基的不同B 关于微生物营养物质的叙述中，正确的是（）A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量 D练习规律：对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是微生物的碳源，又是氮源；有机碳源能提供能量，无机碳源不能提供能量；无机物也可提供碳源、氮源和能源。