1、高考资源网（） 您身边的高考专家考点 3 3 物质的提取、 分离和鉴定生物组织中还原糖、脂肪及蛋白质的鉴定 叶绿体中色素的提取和分离 DNA的提取与鉴定 物质的鉴定与实验设计的综合经典易错题会诊命题角度一生物组织中还原糖、脂肪及蛋白质的鉴定1 麦种子分别置于20和30培养箱中培养4天，依次取等量的萌发种子分别制成提取液I和提取液。取3支试管甲、乙、丙，分别加入等量的淀粉液，然后按下图加入等量的提取液和蒸馏水，45水浴保温5分钟，立即在3支试管中加入等量斐林试剂并煮沸2分钟，摇匀观察试管中的颜色。结果是 A甲呈蓝色，乙呈砖红色，丙呈无色 E甲呈无色，乙呈砖红色，丙呈蓝色 C甲、乙皆呈蓝色，丙呈砖
2、红色 D甲呈浅砖红色，乙呈砖红色，丙呈蓝色 考场错解A或B 专家把脉对种子成分及代谢过程、斐林试剂鉴别葡萄糖的原理不熟悉。种子在20下只有少量葡萄糖生成，而在30条件下生成葡萄糖较多。斐林试剂是 CuS04和NaOH混合液，本身为蓝色。对症下药D2 组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是 A可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀 B只有脂肪的鉴定需要使用显微镜 C用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热 D使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用 考场错解C或D 专家把脉认为双缩脲试剂检测蛋白质需要加热，或认为双缩脲试剂的使用也是现配现用。双缩脲试剂与斐林试剂成
3、分相同，但浓度不同，使用方法也不同，可以配制保存，检测时不需加热。对症下药A专家会诊分析比较可溶性还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定原理、操作过程和注意问题。斐林试剂由NaOH和CuS04混合配制而成，与可溶性还原糖在加热条件下，生成砖红色沉淀。双缩脲试剂与斐林试剂成分相同，但浓度和使用方法不同，在碱性环境下，双缩脲能与Cu2+作用，形成紫红色或紫色络合物。考场思维训练1 某些单子叶植物，如菠菜、鸢尾等的叶子内含有大量的可溶性还原糖，但这些植物的叶子不宜做鉴定还原性糖的实验材料，原因是 A这些植物的叶片不宜磨碎 B在研磨时糖类易被破坏 C叶片中的叶绿素颜色较深，掩盖了发生的颜色反应 D叶片中光合作用的
4、产物以淀粉的形式存在1C解析：鉴定可溶性还原糖时，植物组织是常用的实验材料，但必需加以选择，在双子叶植物中，光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成淀粉，暂时储存在叶子内。有些单子叶植物，如韭菜、鸢尾，并不将光合作用的产物转变为淀粉，因此叶子中有大量的可溶性还原糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显。因此，也不宜用单子叶植物的叶子做实验材料。2 下列关于实验现象中出现的颜色反应叙述正确的是 A向盛有葡萄糖溶液的试管中加入双缩脲试剂，产生砖红色沉淀 B纸层析法分离叶绿体中的色素，可以观察到滤纸条上出现4条色素带，其颜色从上到下依次是黄绿色、橙黄色、蓝
5、绿色和黄色 CDNA的粗提取与鉴定实验中，DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色 D脂肪可以被苏丹溶液染成紫色2C解析：A中应加斐林试剂，B中从上到下依次为橙黄色、黄色、蓝绿色、黄绿色，D中就为橘黄色。命题角度二叶绿体中色素的提取和分离l 在A、B、C三个研钵中加2克剪碎的新鲜菠菜绿叶，并按下表所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液，即深绿色、黄绿色(或褐色)、几乎无色。注：“+”表示加；“-”表示不加。试回答： (1)A处理得到的溶液颜色是 ，原因是 。 (2)B处理得到的溶液颜色是 ，原因是 。 (3)C处理得到的溶液颜色是 ，原因是 。处理ABCSiO2(少量)+CaCO3(少量)
6、-+95乙醇(10毫升)+-+蒸馏水(10毫升)-+- 考场错解 (1)几乎无色 没有CaC03，色素被破坏 (2)黄绿色 部分色素因缺少乙醇不能提取 (3)深绿色能提取全部色素 专家把脉对叶绿素提取过程中各种物质的作用理解不清楚。(1)因为A中未加CaCO3，使其中的部分叶绿素受到破坏，所以溶液颜色为黄绿色。(2)B中加入了 SiO2和CaC03研磨出的叶绿素等色素不能溶解于蒸馏水中，故溶液几乎无色。(3)B中加入了SiO2和CaCO3，研磨出的叶绿素等色素能溶解于有机溶剂酒精中，故溶液为深绿色。 对症下药 (1)黄绿色 部分叶绿素受到破坏(2)几乎无色 叶绿素不溶于水 (3)深绿色 大量叶
7、绿素溶于乙醇中2 某同学在做提取叶绿体巾色素的实验时，收集到的色素提取液为淡绿色。分析产生该结果的可能原因是： ； ； ； 。 考场错解对实验过程不熟悉因而得不出正确答案。 专家把脉本题具有较大的开放性，要求学生不仅对叶绿体中色素的提取和分离过程熟悉，还要求掌握一些实验原理。如取材上应选取叶绿素含量高的叶片；加入CaC03的目的是防止叶绿体中的色素被破坏；而丙酮的量则不宜加得太多，否则会使得色素溶液过稀，从而使实验效果不理想。 对症下药研磨不充分，色素未能充分提取出来丙酮加入的量太多稀释了色素提取液未加CaCO3粉末，叶绿素分子被破坏选材不当，没有利用鲜嫩绿叶专家会诊叶绿体中的色素能够溶解在有
8、机溶剂中，所以用丙酮提取叶绿体中的色素。叶绿体中的四种色素在层析液中的溶解度不同，层析液在滤纸上扩散的速度也不同，溶解度高的扩散得快，溶解度低的扩散得慢。在实验操作中应注意叶片的选择、滤液细线的画法和色素的分离方法。考场思维训练1 下列哪组是影响叶绿体色素分离效果的关键步骤 选植物绿叶研磨过滤画滤液细线层析时不让滤液细线触及层析液观察色素带 A B C D1A解析：本实验关键是保证色素的量，选材时新鲜绿叶中色素含量高。由于色素存在于叶绿体中，所以要充分研磨，破坏叶绿体，使色素大量被释放。色素能溶于层析液，所以层析时，一定注意不要让滤液细线触及层析液。2 某同学在做“叶绿体中色素的提取分离”实验
9、时，操作情况如下所述，结果实验失败请指出其错误所在：(1)将5 g新鲜完整的菠菜叶，放入研钵中，加入丙酮、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨。然后将研磨液倒入基部放有滤纸的小玻璃漏斗中过滤，将滤液收集到小试管中备用。(2)用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线处小心均匀地画出一条滤液细线，并连续迅速地重复画23次。(3)把画好细线的滤纸条插入层析液中，并不断摇晃，以求加快色素在滤纸条上的扩散。2(1)未去除粗叶脉和将叶剪碎，降低了叶绿素提取率；倒人基部放有滤纸的小玻璃漏斗中；未用棉塞塞紧试管口。(2)上一次滤液细线未干燥，即开始下一次画线，使滤液线较粗或线上色素量较低(3)由于摇晃，层析液接触滤液线，
10、溶解了色素命题角度三DNA的提取与鉴定1 关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选取鸡血做实验材料的原因是什么?请回答： (1)鸡血细胞中红细胞 ，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，含红细胞较多，可以提供丰富的 。 (2)生活在牧区的人们，采集牛马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后，结果是 ，这是因为这些动物和人类一样 ，若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行，这是因为 。 (3)若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 ，使组织细胞更易分解。 考场错解(1)较多DNA(2)无红色细胞或很少 不合DNA(细胞无细胞核) 肝细胞含DNA(3)盐酸 专家把脉
11、对哺乳动物和鸟类红细胞的区别不清楚。鸟类红细胞含有细胞核，而哺乳类红细胞(成熟)不舍细胞核，无DNA，肝脏细胞含细胞核，可作为提取DNA的材料，而使肝脏组织细胞分散开，应使用胰蛋白酶处理。 对症下药 (1)含有细胞核DNA(2)DNA含量 很少红细胞无细胞核，无DNA肝脏细胞含有细胞核(3)胰蛋白酶2 DNA不溶于下列何种溶液 ANaCl溶液 B酒精溶液 CKCl溶液 DMgCl2溶液 考场错解A 专家把脉 对DNA的提取方法理解不当导致错选。 DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，而在2 mol/L的NaCl溶液中溶解度则较高。DNA不溶于95的酒精溶液。 对症下药B专家会
12、诊DNA的粗提取与鉴定的原理是DNA在氯化钠溶液中的溶解度随氯化钠的浓度变化而改变。DNA不溶于酒精溶液，细胞中某些物质可以溶于酒精溶液而对DNA进行提纯。DNA遇二苯胺会染成蓝色可用来鉴定DNA。实验过程包括制备鸡血细胞液、提取鸡血细胞的细胞核物质、溶解细胞核内的DNA、析出DNA、析出的 DNA再溶解、提取较纯净的DNA鉴定。考场思维训练1 在DNA提取分离实验中，有五次用玻璃棒搅拌。第一次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液是为了 ，第二次搅拌加2 mol/L的NaCl溶液是为了使其 ，第三次搅拌加蒸馏水至0.14 mol/L的NaCl溶液是为了 ，第四次搅拌加2mol/L NaCl溶液中的纱布上黏
13、稠物是为了 ，第五次搅拌体积分数为95的酒精是为了 。1使血细胞加速破裂 混合均匀 析出含DNA的黏稠物使DNA黏稠物尽可能多地溶于溶液中 提取含杂质较少的DNA解析：要求理解DNA提取实验每一步骤的含义和作用。2 一位同学受老师委托去采集鸡血，鸡群中有雌鸡也有雄鸡，他想应该取含红细胞最多的个体的血，于是他选了下列哪种鸡 A健壮的雄鸡 B健壮的雌鸡 C小母鸡 D移植入睾丸的母鸡2A解析：雄鸡的单位体积血中红细胞数多于雌鸡。探究开放题解答综合问题物质的鉴定与实验设计的综合1 是与高中生物实验有关的内容。 (1)请将下列实验名称与材料、试剂、用具的对应关系用连线表示。每项只准选择一次。实验名称材料
14、、试剂、用具探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用细胞质流动的观察温度对淀粉酶活性的影响叶绿体中色素的提取和分离观察植物细胞的有丝分裂黑藻斐林试剂碘液载玻片乙醇 (2)做“叶绿体中色素的提取和分离”实验时，画滤液细线要注意的事项是 ；为了防止丙酮和苯危害我们身体健康，在研磨和层析分离时应当分别采取的操作措施是 、 。 解题思路本题属于送分题，牢记课本内容即可。 解答(1)探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用 斐林试剂 细胞质流动的观察 黑藻 温度对淀粉酶活性的影响 碘液 叶绿体中色素的提取与分离 乙醇 观察植物细胞的有丝分裂 载玻片(2)滤液细线均匀且直，滤液干后重复23次研磨时研钵上加开洞的纸盖层析装置要加培
15、养皿盖2 贮藏根组织细胞中是否存在蛋白质和DNA?某生物小组对此进行研究，他们从网上查阅资料得知：蛋白质在10NaCl溶液中可沉淀析出；在蛋白质溶液中，加入双缩脲试剂，溶液呈现特有的颜色；DNA溶于10NaCl溶液，但在95酒精中呈白色絮状沉淀析出。实验材料：白萝卜。 实验用具：粉碎机、烧杯、漏斗、试管、滤纸、玻棒、镊子、载玻片、天平、纱布。 药品及试剂：蒸馏水、NaCl、95酒精、甲基绿染液、双缩脲试剂、蛋白质标准样品。 请你根据所提供的条件参与实验设计并完成实验。 一、材料处理： 。 二、提取： 。 三、鉴定及结果： 。 四、讨论： 。 1蛋白质在萝卜贮藏根组织细胞中所起的作用 是 。 2
16、DNA主要来自萝卜贮藏根组织细胞的 。 解题思路本题把物质鉴定与实验设计综合起来考查，既考查了DNA和蛋白质的鉴定结果，又考查了实验设计中对照原则的应用，如做有无蛋白质的鉴定实验中必须要设计一组空白的对照组，从而使实验更为严谨。 解答一、材料处理：向经纱布过滤得到的滤液中加入10NaCl，直至沉淀析出。经滤纸过滤，将滤纸上的沉淀物放入试管中，加入1 mL蒸馏水振荡，用于蛋白质鉴定。二、提取：除去蛋白质的滤液中，加入95酒精，用玻棒轻轻搅拌，见有白色絮状沉淀产生，经滤纸过滤，用镊子将滤纸上的絮状沉淀置于载玻片上，用于DNA鉴定。三、鉴定及结果：1在用于蛋白质鉴定的试验试管中，加入双缩脲试剂，产生
17、呈色反应，同时将蛋白质标准样品和l mL蒸馏水放入另一支试管，加入双缩脲试剂产生呈色反应。观察到两支试管中颜色基本一致，说明试验试管中有蛋白质存在。2在用于DNA鉴定的栽玻片上，滴加甲基绿染液，DNA呈现蓝绿色，说明该白色絮状沉淀为DNA。3通过对白萝卜贮藏根匀浆滤液的检测，说明有蛋白质和DNA的存在。四、讨论：1是细胞膜等生物的结构成分，酶等功能蛋白质的组成成分，也是糊粉粒等贮存蛋白质的成分。2细胞核规律总结解答生化鉴定类实验题时，首先要抓住基础，如三大有机物的鉴定试剂及颜色反应等：然后就是要注意灵活运用实验设计的一些策略，如对照原则及单一变量原则的运用，科学的安排实验顺序，语言要规范准确等
18、。做到上述两点，此类题便不难作答。考点高分解题综合训练1四瓶失去标签的无色透明液体各装有大肠杆菌超标的自来水：丙球蛋白(一种抗体)溶液、溶解着DNA分子的0.015 mol/LNaCl溶液、葡萄糖溶液。依次 利用下列哪组物质即可鉴别出来伊红一美蓝培养液双缩脲试剂苏丹 二苯胺班氏试剂斐林试剂碘液A B C D1D解析：大肠杆菌在伊红一美蓝培养基中形成深紫色菌落。蛋白质与双缩脲试剂作用产生紫色，二苯胺试剂可用于鉴定DNA，斐林试剂可用于鉴定还原糖。2部分省市爆发了禽流感，市场上买不到活鸡采鸡血，使DNA的粗提与鉴定”这一实验不能开展，有人提出用市场上容易买到的新鲜猪血或牛血代替，你认为 A可以，新
19、鲜的猪血和牛血中有大量的红细胞，可以提取DNA B不可以，新鲜的猪血或牛血中无红细胞，不能提取DNA C可以，新鲜的猪血或牛血中有的红细胞中有细胞核，可以提取DNAD不可以，新鲜的猪血或牛血中的红细胞中无细胞核，不能提取DNA2D解析：哺乳动物红细胞中无细胞核。 3 某人做淀粉酶对淀粉和蔗糖水解作用的实验时，在对照试管加入斐林试剂后，也出现了砖红色沉淀，可能原因是 A试管中加入的是麦芽糖或葡萄糖 B蔗糖是还原性糖 C裴林试剂失效了 D蔗糖放置久了，被微生物分解，也可能是试管不干净3D解析：蔗糖被微生物分解可产生可溶性还原糖。4下图表示改进装置，下列与之有关的叙述中，不正确的是 A应向培养皿中倒
20、入层析液 B应将滤液滴在a处，而不能滴在b处 C实验结果应是得到四个不同颜色的同心圆(近似圆形)D实验得到的若干个同心圆中，最小的一个圆呈橙黄色4D解析：扩散速度最慢的色素为叶绿素b5 下列哪个实验用到显微镜 A脂肪成分的鉴定 B蛋白质的鉴定 C淀粉的鉴定 D还原糖的鉴定5A解析：因为脂肪成分鉴定的实验。是直接将苏丹染液滴在花生子叶很薄的切片上，至于是什么成分被染成橘黄色，肉眼不容易分辨，只有制成临时装片，放在高倍显微镜下才能观察到是子叶中的脂肪颗粒被染成橘黄色。而题中的其他三个实验都是直接就可以观察到其颜色反应。6 在做“叶绿体中色素的提取分离”实验时： (1)如果没有丙酮和菠菜叶片，要保证
21、分离后的色素带清晰，可以用以代替的最佳实验材料是 A酒精和麦苗 B酒精和大白菜 C蒸馏水和大白菜 D蒸馏水和麦苗 (2)为了获得整齐又不重叠的四条色素带，在画滤液细线时应注意 。 (3)用纸层析法分离叶绿体中四种色素的原理是 。 (4)下图为分离叶绿体中色素的装置，请指出其中的三处错误： 。6(1)A(2)画线要细、直、齐，重复画23次 (3)不同色素在层析液中溶解度不同，随层析液在滤纸条上的扩散速度不同 (4)没有盖上培养皿；层析液没及时画滤液细线；滤纸条不能接触烧杯壁考点小资料中学阶段常见化合物的鉴定及颜色反应需鉴定的化合物的种类鉴定试剂颜色反应可溶性还原糖斐林试剂砖红色脂肪苏丹染液苏丹染液橘黄色红色蛋白质双缩脲试剂紫色DNA二苯胺试剂蓝色淀粉革兰氏碘液蓝色高考资源网w w 高 考 资源 网- 9 - 版权所有高考资源网