1、二 动物细胞工程教学目的动物细胞工程的主要技术动物细胞培养、动物细胞融合和单克隆抗体（A：知道）。重点和难点单克隆抗体教学过程【板书】 动物细胞培养 动物细胞融合动物细胞工程 单克隆抗体的制备 单克隆抗体 单克隆抗体的应用【注解】一、 动物细胞培养（一）培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清（与植物组织培养基的区别） 取材：动物胚胎细胞或出生不久的幼龄动物的器官或组织 分离细胞 方法：用胰蛋白酶（二）过程 原代培养传代培养 10代左右细胞株：40-50代细胞系：无限传代（部分遗传物质发生了改变，具癌变特点）（三）应用：1 生产有重要价值的蛋白质生物制品2 培养用于移植的组织或器
2、官3 检测有毒物质4 进行生理、病理研究，为治疗和预防疾病提供理论依据【例析】在动物细胞培养过程中，出现遗传物质改变的细胞是（A）A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞下列属于动物细胞培养与植物细胞培养区别的是（A）A培养基成分不同B动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株二、动物细胞融合（一） 与植物体细胞杂交的比较1 相同：动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是相同的，诱导融合的方法类似。（如都可用聚乙二醇PEG）2 不同（1） 物体细胞杂交在植物原生质体融合后，还有把杂种体细胞培育成新个体这一步骤。而
3、动物细胞融合则无这一步。（2） 动物细胞融合常用灭活的病毒。（二）最重要的用途制备单克隆抗体三、单克隆抗体（一）与血清抗体的区别单克隆抗体：由单个B细胞通过无性繁殖（克隆）形成细胞群，由它们产生出化学性质单一，特异性强的抗体。血清抗体：从动物血清中分离所得的抗体，产量低、特异性差、纯度低，反应不够灵敏。（二）制备小鼠脾脏B淋巴细胞+小鼠的骨髓瘤细胞（经过免疫、效应） 灭活病毒或PEG（融合后有个筛选问题，剔除相同细胞的融合细胞） 具效应B淋巴细胞分泌特异性抗体的能力杂交瘤细胞 具骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力挑选出能产生特定抗体的细胞群、继续培养（用选择培养基选出能产生单克隆抗体的）
4、 体内或体外培养 单克隆抗体（三）应用1 对理论研究有重要意义2 实践中的应用：疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性非常明显。（治疗癌症的“生物导弹”）四、哺乳动物的胚胎移植【例析】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可得到大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的是（A）A经过免疫的B淋巴细胞 B没经过免疫的T淋巴细胞 C经过免疫的T淋巴细胞 D没经过免疫的B淋巴细胞下列有关克隆的叙述，不正确的项目是（D）A生物通过体细胞进行的无性生殖 B将肿瘤细胞在体外培养成一个细胞系C扦插和嫁接实质上也是克隆 D将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA中
5、（克隆可以理解为“复制”、“无性繁殖”，若排除基因突变的话，前后代是完全一样的，是从一个共同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子，细胞或个体。）【同类题库】动物细胞工程的主要技术动物细胞培养动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于（A）A培养基不同 B动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株 C动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 D动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 在进行动物细胞培养时，通常选用的培养材料是（D）A衰老退化的动物组织细胞 B成熟动物个体的体细胞C动物的受精卵细胞 D动物胚胎或幼龄个体的细胞为了使用于培养的动物组织分散开以便配制成一定浓度的细
6、胞悬浮液，选取来的动物组织应先用下列哪种物质处理（B）A胃蛋白酶 B胰蛋白酶 C盐酸 D胰脂肪酶动物细胞培养过程中，当培养至50代后，这时的细胞具有癌变的特点，它们属于并称为（D）A原代培养 细胞株 B原代培养 细胞系 C传代培养 细胞株 D传代培养 细胞系动物细胞工程技术的基础是（C）A动物细胞融合 B胚胎移植 C动物细胞培养 D核移植哺乳动物如牛、羊等是人类生活中一种重要的肉制品、皮毛制品的原料来源，但哺乳动物妊娠时间长，每胎产子数少，繁殖速度比较慢。要加快优良种畜的繁殖速度，目前最好采用的方法（B）A动物细胞培养 B胚胎移植 C动物细胞融合 D核移植表现不同的母牛生育出基因型完全相同的小
7、牛。产生这一结果最可能的原因是（C）A试管动物培养 B胚胎移植 C胚胎分割移植 D受精卵移植动物细胞工程的主要技术动物细胞融合下列对动物细胞培养的有关叙述正确的是（B）A动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散开C细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过程中D培养至50代后的传代细胞称为细胞株关于制备单克隆抗体的叙述正确的是（B）A单克隆抗体产自淋巴细胞 B单克隆抗体的制备要经过细胞融合C单克隆抗体的获得不需要使细胞癌变D获得的单克隆抗体具有特异性强纯度高灵敏度低和产量高的特点（多选）在细胞工程的细胞融合过程中，能促使细胞融合的方法或物质有（AB） A灭活
8、的病毒 B聚乙二醇 C乙醇 D丙酮酸下列属于动物细胞培养和植物组织培养区别的是（A）A培养基成分不同 B动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株动物细胞融合的目的中最重要的是（B）A克服远缘杂交的不亲和性 B制备单克隆抗体C培育新品种 D生产杂种细胞动物细胞工程的主要技术单克隆抗体“神州四号”飞船成功地发射与回收，其携带的生命系统装置中有混合的小白鼠骨髓瘤细胞和淋巴细胞，在微重力的情况下，请预测该实验的作用(C)A提高骨髓瘤细胞和淋巴细胞的突变频率 B提高骨髓瘤细胞和淋巴细胞的繁殖能力C提高骨髓瘤细胞和淋巴细胞的融
9、合几率D促进B淋巴细胞产生抗体在“神舟四号”宇宙飞船中举行了一场“细胞婚礼”，如果这次“婚礼”进展顺利，人们将从小鼠杂交瘤细胞的分泌物中提取到乙肝抗体，这将为规划未来空间药厂提供第一手数据。下列说法正确的是(B)A参加“婚礼”的是小鼠的骨髓瘤细胞和T淋巴细胞B用这种方法提取的乙肝抗体特异性强，灵敏度高C能激发小鼠细胞产生乙肝抗体的是乙肝病毒的DNAD小鼠杂交瘤细胞能制成生物导弹治疗癌症单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处在于（C）A单克隆抗体可以能够制成“生物导弹” B单克隆抗体可以在体外制备C单克隆抗体的特异性强，灵敏度高，产量也大大高于血清抗体D单克隆抗体的制备过程简单关于制备单克隆抗体的叙
10、述正确的是（B）A单克隆抗体产自淋巴细胞 B单克隆抗体的制备要经过细胞融合C单克隆抗体的获得不需要使细胞癌变 D诱导融合的手段唯一单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面与常规抗体相比的特点是（D）A单克隆抗体特异性强、纯度低、灵敏度高、产量高B单克隆抗体特异性强、纯度高、灵敏度低、产量高C单克隆抗体特异性强、纯度高、灵敏度高、产量低D单克隆抗体特异性强、纯度高、灵敏度高、产量高下列哪一项属于克隆（D）A将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B将抗菌药的某基因引入到草履虫的细胞内C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D将某种瘤细胞在体外培养成一个细胞系要想获得大量的单克隆抗体就
11、必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（D）A在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖B在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体C每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应D每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体（多选）将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（AC）AB淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖BB淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体C骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体D骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖科学家用小鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，所用的B淋巴细胞是（B
12、）（筛选针对的是杂交瘤细胞，不是B淋巴细胞，不选D）A来自骨髓的B淋巴细胞 B来自脾脏的能产生抗体的B淋巴细胞C来自胸腺的B淋巴细胞 D经过筛选的，能产生单一抗体的B淋巴细胞癌症严重地威胁着人类的生命。由于地球环境恶化，臭氧层空洞扩大，每年因患癌症而死亡的人呈递增趋势，据统计，1998年世界上因患各种癌症而死亡的人数高达127万人。攻克癌症是当前医学上重要的研究课题。医学上，对于癌症病人通常采用手术切除肿瘤，然后进行“化疗”，“化疗”的基本原理是通过化学药物作用于细胞周期的间期，抑制癌细胞增殖，从而达到控制病人病情恶化的目的。1975年，英国科学家将B淋巴细胞中产生抗体的基因，通过特殊的技术转
13、移到肿瘤细胞内，成功地获得了世界上第一株能够稳定分泌单一抗体的杂交瘤细胞，使治疗癌症又有了新突破。请根据以上材料回答：（1）“化疗” 能控制病情恶化是因为化学药物通过抑制 ，达到终止 的目的。（2）B淋巴细胞中产生抗体的基因，转移到肿瘤细胞内的 分子上，使抗体基因在肿瘤细胞内控制抗体的合成。（3）经培养的肿瘤细胞，在大量增殖过程中通过 的方式，产生大量 ，供医学上应用。（1）肿瘤细胞的DNA的复制；肿瘤细胞增殖（2）DNA（3）基因表达；单克隆抗体攻克癌症是当前医学上重要的研究课题，阅读下文并回答问题 医学上，对于癌症患者通常采用手术切除肿瘤，然后再进行化疗。化疗的基本原理是通过药物作用于癌细
14、胞的分裂间期，抑制它的增殖，从而达到控制病情恶化的目的。1975年，美国科学家科勒和米斯坦，将效应B细胞中产生抗体的基因，通过特殊的技术转移到肿瘤细胞内，成功的获得了世界上第一株能稳定分泌单一抗体的转基因瘤细胞。使医治癌症有了新的突破。（1）“化疗”能控制病情恶化是药物能通过抑制间期的 ，达到终止肿瘤细胞的 的目的。（2）效应B细胞中产生抗体的基因，转移到肿瘤细胞内的 分子中，使抗体基因在肿瘤细胞中指导抗体的合成。（3）在人体内，当B淋巴细胞受到特定的 后会分化为 ，与效应B细胞合成并分泌抗体的功能密切相关的细胞器有 。（4）干扰素是一种新开发的药品，在人体内是由 产生的。下图是单克隆抗体制备
15、过程示意图，据图回答： （1）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得 细胞，该细胞能够产生 。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射 类物质。（2）B过程是一个 过程，该过程的进行需要灭活的 或 的诱导；杂交瘤细胞继承了 。（3）图中D进行细胞培养，目的是 。（4）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是 。（1）B淋巴细胞；特异性抗体；抗原（2）动物细胞融合；病毒；聚乙二醇；双方细胞的的遗传物质，能产生特异性抗体，并能在体外培养条件下大量繁殖（3）挑选出能够产生单克隆抗体的细胞群（4）特异性强，灵敏度高【学科内综合】（多选）最近，科学家利用猪的动脉血管以及能够模拟胚胎环境
16、的新型生物反应器，成功的在实验室内培育出新的动脉血管。这种培养新血管的技术可能需要（ABD）A“克隆”技术 B去核卵细胞C激发血管细胞的“全能性” D激发血管细胞发育成血管的潜能下列生物技术(方法)使用不恰当的是(A)A可以利用目镜为18X、物镜为40X的显微镜观察到细胞膜的磷脂双分子层B可以利用细胞融合技术获得单克隆抗体C可以利用同位素示踪法研究蛙胚层分化D可以利用亚硝酸诱变育种用以下四种细胞工程技术培育出的新个体中，遗传物质全部来自一个亲本的方法是（A）A细胞组织培养 B细胞融合 C动物胚胎移植 D细胞核移植植物细胞培养和动物细胞培养所用的培养基成分中特有的物质分别是（D）A植物激素，无机
17、盐B氮，水 C氨基酸和琼脂 D植物激素，氨基酸中科院动物研究所成员通过将大熊猫体细胞核移植到去核后的兔子卵细胞中，成功地培育出大熊猫的早期胚胎这项研究成果属于（B）A杂交育种 B细胞工程 C基因工程 D染色体工程胚胎移植技术目前主要应用于（B）治疗某些些遗传病 解决某些孕症者的生育问题 提高动物的抗病力 提高良种家畜的繁殖力 克服远缘杂交的不亲和障碍A B C D非典型肺炎可用新型冠状病毒特异性抗体进行快速诊断。在制备单克隆抗体的过程中，一定不使用的细胞是（B）AB淋巴细胞 BT淋巴细胞 C骨髓瘤细胞 D杂交瘤细胞发下四种生物工程技术中培育新个体的方法中，不具备两个亲本遗传性的方法是（A）A细
18、胞的组织培养 B细胞融合 C动物的胚胎移植 D细胞核移植科学家在早期胚胎中发现了干细胞，它能在体外形成不同的组织或器官。这些干细胞是在一定条件下通过 和 形成不同的组织或器官的。除了胚胎外，在脐血、骨髓、脑组织等也发现了干细胞，通过进一步研究发现，有希望用于患者的组织修复或器官移植，但在进行器官移植时，如果患者的细胞表面的蛋白质类物质与移植器官的不相同，就会引起排斥反应，所以最好选用 （患者本人、父母、子女、配偶）的干细胞培育的器官。细胞分裂；细胞分化；患者本人下列哪种细胞的全能性最容易表达出来（）A青蛙的上皮细胞 B胡萝卜的韧皮部细胞C大白鼠的肝脏细胞 D人皮肤生发层细胞克隆羊“多莉”的培育
19、成功证明了（）A动物细胞的再生能力 B原癌基因百激活C动物细胞的全能性 D动物细胞核的全能性在动物的胚胎发育过程中，早期原肠胚的细胞从一个部位移植到另一个部位，被移植的细胞能适应新的的部位并参与那里的器官形成，但如果在原肠胚的末期把未来发育为蝾螈下肢的部分移植到另一蝾螈胚胎不长下肢的部分，将发育为一条多余的腿，这说明A原肠胚末期已经出现了组织和器官的形成B细胞的全能性C原肠胚末期出现了细胞分化D原肠胚末期出现了细胞癌变如右图所示某哺乳动物生殖过程示意图。若图中动物个体是克隆动物，则的遗传性状主要由图中哪种细胞所决定?（）Aa Bb Cc Dd在目前现有技术条仟下，还不能将从动物体内分离出来的成
20、熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞孩移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是（C）A卵细胞大，便于操作 B卵细胞含有的营养物质多C卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达 D重组细胞才具有全能性1952年1953年，美国科学家斯提瓦用胡萝卜根的悬浮培养细胞进行人工培养，发现单个细胞能象受精卵发育成胚一样的途径，发育完成整植株。1997年，英国维尔穆特等从白面母绵羊乳腺上皮细胞静息培养，然后把它的核移入黑面母绵羊去核的卵细胞中形成重组细胞，并将重组细胞培养成胚胎，将胚胎植入另一母羊的子宫，后获得了分娩羊多莉。阅读上述材料后回答下列问题（1）文中的悬浮培养细胞和
21、乳腺上皮细胞均为 。（2）斯瓦提的实验证明了 ，维尔穆特的实验证明了 。从细胞结构和遗传角度分析，两位科学家实验结论的得出其根本原因在于 。（3）斯瓦提就和维尔穆特实验的差别在于 。（4）维尔穆特此项实验技术又称为 技术。该技术的经济意义在于 （试举二例说明）克隆突破熊猫繁殖难题的科研进程。 中国科学院动物研究所陈大元研究员带领的科研小组，首先选择了兔子卵细胞作为受体卵。他们采用了两种核移植方法，即电融合法和核直接注射法，把大熊猫的体细胞核移入兔的去核卵细胞质中。 经过精心的实验，他们已得到了大熊猫的重构胚。实验结果显示，大熊猫的3种体细胞移植到去核兔卵母细胞中均可以卵裂。并进行早期发育，3种
22、供体细朐核移植的融合率在53%59%之间；融合后重构胚进行培养后，囊胚率以乳腺细胞最高，而骨骼肌细胞的最低；重构囊胚细胞的染色体数目为42条，与供体(大熊猫)细胞染色体数目相同，而受体动物家兔的染色体为44条。经DNA指纹分析，也证明了它的遗传特性为大熊猫的遗传特性。实验还证明，卵细胞质使体细胞核去分化不具有特异性。 大熊猫异种重构胚能否在寄母子宫着床乃至进行全程发育还是道难题，现在在深入试验中。 根据以上材料回答下列问题：(1)下列叙述不是动物克隆技术的益处的是( )A探索异种克隆技术，拯救濒危物种B克隆技术与转基因技术结合使异种器官移植成为可能C克隆技术重要性在于复制出一个动物或一批生物D克隆技术的研究将帮助人类认识衰老过程(2)“去分化”是指 。(3) 细胞分化为囊胚，囊胚是指 的胚。(4) 科技预测；大熊猫异种重构胚如果着床成功并顺利生产发育，其表现性状主要是（）A大熊猫的特点 B兔子的特点C兼有大熊猫和兔子的特点 D不具生殖能力(1)C (2)使已分化的细胞重新具有分裂的能力 (3)具囊胚腔 (4)A