1、生 物 选修 人教版新课标导学专题五 DNA和蛋白质技术 专题整合归纳1 网络构建 2 真题演练 返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版网 络 构 建返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版DNA和蛋白质技术DNA的粗提取与鉴定实验原理:根据DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同进行提取、分离鉴定试剂:二苯胺主要实验步骤:实验材料的选择;破碎细胞获得含DNA的溶液;去除溶液中杂质;DNA的析出与鉴定注意事项:血液中要加入柠檬酸钠抗凝;搅拌动作要轻缓,减少DNA分子的断裂;二苯胺现用现配返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版DNA和蛋白质技术 多聚酶链
2、式反应扩增DNA片段PCR原理:复制方向,DNA热变性原理PCR反应所需条件:DNA模板、引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶、可控温度的缓冲溶液PCR反应的三步:变性、复性、延伸注意事项:避免外源DNA等因素污染;所用缓冲液和酶应分装成小份于20储存,使用前在冰块上缓慢溶化;移液器的枪头必须每次更换返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版DNA和蛋白质技术血红蛋白的提取和分离凝胶色谱法原理:根据相对分子质量的大小分离蛋白质电泳原理:待分离样品中各种分子带电性质的差异以及本身的大小、形状的不同使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离实验操作步骤样品处理:红细胞
3、的洗涤;血红蛋白的释放;分离血红蛋白溶液;透析凝胶色谱操作:凝胶色谱柱的制作;凝胶色谱柱的装填;样品的加入和洗脱注意事项:红细胞洗涤次数不能过少;离心速度不能过高、时间不能过长;装填凝胶色谱柱时不能有气泡存在返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版真 题 演 练返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版1(2019江苏卷,10)下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述,错误的是()A用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近BDNA析出过程中,搅拌操作要轻柔以防DNA断裂C预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNAD用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热解析 哺乳动物(如兔)成
4、熟的红细胞无细胞核,细胞内基本不含DNA,故兔血不宜作为该实验的实验材料,A项错误。DNA析出过程中,搅拌要轻柔,以防止DNA断裂,B项正确。DNA不溶于冷乙醇,向DNA提取液中加入适量预冷的乙醇溶液,会使DNA析出,从而进一步提纯DNA,C项正确。向溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂,沸水浴加热数分钟,溶液出现蓝色,D项正确。A 返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版2(2015广东卷,3)关于DNA的实验,叙述正确的是()A用兔的成熟红细胞可提取DNABPCR的每个循环一般依次经过变性延伸复性三步CDNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物D用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色
5、,细胞核呈绿色,细胞质呈红色解析 成熟的哺乳动物的红细胞没有细胞核和众多细胞器,不含DNA,不适于提取DNA,A错;PCR每个循环依次为变性、复性、延伸三步,B错误;DNA与二苯胺试剂混合,在沸水浴条件下呈蓝色,可以用来鉴定DNA,C正确;用甲基绿吡罗红试剂对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,细胞质呈红色。C 返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版3(2018江苏,17)关于还原糖、蛋白质和DNA的鉴定实验,下列叙述正确的是()A在甘蔗茎的组织样液中加入双缩脲试剂,温水浴后液体由蓝色变成砖红色B在大豆种子匀浆液中加入斐林试剂,液体由蓝色变成紫色C提取DNA时,在切碎的洋葱中加入
6、适量洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤并弃去滤液D将DNA粗提物溶解在2mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂,沸水浴后液体由无色变成蓝色D 返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版解析 A错:甘蔗茎的组织样液中含有大量的蔗糖,蔗糖属于非还原性糖,与斐林试剂在5065的水浴加热条件下不会产生砖红色沉淀。B错:大豆种子的匀浆液中含有大量的蛋白质,鉴定蛋白质时应使用双缩脲试剂,双缩脲试剂在常温下能与蛋白质发生反应,生成紫色的络合物。C错:提取DNA时,植物细胞需要先用洗涤剂溶解细胞膜。在切碎的洋葱中加入适量的洗涤剂和食盐,进行充分的研磨,过滤后收集滤液。D对:在沸水浴条件下,DNA与二苯
7、胺试剂反应呈现蓝色。返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版4(2017江苏卷,33节选)金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版(1)图中步骤1代表_,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。(2)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏_的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但_的引物需要设定更高的退火温度。(3)如
8、果 PCR 反 应 得 不 到 任 何 扩 增 产 物,则 可 以 采 取 的 改 进 措 施 有_(填序号:升高退火温度 降低退火温度 重新设计引物)。变性 引物与模板 GC含量高 返回导航专题五 DNA和蛋白质技术 生物选修 人教版解析(1)根据PCR的过程可知,图中步骤1为变性,步骤2为退火(复性),步骤3为延伸,这三个步骤构成一个循环。(2)退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,过高的退火温度会破坏引物与模板的碱基配对。因G、C之间的氢键数多于A、T之间的氢键数,故GC含量高的引物需要设定更高的退火温度。(3)如果PCR反应得不到任何扩增产物,可能的原因是退火温度过高使扩增效率降低,也可能是未按照目的基因两端的核苷酸序列来设计引物,因此可以采取的措施是降低退火温度、重新设计引物等。