1、专题二 课题2一、选择题1下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()AKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H4O、葡萄糖、尿素、琼脂、水BKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H4O、葡萄糖、琼脂、水CKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H4O、尿素、琼脂、水DKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H4O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水答案A解析根据题意可知，该培养基中必须要有尿素，故可排除B、D；而培养基中必须含有有机物作为碳源，又可排除C，故只有A符合题意。2某同学在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2760、295、和46，则菌落总数(个/mL)为()A2.7610
2、4B2.95104C3.775104 D4.6104答案C3在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有()由于土样不同 由于培养基污染由于操作失误 没有设置对照A BC D答案A4请选出下列正确的步骤()土壤取样称取10g土壤放入盛有90g无菌水的锥形瓶中吸取0.1mL进行平板涂布依次稀释101、102、103、104、105、106、107稀释度A BC D答案D二、非选择题5自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将他们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测
3、定的实验，请回答有关问题。步骤如下：A制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液B为了得到更加准确的结果，你选用_(稀释混合平板法、稀释涂布平板法)接种样品C适宜温度下培养结果分析：(1)测定的大肠杆菌数，再对应稀释倍数的106的培养基，得到以下几种统计结果，正确可信的是A一个平板，统计的菌落数是23B两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24C三个平板，统计的菌落数是21、5和52，取平均值26D四个平板，统计的菌落数是21、30、24和25，取平均值25(2)一同学在稀释倍数的106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(0.2
4、mL)_。(3)用这种方法测定密度，实际活菌数量比测得的数量_，因为_。(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？_答案步骤B：稀释混合平板法。结果分析：(1)D(2)1.17108(3)多，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落。(4)不能；因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程。一、选择题1关于土壤取样的叙述错误的是()A土壤取样，应选取肥沃湿润的土壤B先铲去表层土3cm左右，再取样C取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D应在火焰旁称取土壤答案C解析在土壤取样过程中，取样用的小铁铲和信封在使用前也要灭菌。2
5、PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93左右的高温。如果请你寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找()A土壤中 B海水中C热泉中 D冷库中答案C解析热泉中才可能有这种耐高温的酶。3需要在火焰旁操作的有()土壤取样 称取土壤稀释土壤 涂布平板微生物的培养A BCD答案D4可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()A以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹红试剂D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂答案A解析以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。二、非选择题5探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数。实验原理
6、农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表土制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。材料用具农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9mL无菌水的大试管若干、无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿，盛90mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。方法步骤(1)倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在_操作。(2)制备土壤稀释液。取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液1mL，转至9mL无菌水的大试管中，依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作，
7、试管口和移液管应在离火焰_cm处。(3)涂布。按照107103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布。每个稀释度下，无氮培养基至少涂布_个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布_个平板。(4)培养。放入恒温箱内，在适宜温度条件下培养3d4d。一般每隔_小时统计一次，选取_时的记录作为结果，这样可以防止_。(5)细菌的计数。当菌落数目稳定时，选取菌落数在_的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是_。(稀释度是105)(6)预期结果。相等稀释度下，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数_(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。理由是_。答案(1)酒精灯火焰旁(2)12(3)31(4)24菌落数目稳定因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目(5)303005107(6)多于无氮培养基上可以生存和繁殖的只是土壤中的自生固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类的生存解析考查微生物的分离及计数。要分离自生固氮菌，采用选择培养基分离的方法，缺乏氮源的培养基可用来分离自生固氮微生物，而其他微生物因缺乏氮源不能生长。实验步骤一般是：配制无氮培养基灭菌倒平板系列稀释涂布平板培养观察并计数。实验中要注意无菌操作和设计对照等。