1、限时规范训练1(2016宁夏银川三模)微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有关微生物的知识，分析回答问题：(1)培养基的制备需经过计算、称量、溶化和B：_、A：_等过程，上述过程中需要在超净工作台上操作的是_。(2)纯化菌种时为得到单菌落，常采用的接种方法是平板划线法和D：_，其中需用接种环进行操作的是_。(3)为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的_，培养基中加入_指示剂培养后，若变红则其中含有所需细菌。若筛选纤维素分解菌，在选择培养后须进行E：_和F：_过程，一般通过观察_的有无挑选出所需菌种。解析：(1)培养基的制备需经过计算、称量、溶化、
2、B灭菌、A倒平板等过程，其中倒平板需要在超净工作台上操作。(2)常采用的微生物接种方法是平板划线法和D稀释涂布平板法。其中平板划线法需用接种环进行操作。(3)欲筛选土壤中分解尿素的细菌，培养基中应以尿素作为唯一的氮源，需要在培养基中加入酚红指示剂进行鉴定。若筛选纤维素分解菌，在选择培养后须进行E梯度稀释F涂布平板挑选产生透明圈的菌落。答案：(1)灭菌倒平板倒平板(2)稀释涂布平板法平板划线法(3)氮源酚红梯度稀释涂布平板透明圈2(2016宁夏银川三模)牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生
3、物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中，混合均匀，如此再重复2次。请回答下列有关问题：(1)微生物培养操作过程中，为了防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_(填“消毒”或“灭菌”)，操作者双手要进行清洗和_。除巴氏消毒外，还有_和化学药剂消毒。(2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布，选择的涂布工具称为_，为防止杂菌污染，该工具应浸泡于酒精中，涂布前应_。(3)图中所示方法为稀释培养法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为35个、
4、33个、34个，则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为_个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_(填“偏大”或“偏小”)，原因是_。解析：(1)消毒指使用较温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。故防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌，操作者双手要进行清洗和消毒。常用消毒方法有：巴氏消毒法、煮沸消毒法和化学药剂消毒法。(2)稀释涂布平板法中的涂布工具称为涂布器。为防止杂菌污染，该工具应浸泡于酒精中，涂布前应将涂布器引燃(灼烧)，消灭杂菌，待冷却后使用，避免高温杀死菌种。(3)每个细菌
5、在培养基培养可以形成一个菌落，3个培养皿，菌落数分别为35个、33个、34个，取平均值，得到生牛奶中每毫升含细菌数为340.11043.4106个。因为进行菌落计数时，两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算，故统计的结果往往较实际值偏小。答案：(1)灭菌消毒煮沸消毒(2)涂布器将涂布器引燃(灼烧)后待冷却(3)3.4106偏小当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算3如表所示是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列问题：成分含量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HOP42.0 g显色剂(伊红美蓝)0.2 g琼脂12.0 g将上述物质溶解后
6、，用蒸馏水定容到1 000 mL(1)大肠杆菌的同化类型为_，从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于_。(2)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是_，因此需对培养基和培养皿进行_(填“消毒”或“灭菌”)，操作者的双手需要进行清洗和_。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使_，还能破坏DNA的结构。(3)根据用途划分，该培养基属于_(填“选择”或“鉴别”)培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中_换成_，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成_。(4)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是_和_。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为_。解析：(1)由
7、于培养大肠杆菌菌群的培养基配方中含有有机物，说明大肠杆菌的同化类型为异养型。(2)在微生物的实验室培养中，需对培养基和培养皿进行灭菌处理，对操作者的双手需要进行清洗和消毒，而空气中的细菌可用紫外线杀灭，从而防止外来杂菌的入侵，获得纯净的培养物。(3)该培养基中加入了显色剂伊红美蓝，因而该培养基属于鉴别培养基；若要分离能分解尿素的细菌需将培养若中蛋白胨换成尿素，鉴定分解尿素的细菌常用酚红指示剂。(4)培养微生物常用的接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法。答案：(1)异养型分解者(2)防止外来杂菌的入侵灭菌消毒蛋白质变性(3)鉴别蛋白胨尿素酚红指示剂(4)平板划线法稀释涂布平板法菌落4下面是制备固
8、定化酵母细胞的实验步骤，请回答：酵母菌细胞的活化配制CaCl2溶液配制海藻酸钠溶液海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合固定化酵母细胞(1)在_状态下，微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复_状态。活化前应选择足够大的容器，因为酵母菌活化时_。(2)一般来说，酶更适合采用_和_法固定，而细胞多采用_固定，原因是细胞个大，酶分子很小，个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。(3)加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，关系着实验的成败。如果海藻酸钠浓度过_，很难形成凝胶珠；如果浓度过_，形成的凝胶珠所包埋的_数目少，影响实验效果。(4)刚形成的凝胶珠应在_溶液中浸泡
9、一段时间，以便形成稳定的结构。将凝胶珠加入用于发酵的葡萄糖溶液中发现有_产生，同时有_散发，说明凝胶珠制备成功。解析：细胞在缺水状态下，代谢缓慢，活化就是让细胞恢复正常的代谢状态。酶和细胞的不同固定方法是根据其体积大小来确定的，固定细胞的常用载体材料有明胶、琼脂糖、海藻酸钠等。用海藻酸钠固定细胞时，其浓度与凝胶珠制作的质量密切相关。CaCl2的作用是使形成的凝胶珠更稳定，在适宜条件下凝胶珠中的酵母菌可利用葡萄糖进行无氧呼吸，产生二氧化碳和酒精。答案：(1)缺水正常的生活体积会变大，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外(2)化学结合法物理吸附包埋法(3)高低酵母细胞(4)CaCl2气泡酒味5请回答下
10、列与传统发酵技术相关的问题：(1)苹果酒口感清醇，营养丰富，适量饮用，可舒筋活络，是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用_来检验。(2)果醋制作使用的菌种是_，当_都充足时，其可将果汁中的糖分解成醋酸。(3)腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是_，发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制_生长，避免豆腐变质。(4)制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是_。蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐。在_条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成_色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，估算出的亚硝酸盐
11、含量如图曲线所示，据图可以得出的结论是_。解析：(1)在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。(2)当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸。(3)在腐乳制作中，主要是毛霉参与了豆腐的发酵。腌制时加盐可以析出豆腐中的水分，还能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。(4)由于乳酸菌是厌氧菌，制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是隔绝空气，创造无氧环境。亚硝酸盐含量的测定是在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。泡菜腌制的过程中，亚硝酸盐含量具有规律性变化，由题图可知，其含量先增如，到第4天时达到最高，之后逐渐减少，即先
12、增加后减少。答案：(1)酸性重铬酸钾(2)醋酸菌氧气、糖源(3)毛霉微生物(4)创造无氧环境盐酸酸化重氮化玫瑰红泡菜封坛后亚硝酸盐含量不断增加，至第4天含量最高，以后逐渐减少6在薄荷油提取中，由于薄荷油化学性质稳定，不溶于水，因此可采用水中蒸馏法，请设计简单的实验装置水蒸气蒸馏装置来提取薄荷油。蒸馏装置：铁架台两个、酒精灯、石棉网、蒸馏瓶、橡胶塞、蒸馏头、温度计、直型冷凝管、接液管、锥形瓶，以及连接进水口和出水口的橡皮管。(所有仪器必须事先干燥，保证无水)(1)整套蒸馏装置可分为左、中、右三部分，其中左边的部分用来_，中部用来_。(2)有人设计了一套实验室蒸馏芳香油的五个步骤：A将蒸馏烧瓶固定
13、在铁架台上，在蒸馏烧瓶上塞好带温度计的橡皮塞B连接好冷凝管，把冷凝管固定在铁架台上，将冷凝管进水口橡皮管的另一端与水龙头相连，将和出水口相接的橡皮管的另一端放在水槽中C把酒精灯放在铁架台上，根据酒精灯高度确定铁圈的高度，放好石棉网D向蒸馏烧瓶中放入几片碎瓷片，再用漏斗向烧瓶中加入原料，塞好带温度计的橡皮塞，把接液管连接在冷凝管的末端，并伸入接收装置(如锥形瓶)中E检查气密性薄荷油可用_法提取，原因是高温_。上述实验正确的操作顺序是_。冷凝管里水流的方向与水蒸气的流向_。在蒸馏烧瓶中加入几片碎瓷片，目的是_。通过蒸馏，得到的是_，若想得到纯净的薄荷精油需_，首先向乳液中加入氯化钠，目的是_。静置
14、后在_(“上口”或“下口”)得到产物。提取薄荷精油的程序是_。(用简单的文字和箭头表示)。解析：本题考查薄荷精油的提取装置和提取过程，意在考查考生对实验装置的了解程度和对实验步骤的理解和掌握。答案：(1)通过加热进行蒸馏将蒸馏物冷凝(2)水蒸气蒸馏不易分解、难溶于水、能随水蒸气蒸出CABED相反防止暴沸油水混合物进行分液增加水层的密度，使混合物出现明显分层上口薄荷叶清水水蒸气蒸馏油水混合物分离油层除水薄荷精油7某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动，具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10 g。剪碎后分成两组，一组置于20 、另一组置于20 条件下保存24 h。
15、DNA粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。第二步：先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液，再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地沿一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取6支试管，分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测：在上述试管中各加入4 mL某检测试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表：材料保存温度花菜辣椒蒜黄20 20 注：“”越多表示颜色越深。分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验课题的名称是_。
16、(2)第二步中加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液的目的是_。“缓缓地搅拌”的目的是_。(3)在DNA检测这一步骤中，若试管中含一定量的DNA，加入4 mL_试剂，混合均匀后置于沸水中加热5 min，待试管冷却后溶液显_色。(4)根据实验结果，得出结论并分析。结论1：与20 相比，相同实验材料在20 条件下保存，DNA的提取量较多。结论2：_。针对结论1，请做出合理的解释：_。解析：该实验中的自变量是不同材料和不同保存温度，因变量是颜色深浅，反映DNA的量，故实验目的是探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。加入冷酒精可以使DNA析出，玻璃棒缓缓搅拌可防止DNA断裂。DNA遇二苯
17、胺在加热条件下溶液呈现蓝色，蓝色越深，说明DNA的提取量越大。答案：(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)使DNA析出防止DNA断裂(3)二苯胺蓝(4)等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下从蒜黄中提取的DNA量最多低温抑制了酶的活性，DNA降解速度慢8.天然胡萝卜素作为保健品食用，可医治维生素A缺乏症、干皮症、抗光敏症等疾病。科学研究证明，胡萝卜素能防治或延缓癌症，是具有广泛免疫功能的药物和不可缺少的饮料添加剂。目前在国内外食品工业和其他诸多行业中，胡萝卜素一直处于供不应求的状态。请根据上述材料及所学知识，回答下列问题：(1)新鲜的胡萝卜含有大量的水分，在胡萝卜素的提取
18、过程中，要对新鲜的胡萝卜进行_，且要注意控制_和时间，这是因为_。(2)天然胡萝卜素可医治维生素A缺乏症，是因为_。(3)如图为提取胡萝卜素的实验流程图：胡萝卜粉碎干燥A过滤B胡萝卜素A过程叫_，B过程叫_。.许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现要用薄荷叶提取薄荷油，回答下列问题：(1)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用_(填“鲜”或“干”)薄荷叶作为原料，其原因是_。(2)用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是_，原理是_。(3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是_。常用于分离油层和水层的器皿是_。在分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是_，除去固体硫酸钠的
19、常用方法是_。解析：.(1)新鲜的胡萝卜含有大量的水分，在胡萝卜素的提取过程中，要对新鲜的胡萝卜进行干燥，且要注意控制温度和时间，这是因为温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。(2)胡萝卜素在人体内可分解为维生素A。(3)提取胡萝卜素的实验流程为：胡萝卜粉碎干燥萃取过滤浓缩胡萝卜素。.(1)提取薄荷油时应选用鲜薄荷叶作为原料，其原因是薄荷油易挥发，薄荷叶干燥过程中会使薄荷油挥发掉。(2)用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是酒精或石油醚、乙醚、戊烷等，原理是薄荷油易溶于有机溶剂。(3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是增加盐的浓度，使分层更明显。常用于分离油层和水层的器皿是分液漏斗。在分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是吸收油层中的水分，除去固体硫酸钠的常用方法是过滤。答案：.(1)干燥温度温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解(2)胡萝卜素在人体内可分解为维生素A(3)萃取浓缩.(1)鲜薄荷油易挥发，薄荷叶干燥过程中会使薄荷油挥发掉(2)石油醚、乙醚、戊烷等薄荷油易溶于有机溶剂(3)增加盐的浓度，使分层更明显分液漏斗吸收油层中的水分过滤