1、专题1 基因工程【单元知识网络】 基因工程的概念：依据、技术、目的 “分子手术刀”限制酶基本工具 “分子缝合针”DNA连接酶 “分子运输车”载体 目的基因的获取 基因表达载体的构建（核心）基 基本操作程序 将目的基因导入受体细胞（转化）因 目的基因的检测与鉴定工 植物基因工程程 动物基因工程 基因工程的应用 基因工程药品的生产 基因治疗 蛋白质工程：蛋白质工程崛起的缘由、基本原理【单元强化训练】一、选择题1、除了下列哪一项之外，其余的都是基因工程的运载体所必须具备的条件A能在宿主细胞中复制并保存B具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接C具有标记基因，便于进行筛选D是环形状态的DNA分子【解析】
2、原核细胞如细菌的核DNA也是环状DNA，但不能作运载体，因为它不具备A、B、C三个条件。【答案】C2、科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是()A采用反转录的方法得到的目的基因有内含子B基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的C马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D用同一种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子【解析】采用反转录的方法得到目的基因的过程是以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需要的目的基因。由于信使RNA中没有与内含子相
3、对应的部分，所以采用反转录的方法得到的目的基因不存在内含子。基因非编码区对于基因的表达具有调控作用。植物细胞的全能性很容易得到表达，所以转基因植物培育过程中的受体细胞可以是植物的体细胞。限制酶具有专一性，只有用同一种限制酶处理才能获得相同的黏性末端，才能够形成重组DNA分子。【答案】A3、科学家将干扰素基因进行定点突变，然后导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性。该生物技术为()A基因工程B蛋白质工程C基因突变 D细胞工程【解析】基因工程是通过对基因的操作，将符合人们需要的目的基因导入适宜的生物体，使其高效表达，从中提取所
4、需的基因控制合成的蛋白质，或表现某种性状，蛋白质产品仍然为天然存在的蛋白质；蛋白质工程却是对控制蛋白质合成的基因进行改造，从而实现对其编码的蛋白质的改变，所得到的已不是天然的蛋白质。题目中的操作中涉及的基因显然不再是原来的基因，其合成的干扰素也不是天然干扰素，而是经过改造的，是人类所需的蛋白质，因而整个过程利用的生物技术应为蛋白质工程。【答案】B4、用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是()A常用相同的限制酶处理质粒和含目的基因的DNA分子BDNA连接酶、限制酶和运载体是重组DNA必需的工具酶 C可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组DNA D常选用细菌作为重组
5、质粒受体主要是因为细菌繁殖快【解析】一般来说，一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，且在特定位点进行切割。DNA重组技术所用的工具酶包括限制酶、DNA连接酶，运载体不属于酶。选择受体细胞的重要条件是能够快速繁殖。【答案】B5、要将目的基因与载体连接起来，在基因操作上应选用()A只需DNA连接酶B同一种限制酶和DNA连接酶C只需限制酶D不同的限制酶与DNA连接酶【解析】要将目的基因与载体连接起来，应选用同一种限制酶切割目的基因和载体，两者暴露出相同的黏性末端，用DNA连接酶连接时，碱基之间才会按碱基互补配对形成氢键，相邻两个脱氧核苷酸之间在DNA连接酶的作用下形成磷酸二酯键。【答案】B6、下图为D
6、NA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是()A BC D【解析】图是将一个DNA切成互补的两个黏性末端，必需限制性内切酶的作用；图是将两个DNA片段连接在一起，需DNA连接酶的作用；图是DNA分子双链解成两条互补单链的过程，需解旋酶的作用；图是DNA复制的过程，需DNA聚合酶的作用。【答案】C7、科学家利用基因工程培育出了耐盐的转基因水稻新品系。下列有关叙述错误的是()A获得目的基因需用限制性内切酶和DNA连接酶B可通过农杆菌的感染以实现重组质粒导入受体细胞C含耐盐基因的水稻细胞经植物组织培养可获得植株D可用较高浓度的盐
7、水浇灌以鉴定水稻植株的耐盐性【解析】农杆菌能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数的单子叶植物没有感染能力，而水稻属于单子叶植物。【答案】B8、下列关于蛋白质工程的叙述中，错误的是（ ）A蛋白质工程的实现需要多学科技术的参与B蛋白质工程创造出了新的基因C蛋白质工程又称为第二代基因工程D蛋白质工程就是中心法则的简单逆反【解析】蛋白质工程是按照以下思路进行的：确定蛋白质的功能蛋白质应有的高级结构蛋白质应具备的折叠状态应有的氨基酸序列应有的碱基排列，可以创造出自然界中不存在的蛋白质。所以蛋白质工程并不是中心法则的简单逆反。【答案】D9、(2011哈尔滨模拟)如图表示限制性内切酶切割某DNA
8、分子的过 程，下列有关叙述，不正确的是()A该限制酶能识别的碱基序列是GAATTC，切点在G和A之间B用此酶切割含有目的基因的片段时，必须用相应的限制酶切割运载体，以产生与目的基因相同的黏性末端C要把目的基因与运载体“缝合”起来，要用到基因工程的另一个工具DNA聚合酶D限制酶切割DNA分子时，是破坏了同一条链上相邻脱氧核苷酸之间的化学键而不是两条链上互补配对的碱基之间的氢键【解析】由图示可知，该限制酶识别的碱基序列是GAATTC，切点在G和A之间；要获得重组DNA分子，必须用同一种限制酶切割运载体，得到相同的黏性末端，将目的基因与运载体“缝合”起来的是DNA连接酶，而不是DNA聚合酶。限制酶切
9、割的是同一条链上相邻脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。【答案】C10、(2011江西重点联考)在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞和组织才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答，叙述正确的是()A过程需要的酶主要有限制性内切酶和DNA连接酶B过程需要加入卡那霉素进行选择培养C过程为脱分化过程，培养基中只需加入营养物质、琼脂和激素D过程可以用放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测D过程可以用虫感染植株进行个体水平的检测A BC D【解析】A过程中重组质粒的构建需要限制性内切酶和DNA连接
10、酶；B过程中需加入卡那霉素进行筛选，选出含重组质粒的土壤农杆菌；培养基中除加入营养物质、琼脂和激素外，还应加入蔗糖、维生素等物质；可以用放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测或用虫感染植株进行个体水平的检测。【答案】B11、(2011梧州一模)3脂肪酸是深海“鱼油”的主要成分，它对风湿性关节炎以及糖尿病等有很好的预防和辅助治疗作用。科学家从一种线虫中提取出相应基因，然后将该基因导入猪胚胎干细胞，以期得到富含3脂肪酸的转基因猪。下列相关叙述正确的是()A从线虫中提取目的基因需要特定的限制性内切酶，此酶作用于氢键B构建重组DNA时，常用的运载体是质粒，受体细胞可以是胚胎
11、干细胞，也可以是受精卵C培养胚胎干细胞的培养基中，所加入的动物血清也是植物组织培养必需成分D培育转基因猪需利用到转基因技术、动物细胞培养技术、核移植技术【解析】限制性内切酶不作用于氢键，而是作用于磷酸二酯键；植物组织培养中不加动物血清，需加入必需的矿质元素、植物激素等；题中并未涉及核移植技术。【答案】B12、目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是()检测受体细胞是否有目的基因检测受体细胞是否有致病基因检测目的基因是否转录mRNA检测目的基因是否翻译蛋白质A.B.C.D.【解析】目的基因的检测主要有三种：(1)检测转基
12、因生物的染色体的DNA上是否插入了目的基因，方法是用DNA探针；(2)检测目的基因是否转录出了相应的mRNA，方法也是使用基因探针与之杂交；(3)检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质，常用方法是抗原抗体杂交，检测杂交带是否出现。【答案】C13、上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍。以下与此有关的叙述中，正确的是()A“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物B“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因C只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基
13、因只在牛乳腺细胞中是纯合的D转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，故不合成人白蛋白【解析】“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中的人白蛋白基因合成出更多的蛋白质。动物细胞的全能性较难实现，用牛的卵细胞不能培养形成转基因牛。转基因牛的细胞中都含有人白蛋白基因，人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在转基因牛的乳腺细胞中表达。【答案】D14、(2011北京朝阳一模)目前人类利用基因工程的方法成功培育出转基因抗虫棉，以下说法正确的是()A苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达B抗虫基因导入棉花叶肉细胞后，可通过传粉、受精的方
14、法，使抗虫性状遗传下去C标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因D转基因抗虫棉经过种植，棉铃虫不会产生抗性，这样可以有效消灭棉铃虫【解析】苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后需用农杆菌转化法，导入棉花的叶肉细胞，不能直接进入棉花的叶肉细胞表达；棉花叶肉细胞不能进行减数分裂产生配子，故抗虫基因导入棉花叶肉细胞后，可以通过组织培养技术，使抗虫性状遗传下去；棉铃虫抗性的产生是基因突变的结果，但抗虫棉的自然选择会使棉铃虫的抗性基因频率升高。【答案】C15、在基因工程操作的基本步骤中，没有进行碱基互补配对的是A人工合成目的基因B目的基因与运载体结合C将目的基因导入受体细胞D目的基因的检测表达【解
15、析】基因工程操作过程中，人工合成目的基因的方法有两种，反转录法中的反转录成单链 DNA 与合成双链 DNA 的过程都需要碱基互补配对，直接合成法最后合成 DNA 时需要人为进行碱基互补配对；目的基因与运载体结合过程涉及两个黏性末端上碱基互补配对；目的基因的表达涉及转录和翻译两个过程，都有碱基互补配对的过程。【答案】C16、利用细菌大量生产人类胰岛素，下列叙述错误的是()A用适当的酶对运载体与人类胰岛素基因进行切割与黏合B用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌C通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细菌D重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人类胰
16、岛素【解析】本题考查基因工程的操作。切割运载体和目的基因是限制性内切酶；检测目的基因是否导入受体细菌是通过运载体上的标记基因；目的基因导入受体细胞需要复制和表达。【答案】C17、下列有关基因诊断和基因治疗的叙述，正确的是()A基因工程可以直接在细胞内修复有问题的基因B用基因替换的方法可治疗21三体综合征C基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因D应用基因探针可以检测出苯丙酮尿症【解析】有缺陷的基因不能在细胞内进行修复；21三体综合征是染色体疾病，用基因替换没有治疗效果；基因治疗是用正常基因替换缺陷基因；苯丙酮尿症是基因突变引起的遗传病，可以通过基因探针检测出来。【答案】D18、质粒是基因工程中常用
17、的运载工具，某质粒上有两种抗药基因可作为标记基因，a、b、c为三个可能出现的目的基因插入点，如右图所示。如果用一种限制酶将目的基因和质粒处理后，合成重组质粒，将重组质粒导入某高等植物受体细胞后，用含有药物的培养基筛选受体细胞，预计结果如下表。下列选项中正确的是()含有青霉素的培养基含有四环素的培养基能生长能生长不能生长能生长能生长不能生长A.如果出现结果，说明两个抗药基因都没有被破坏，转基因实验获得成功B如果出现结果，说明限制酶的切点在c点，目的基因在c点的断口处C如果出现或者结果，说明转基因实验失败D转移到受体细胞中的a、b基因的遗传遵循孟德尔规律【解析】当目的基因插入c点时，既不破坏抗氨苄
18、青霉素基因，也没破坏抗四环素基因，所以说会出现结果，但目的基因导入受体细胞并不一定能准确表达；如果出现，说明目的基因插在a处；如果出现，说明目的基因插在b处；只有整合到染色体上的外源基因才能符合孟德尔遗传定律。【答案】B19、科学家在某种农杆菌中找到了抗枯萎的基因，并以质粒为运载体，采用转基因方法培育出了抗枯萎病的金花茶新品种。下列有关说法正确的是()A质粒是最常用的运载体之一，质粒的存在与否对宿主细胞生存有决定性的作用B通过该方法获得的抗枯萎病金花茶，将来产生的花粉中不一定含有抗病基因C该种抗枯萎病基因之所以能在金花茶细胞中表达，是因为两者的DNA结构相同D为保证金花茶植株抗枯萎病，只能以受
19、精卵细胞作为基因工程的受体细胞【解析】质粒在宿主细胞中能够友好借居，但是不能对宿主细胞的生存起决定作用。由于在转基因植物体内基因只存在于某一染色体上，所以在减数分裂形成配子时随着同源染色体的分离，部分配子存在目的基因，而另外一半配子不含目的基因。抗枯萎病基因之所以能在金花茶细胞中表达，是因为两者共用一套密码子。转基因植物的受体细胞可以是受精卵，也可以是其他体细胞。【答案】D20、下列关于限制酶的说法不正确的是()A限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布B自然界中限制酶的天然作用是用来提取目的基因C不同的限制酶切割DNA的切点不同D一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列【解析】限制酶主要存
20、在于各种微生物中，而高等生物中则很少。自然界中的限制酶主要用来切割外来的DNA，进行自我保护。【答案】AB21、Mst 是一种限制性内切酶，它总是在CCTGAGG的碱基序列中切断DNA。图中显示了用Mst 处理后的正常血红蛋白基因片段。镰刀型细胞贫血症的根本原因是血红蛋白基因突变。下列有关叙述中，错误的是()A在起初的正常血红蛋白基因中有4个CCTGAGG序列B若血红蛋白基因某一处CCTGAGG突变为CCTCCTG，则用Mst 处理该基因后产生3个DNA片段C将Mst 酶用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断，若产生3个DNA片段，则血红蛋白基因正常D将Mst 酶用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断，若产生
21、4个DNA片段，则血红蛋白基因正常【解析】由图可知，正常血红蛋白基因中含有3个CCTGAGG序列，故能把该基因切成4个片段。如果某一CCTGAGG片段突变，则不能很好地识别和切割，所以Mst 酶切后只能产生3个片段。镰刀型细胞贫血症的基因诊断时，如果酶切后出现3个DNA片段，则说明血红蛋白基因不正常。【答案】AC22、下图表示一项重要的生物技术，对图中物质a、b、c、d的描述，正确的是a重组DNAA.a中存在着抗性基因，其非编码区通常不具遗传效应。B.b能识别特定的核苷酸序列，并将A与T之间的氢键切开C.c能连接双链间的A和T，使黏性末端处碱基互补配对D.若要获得真核生物的d，则一般采用人工合
22、成方法【答案】D23、多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95下使模板DNA变性、解链55下复性（引物与DNA模板链结合）72下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是： A变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸DPCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高【答案】C24、（2011天津模拟)用于判断目的基因是否转移成功的方法中，不属于分子检测的是( )A.
23、通过害虫吃棉叶看其是否死亡B.转基因生物基因组DNA与DNA探针能否形成杂交带C.转基因生物中提取的mRNA与DNA探针能否形成杂交带D.转基因生物中提取的蛋白质能否与抗体形成杂交带【解析】目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。首先，要检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。检测方法是采用DNA分子杂交技术，使DNA探针与基因组DNA杂交，如果显示出杂交带，就表明目的基因已插入染色体DNA中。其次，再检测目的基因是否转录出了mRNA，同样是采用分子杂交技术，让探针与mRNA杂交，如果显示出杂交
24、带，就表明目的基因已转录形成了mRNA。最后，检测目的基因是否翻译成蛋白质，从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。以上三种方法都是分子水平上的检测。除了上述的分子检测外，有时还需要进行个体生物学水平的鉴定。例如，通过害虫吃棉叶看其是否死亡，以确定是否具有抗性以及抗性的程度。【答案】A25、(2011黄冈模拟)限制酶Mun和限制酶EcoR的识别序列及切割位点分别是-CAATTG-和-GAATTC-。如图表示四种质粒和目的基因，其中箭头所指部位为酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是( )【解析】
25、此题考查的是基因工程中限制酶的运用。解答本题的关键是知道载体必须具备标记基因，且标记基因不能被破坏。A中Mun能切出与EcoR一样的AATT-黏性末端，且未破坏标记基因结构；B中质粒无标记基因，不符合载体的条件；C、D中破坏了标记基因。 【答案】A二、非选择题26、(2011南京质检)目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图一所示。(1)构建人工质粒时要有抗性基因，以便于_。(2)pBR322分子中有单个EcoR限制酶作用位点，EcoR只能识别序列GAATTC，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的
26、两侧各有1个EcoR的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoR切割后所形成的黏性末端。(3)pBR322分子中另有单个的BamH限制酶作用位点，现将经BamH处理后的质粒与用另一种限制酶Bgl处理得到的目的基因，通过DNA连接酶作用恢复_键，成功地获得了重组质粒。说明_。(4)为了检测上述重组质粒是否导入原本无ampR和tetR的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是_，图三结果显示，多数大肠杆
27、菌导入的是_。【答案】(1)筛选(鉴别目的基因是否导入受体细胞)(2)(3)磷酸二酯两种限制酶(BamH和Bgl)切割得到的黏性末端相同(4)能抗氨苄青霉素，但不能抗四环素pBR322 质粒27、农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题：(1)要获得该抗病基因，可采用_、_等方法。为了能把该抗病基因转入到棉花细胞中，常用的运载体是_。(2)要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用_进行切割。假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是() (3)切割完成后，采用_将运载体与该抗病基因连接，连
28、接后得到的DNA分子称为_。(4)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去_棉花细胞，利用植物细胞具有的_性进行组织培养，从培养出的植株中_出抗病的棉花。(5)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是()A淀粉 B脂类C蛋白质 D核酸(6)转基因棉花获得的_是由该表达产物来体现的。【解析】基因工程有四步曲，解答本题时就紧扣这四步曲。获得抗病毒基因常用的方法是从细胞中直接分离目的基因或根据mRNA碱基顺序和蛋白质的氨基酸序列人工合成目的基因；在基因工程中，常用的运载体是质粒；可以先用限制性内切酶把目的基因和运载体切出相同的黏性末端；再用DNA连接酶将运载体和目的基因连接起来，构成重组DNA
29、分子；用导入重组DNA分子的农杆菌感染棉花细胞，并用组织培养的方法把这样的棉花细胞培育成个体，从中筛选出有抗病性状的棉花；最后进行鉴定，可把普通棉和抗虫棉在同等条件下让害虫吞食，观察其效果即可。【答案】(1)从细胞中分离化学方法人工合成Ti质粒(2)限制性内切酶(限制酶)A(3)DNA连接酶重组DNA(4)感染全能筛选(选择)(5)C(6)抗病性状27、通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物。运用这一技术可使羊奶中含有人体蛋白质，下图表示这一技术的基本过程，在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是GGATCC，请回答：(1)从羊染色体中“剪下”羊蛋白质基因的酶是_，人
30、体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中需要的酶是_。(2)请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图。(3)人体蛋白质基因之所以能连接到羊的染色体DNA中，原因是_，人体蛋白质基因导入羊细胞时常用的工具是_。(4)此过程中目的基因的检测与表达中的表达是指_。(5)你认为此类羊产的奶安全可靠吗？理由是什么？_。【解析】基因工程的操作工具。首先要按照碱基互补配对原则，由已知的一条链完成质粒双链上的碱基序列，再根据切点写出切割形成的黏性末端。要求回答基因能够拼接的原因，不同生物的DNA化学组成和空间结构相同，即都具有相同的物质基础和结构基础。目的基因导入受体细胞需要先与运载体结合，最常用的运载体是质粒，也可以用动物病毒的DNA。基因的表达是指基因通过控制蛋白质的合成来控制生物的性状，即通过转录和翻译过程合成相应的蛋白质。为开放性的问题，但要注意回答的理由要与观点相对应。【答案】(1)限制性核酸内切酶DNA连接酶 (3)具有相同的物质基础和结构基础(有互补的碱基序列)细菌质粒或病毒(4)人体蛋白质基因在羊体细胞内控制合成人体蛋白质(5)安全，因目的基因导入受体细胞后，没有改变，控制合成的人奶蛋白质成分没有改变(或不安全，因目的基因导入受体细胞后，可能由于羊细胞中某些成分的影响，合成的蛋白质成分可能发生一定的改变)